ISO 8655-6:2022
(Main)Piston-operated volumetric apparatus — Part 6: Gravimetric reference measurement procedure for the determination of volume
Piston-operated volumetric apparatus — Part 6: Gravimetric reference measurement procedure for the determination of volume
This document specifies a gravimetric reference measurement procedure for the determination of volume of piston-operated volumetric apparatus (POVA). The procedure is applicable to complete systems comprising the basic apparatus and all parts selected for use with the apparatus, disposable or reusable, involved in the measurement by delivery (Ex) or contained (In).
Appareils volumétriques à piston — Partie 6: Mode opératoire de mesure gravimétrique de référence pour la détermination de volumes
Le présent document spécifie un mode opératoire de mesure gravimétrique de référence pour la détermination du volume des appareils volumétriques à piston (AVAP). Le mode opératoire est applicable aux systèmes complets comprenant l’appareil de base et toutes les parties sélectionnées pour être utilisées avec l’appareil, à usage unique ou réutilisables, impliqués dans le mesurage par procédé de distribution (Ex) ou de prélèvement (In).
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 8655-6
Second edition
2022-04
Corrected version
2022-06
Piston-operated volumetric
apparatus —
Part 6:
Gravimetric reference measurement
procedure for the determination of
volume
Appareils volumétriques à piston —
Partie 6: Mode opératoire de mesure gravimétrique de référence pour
la détermination de volumes
Reference number
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the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below
or ISO’s member body in the country of the requester.
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CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
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ii
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Contents Page
Foreword .v
Introduction . vi
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 General requirements . 2
5 Test equipment .2
5.1 General . 2
5.2 Balance . 2
5.3 Liquid reservoir . 3
5.4 Weighing vessel. 3
5.5 Measuring devices . 3
6 Test liquid . 3
7 Test conditions .3
7.1 General . 3
7.2 Test room . 3
7.3 Evaporation . 4
7.4 Test cycle time . 4
8 Procedure .4
8.1 General . 4
8.1.1 Test volume . 4
8.1.2 Number of measurements . 4
8.1.3 Weighing procedure . 4
8.1.4 Test conditions during weighing procedure . 5
8.1.5 Dispensing of samples . 5
8.2 Preparation . 5
8.3 Single-channel air displacement pipettes (in accordance with ISO 8655-2) . 5
8.3.1 General . 5
8.3.2 Test cycle . 5
8.4 Multi-channel pipettes (in accordance with ISO 8655-2) . 7
8.5 Positive displacement pipettes (in accordance with ISO 8655-2) . 7
8.6 Burettes (in accordance with ISO 8655-3) . 7
8.7 Dilutors (in accordance with ISO 8655-4) . 8
8.7.1 General . 8
8.7.2 Test cycle . 8
8.8 Dispensers (in accordance with ISO 8655-5) . 9
8.9 Syringes (in accordance with ISO 8655-9) . 9
8.9.1 General . 9
8.9.2 Test cycle . 9
9 Evaluation .10
9.1 Calculation of evaporation loss . 10
9.2 Calculation of the corrected weighing value of each quantity delivered . 10
9.3 Conversion of the corrected weighing values to volume . 10
9.3.1 General . 10
9.3.2 Calculation of volume using the general formula . 10
9.3.3 Calculation of volume using the Z correction factor .12
9.3.4 Mean delivered volume.12
9.4 Systematic error of measurement . 13
9.5 Random error of measurement .13
9.6 Uncertainty of measurement .13
iii
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ISO 8655-6:2022(E)
10 Reporting of results .14
Annex A (informative) Calculation of volumes from balance readings .15
Bibliography .16
iv
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ISO 8655-6:2022(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to
the World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see
www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 48, Laboratory equipment, in collaboration
with the European Committee for Standardization (CEN) Technical Committee CEN/TC 332, Laboratory
equipment, in accordance with the Agreement on technical cooperation between ISO and CEN (Vienna
Agreement).
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 8655-6:2002), which has been technically
revised. It also incorporates the Technical Corrigendum ISO 8655-6:2002/Cor .1:2008), which has been
technically revised.
The main changes are as follows:
— expanded uncertainty of the test equipment in Table 1 and 2 has been revised in conjunction with
ISO/TR 20461;
— Annex B has been deleted;
— new Clause 4 “General requirements” has been added;
[13]
— Formula (2) has been added based on ISO 4787 .
A list of all parts in the ISO 8655 series can be found on the ISO website.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.
This corrected version of ISO 8655:6:2022 incorporates the following corrections:
• Values in the key to Formula (4) are updated to include commas,
• Values in Table A.1 are updated to include commas.
v
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ISO 8655-6:2022(E)
Introduction
The ISO 8655 series addresses the needs of:
— manufacturers, as a basis for quality control including, where appropriate, the issuance of
manufacturer’s declarations;
— calibration laboratories, test houses, users of the equipment and other bodies as a basis for
independent calibration, testing, verification and routine tests.
The tests specified in the ISO 8655 series are intended to be carried out by trained personnel.
vi
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 8655-6:2022(E)
Piston-operated volumetric apparatus —
Part 6:
Gravimetric reference measurement procedure for the
determination of volume
1 Scope
This document specifies a gravimetric reference measurement procedure for the determination of
volume of piston-operated volumetric apparatus (POVA). The procedure is applicable to complete
systems comprising the basic apparatus and all parts selected for use with the apparatus, disposable or
reusable, involved in the measurement by delivery (Ex) or contained (In).
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 3696:1987, Water for analytical laboratory use — Specification and test methods
ISO 8655-1:2022, Piston-operated volumetric apparatus — Part 1: Terminology, general requirements and
user recommendation
ISO 8655-2:2022, Piston-operated volumetric apparatus — Part 2: Pipettes
ISO 8655-3, Piston-operated volumetric apparatus — Part 3: Burettes
ISO 8655-4, Piston-operated volumetric apparatus — Part 4: Dilutors
ISO 8655-5, Piston-operated volumetric apparatus — Part 5: Dispensers
ISO 8655-9, Piston-operated volumetric apparatus — Part 9: Manually operated precision laboratory
syringes
ISO/IEC Guide 2, Standardization and related activities — General vocabulary
ISO/IEC Guide 99, International vocabulary of metrology — Basic and general concepts and associated
terms (VIM)
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the terms and definitions given in ISO 8655-1, ISO/IEC Guide 2 and
ISO/IEC Guide 99 apply.
ISO and IEC maintain terminology databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at https:// www .electropedia .org/
1
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ISO 8655-6:2022(E)
4 General requirements
When performing calibrations according to the reference measurement procedure described in
this document, all provisions and requirements of this document shall be followed or exceeded (e. g.
performing 30 instead of 10 replicates per volume). If one or more of those requirements are not
followed, conformity to this document shall not be claimed.
5 Test equipment
5.1 General
Measurements by the following equipment (balance, thermometers, hygrometer, barometer) shall be
traceable to the International System of Units (SI) and shall meet the uncertainty requirements of this
document.
NOTE An example of the calculation of the expanded uncertainty of the gravimetric reference procedure is
[10]
given in ISO/TR 20461 .
5.2 Balance
The balance used for testing shall be chosen according to the minimum requirements specified in
Table 1, depending on the nominal volume of the apparatus under test. The balance parameters are
defined so that the expanded uncertainty in use is less than one-fourth of the maximum permissible
systematic error of the apparatus.
Table 1 — Minimum requirements for balances
Nominal volume of appa- Expanded uncertainty in
a
Resolution (d) Repeatability (s)
a, b
ratus under test (V) use U (k = 2)
mg mg mg
c c, e c, e
0,001 0,006 0,012
0,5 µl ≤ V < 20 µl
d d d
0,01 0,03 0,06
20 μl ≤ V < 200 μl 0,01 0,025 0,05
200 μl ≤ V ≤ 10 ml 0,1 0,2 0,4
10 ml < V ≤ 1 000 ml 1 2 4
1 000 ml < V ≤ 2 000 ml 10 10 40
a
The repeatability and expanded uncertainty in use value, in this table, apply in the volume determination of a single
channel apparatus. When a single-channel balance is used exclusively for volume determination of multichannel pipettes
the repeatability and expanded uncertainty in use values are double the values of this table. See also Footnote d.
b
Expanded uncertainty in use can be estimated according to Reference [2] or Reference [11] at the value of the nominal
volume. Expanded uncertainty in use shall include non-corrected errors as well as possible drift and environmental
effects to balance sensitivity. Regular sensitivity adjustments are recommended to improve balance sensitivity. Expanded
uncertainty in use may be taken from the balance calibration certificate or calculated separately (see example in
ISO/TR 20461). Expanded uncertainty in use can be estimated from the expanded uncertainty of calibration by considering
additional contributions as described above, where applicable
c
Single-channel balance.
d
Multi-channel balance, only valid for multi-channel pipettes. Multi-channel balances of 0,01 mg readability may be
used to test multi-channel pipettes with nominal volumes below 20 µl only if the expanded uncertainty in use is less than
one-fourth of the maximum permissible systematic error of the apparatus.
e
For single-channel pipettes of nominal volumes of less than 2 µl, a balance with repeatability and an expanded
uncertainty better than the values in the table shall be used so that the expanded uncertainty in use is less than one-fourth
of the maximum permissible systematic error of the apparatus.
2
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ISO 8655-6:2022(E)
5.3 Liquid reservoir
The liquid reservoir shall have sufficient capacity for all the test liquid likely to be required for the
complete series of tests.
NOTE The temperature difference between the test liquid and the room temperature can be minimized by
the use of an appropriate liquid reservoir.
5.4 Weighing vessel
The weighing vessel should be chosen for the selected test procedure according to Clause 8. Care shall
be taken regarding the evaporation loss of water during the delivery and weighing procedure.
5.5 Measuring devices
The minimum requirements for each relevant measurement device are specified in Table 2.
Table 2 — Minimum requirements for the measuring devices
Expanded uncertainty of meas-
urement
Device Resolution
(k = 2)
Thermometer for liquids 0,1 °C 0,2 °C
Thermometer for room air 0,1 °C 0,3 °C
Hygrometer 1 % relative humidity 5 % relative humidity
Barometer 0,1 kPa 1 kPa
Timing device 1 s not applicable
6 Test liquid
Use distilled or deionized water conforming to grade 3 or better as specified in ISO 3696:1987. The
water temperature shall be within ±0,5 °C of ambient air temperature (see 7.2).
7 Test conditions
7.1 General
All equipment used to test the POVA shall be operated as specified in the manufacturer’s instructions.
7.2 Test room
The test shall be carried out in a draught-free room with a stable environment. The test room shall have
a relative humidity between 45 % and 80 % and a temperature of (20 ± 3) °C with a maximum variation
of ±0,5 °C during the test. Prior to the test, the apparatus to be tested, all test equipment, and test liquid
shall have reached equilibrium within the specified conditions. The temperature variation of the test
room during this time should not be more than 0,5 °C per hour.
The environmental conditions, air temperature and air humidity, shall be within the specified limits for
the test room for at least 2 h before starting the test (minimum equilibration time) and during the test
itself.
NOTE It is unlikely that this minimum equilibration time will be less than 2 h and can be considerably longer.
When the POVA is required for use in a country which has adopted a standard reference temperature
[1]
of 27 °C (the alternative temperature recommended in ISO 384 for such use), this figure shall replace
the reference to 20 °C.
3
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ISO 8655-6:2022(E)
7.3 Evaporation
Particularly for small tested volumes (<50 µl) errors due to evaporation of the test liquid during
weighing should be taken into consideration. Apart from the geometry of the weighing vessel, the test
cycle time (see 7.4) is important.
NOTE Especially for testing apparatus of the lowest volume possible, evaporation loss is an issue. A way to
handle evaporation loss is, for example, careful selection of the geometry of the weighing vessel.
Any measures to minimise evaporation (e.g. the use of a weighing vessel with a lid) should be considered
while the contribution to uncertainty due to evaporation should be estimated.
In order to keep the error due to evaporation as small as possible, the use of an evaporation trap may be
considered.
The error due to evaporation for the measuring series shall be determined experimentally in the
cycle (see 8.3.2) or in a separate study and corrected mathematically (see 9.1). The uncertainty of this
correction shall be considered in the measurement uncertainty.
7.4 Test cycle time
The test cycle time is the time required to complete the weighing of one delivered volume and shall be
kept to a minimum.
In the case of air-displacement pipettes, the test cycle time is the time between 8.3.2 h) and 8.3.2 r).
It is important that the test cycle time, as defined above, is regular from cycle to cycle, so that a reliable
mathematical compensation of the error due to evaporation during the measuring series can be applied.
8 Procedure
8.1 General
8.1.1 Test volume
In the case of a fixed-volume apparatus, the test volume is the nominal volume. In the case of variable-
volume (user selectable volume) POVA, at least the following three volumes shall be tested:
— nominal volume;
— 50 % of the nominal volume or the closest possible (if equidistant, use the higher value);
— the lower limit of the usable volume range or 10 % of the nominal volume (whichever is greater).
8.1.2 Number of measurements
To determine the measurement error of a POVA according to this document, ten measurements or
more for each volume to be tested shall be performed. These measurements are used to calculate the
systematic and the random error of measurement in accordance with Clause 9.
8.1.3 Weighing procedure
For apparatus designed to deliver (Ex), weighing shall always involve delivery of test liquid into the
weighing vessel. Weighing for apparatus designed to contain (In) shall always involve removal of test
liquid from the weighing vessel.
NOTE An example of contained (In) is the sample uptake step in the use of a dilutor.
4
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ISO 8655-6:2022(E)
The weighing vessel shall be clean and have enough liquid inside to cover the bottom of the vessel when
the measurement procedure is started, to keep the relative humidity sufficiently high.
8.1.4 Test conditions during weighing procedure
At the start and at the end of the measurements, the temperature of the test liquid shall be recorded.
The air temperature, the barometric pressure and the relative humidity in the test room shall be
recorded (see 7.2).
NOTE Air temperature and barometric pressure are necessary for the calculation of the correction factor Z
(see 9.3 and Annex A); the relative humidity is necessary for the stability of the room conditions and is necessary
for documentation in the test report [see Clause 10, item e)].
8.1.5 Dispensing of samples
The test liquid shall be delivered into the weighing vessel following the specific procedures described
in 8.2 to 8.9 unless the POVA manufacturer's instructions specify a different volume delivery procedure,
in which case the procedure described by the manufacturer's instructions may be used. If the volume
delivery procedure specified in the manufacturer's instructions is used, that procedure shall be
documented in the test report in sufficient detail to allow the test to be replicated.
8.2 Preparation
Leave the POVA under test, the test equipment, exchangeable parts, and test liquid to reach thermal
equilibrium (see 7.2).
If using a variable volume POVA, select the test volume; this setting shall not be altered during the test
cycle of all replicate measurements.
If testing a burette, dilutor, or dispenser, place the POVA under test, with its reservoir already filled with
test liquid, as close to the balance as possible. Prime the POVA under test according to manufacturer's
instructions in order to remove any air bubbles inside the tubes and valves. Set the delivery velocity
according to the manufacturer’s instructions. The first drops of liquid might need to be discarded
before starting the calibration, if indicated in the manufacturer's instructions.
8.3 Single-channel air displacement pipettes (in accordance with ISO 8655-2)
8.3.1 General
In the case of electronic motorised pipettes, aspiration and delivery of test liquid are automatic. The
remainder of the procedure is carried out following the steps described in 8.3.2. The user should refer
to the manufacturer's instructions or operation manual for speed settings of aspiration and delivery.
NOTE More information regarding this type of piston pipette can be found in ISO 8655-2:2022, Annex B.
Forward pipetting shall always be performed.
8.3.2 Test cycle
Perform the test cycle as follows:
a) Fit the selected tip on the piston pipette.
b) In order to reach humidity equilibrium in the air-displacement piston pipette, aspirate the test
liquid five times.
c) Depress plunger.
d) Hold the pipette in a vertical position, immerse the tip in the test liquid to the appropriate depth
below the surface of the test liquid (see Table 3).
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ISO 8655-6:2022(E)
[7, 8]
Table 3 — Immersion depths during aspiration and wait time after aspiration of test liquid
Volume Immersion depth Wait time
[µl] [mm] [s]
≤ 1 1 to 2 1
> 1 to 100 2 to 3 1
> 100 to 1 000 2 to 4 1
> 1 000 to 20 000 3 to 6 3
e) Release the plunger slowly, if hand operated.
f) Pause for the recommended wait time (see Table 3).
g) Withdraw tip vertically and carefully from the test liquid.
h) Record the balance indication m of the weighing vessel or tare the balance to zero (m = 0).
0 0
i) Start the timing device; this may be omitted if using a weighing vessel with lid, or an evaporation
trap.
j) If the weighing vessel has a lid, remove it.
k) Touch the tip on the inside of the weighing vessel at an angle of approximately 30° to 45°.
l) Depress the plunger and deliver the test liquid into the weighing vessel.
m) Where applicable, use the blow-out feature of the piston pipette (second stop, based on pipette
type) to expel the last drop of liquid before dr
...
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Second edition
2022-04
Piston-operated volumetric
apparatus —
Part 6:
Gravimetric reference measurement
procedure for the determination of
volume
Appareils volumétriques à piston —
Partie 6: Mode opératoire de mesure gravimétrique de référence pour
la détermination de volumes
Reference number
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Contents Page
Foreword .v
Introduction . vi
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 General requirements . 2
5 Test equipment .2
5.1 General . 2
5.2 Balance . 2
5.3 Liquid reservoir . 3
5.4 Weighing vessel. 3
5.5 Measuring devices . 3
6 Test liquid . 3
7 Test conditions .3
7.1 General . 3
7.2 Test room . 3
7.3 Evaporation . 4
7.4 Test cycle time . 4
8 Procedure .4
8.1 General . 4
8.1.1 Test volume . 4
8.1.2 Number of measurements . 4
8.1.3 Weighing procedure . 4
8.1.4 Test conditions during weighing procedure . 5
8.1.5 Dispensing of samples . 5
8.2 Preparation . 5
8.3 Single-channel air displacement pipettes (in accordance with ISO 8655-2) . 5
8.3.1 General . 5
8.3.2 Test cycle . 5
8.4 Multi-channel pipettes (in accordance with ISO 8655-2) . 7
8.5 Positive displacement pipettes (in accordance with ISO 8655-2) . 7
8.6 Burettes (in accordance with ISO 8655-3) . 7
8.7 Dilutors (in accordance with ISO 8655-4) . 8
8.7.1 General . 8
8.7.2 Test cycle . 8
8.8 Dispensers (in accordance with ISO 8655-5) . 9
8.9 Syringes (in accordance with ISO 8655-9) . 9
8.9.1 General . 9
8.9.2 Test cycle . 9
9 Evaluation .10
9.1 Calculation of evaporation loss . 10
9.2 Calculation of the corrected weighing value of each quantity delivered . 10
9.3 Conversion of the corrected weighing values to volume . 10
9.3.1 General . 10
9.3.2 Calculation of volume using the general formula . 10
9.3.3 Calculation of volume using the Z correction factor .12
9.3.4 Mean delivered volume.12
9.4 Systematic error of measurement . 13
9.5 Random error of measurement .13
9.6 Uncertainty of measurement .13
iii
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10 Reporting of results .14
Annex A (informative) Calculation of volumes from balance readings .15
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through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
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ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
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different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
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any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
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Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to
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with the European Committee for Standardization (CEN) Technical Committee CEN/TC 332, Laboratory
equipment, in accordance with the Agreement on technical cooperation between ISO and CEN (Vienna
Agreement).
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revised. It also incorporates the Technical Corrigendum ISO 8655-6:2002/Cor .1:2008), which has been
technically revised.
The main changes are as follows:
— expanded uncertainty of the test equipment in Table 1 and 2 has been revised in conjunction with
ISO/TR 20461;
— Annex B has been deleted;
— new Clause 4 “General requirements” has been added;
[13]
— Formula (2) has been added based on ISO 4787 .
A list of all parts in the ISO 8655 series can be found on the ISO website.
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ISO 8655-6:2022(E)
Introduction
The ISO 8655 series addresses the needs of:
— manufacturers, as a basis for quality control including, where appropriate, the issuance of
manufacturer’s declarations;
— calibration laboratories, test houses, users of the equipment and other bodies as a basis for
independent calibration, testing, verification and routine tests.
The tests specified in the ISO 8655 series are intended to be carried out by trained personnel.
vi
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 8655-6:2022(E)
Piston-operated volumetric apparatus —
Part 6:
Gravimetric reference measurement procedure for the
determination of volume
1 Scope
This document specifies a gravimetric reference measurement procedure for the determination of
volume of piston-operated volumetric apparatus (POVA). The procedure is applicable to complete
systems comprising the basic apparatus and all parts selected for use with the apparatus, disposable or
reusable, involved in the measurement by delivery (Ex) or contained (In).
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 3696:1987, Water for analytical laboratory use — Specification and test methods
ISO 8655-1:2022, Piston-operated volumetric apparatus — Part 1: Terminology, general requirements and
user recommendation
ISO 8655-2:2022, Piston-operated volumetric apparatus — Part 2: Pipettes
ISO 8655-3, Piston-operated volumetric apparatus — Part 3: Burettes
ISO 8655-4, Piston-operated volumetric apparatus — Part 4: Dilutors
ISO 8655-5, Piston-operated volumetric apparatus — Part 5: Dispensers
ISO 8655-9, Piston-operated volumetric apparatus — Part 9: Manually operated precision laboratory
syringes
ISO/IEC Guide 2, Standardization and related activities — General vocabulary
ISO/IEC Guide 99, International vocabulary of metrology — Basic and general concepts and associated
terms (VIM)
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the terms and definitions given in ISO 8655-1, ISO/IEC Guide 2 and
ISO/IEC Guide 99 apply.
ISO and IEC maintain terminology databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at https:// www .electropedia .org/
1
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ISO 8655-6:2022(E)
4 General requirements
When performing calibrations according to the reference measurement procedure described in
this document, all provisions and requirements of this document shall be followed or exceeded (e. g.
performing 30 instead of 10 replicates per volume). If one or more of those requirements are not
followed, conformity to this document shall not be claimed.
5 Test equipment
5.1 General
Measurements by the following equipment (balance, thermometers, hygrometer, barometer) shall be
traceable to the International System of Units (SI) and shall meet the uncertainty requirements of this
document.
NOTE An example of the calculation of the expanded uncertainty of the gravimetric reference procedure is
[10]
given in ISO/TR 20461 .
5.2 Balance
The balance used for testing shall be chosen according to the minimum requirements specified in
Table 1, depending on the nominal volume of the apparatus under test. The balance parameters are
defined so that the expanded uncertainty in use is less than one-fourth of the maximum permissible
systematic error of the apparatus.
Table 1 — Minimum requirements for balances
Nominal volume of appa- Expanded uncertainty in
a
Resolution (d) Repeatability (s)
a, b
ratus under test (V) use U (k = 2)
mg mg mg
c c, e c, e
0,001 0,006 0,012
0,5 µl ≤ V < 20 µl
d d d
0,01 0,03 0,06
20 μl ≤ V < 200 μl 0,01 0,025 0,05
200 μl ≤ V ≤ 10 ml 0,1 0,2 0,4
10 ml < V ≤ 1 000 ml 1 2 4
1 000 ml < V ≤ 2 000 ml 10 10 40
a
The repeatability and expanded uncertainty in use value, in this table, apply in the volume determination of a single
channel apparatus. When a single-channel balance is used exclusively for volume determination of multichannel pipettes
the repeatability and expanded uncertainty in use values are double the values of this table. See also Footnote d.
b
Expanded uncertainty in use can be estimated according to Reference [2] or Reference [11] at the value of the nominal
volume. Expanded uncertainty in use shall include non-corrected errors as well as possible drift and environmental
effects to balance sensitivity. Regular sensitivity adjustments are recommended to improve balance sensitivity. Expanded
uncertainty in use may be taken from the balance calibration certificate or calculated separately (see example in
ISO/TR 20461). Expanded uncertainty in use can be estimated from the expanded uncertainty of calibration by considering
additional contributions as described above, where applicable
c
Single-channel balance.
d
Multi-channel balance, only valid for multi-channel pipettes. Multi-channel balances of 0,01 mg readability may be
used to test multi-channel pipettes with nominal volumes below 20 µl only if the expanded uncertainty in use is less than
one-fourth of the maximum permissible systematic error of the apparatus.
e
For single-channel pipettes of nominal volumes of less than 2 µl, a balance with repeatability and an expanded
uncertainty better than the values in the table shall be used so that the expanded uncertainty in use is less than one-fourth
of the maximum permissible systematic error of the apparatus.
2
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ISO 8655-6:2022(E)
5.3 Liquid reservoir
The liquid reservoir shall have sufficient capacity for all the test liquid likely to be required for the
complete series of tests.
NOTE The temperature difference between the test liquid and the room temperature can be minimized by
the use of an appropriate liquid reservoir.
5.4 Weighing vessel
The weighing vessel should be chosen for the selected test procedure according to Clause 8. Care shall
be taken regarding the evaporation loss of water during the delivery and weighing procedure.
5.5 Measuring devices
The minimum requirements for each relevant measurement device are specified in Table 2.
Table 2 — Minimum requirements for the measuring devices
Expanded uncertainty of meas-
urement
Device Resolution
(k = 2)
Thermometer for liquids 0,1 °C 0,2 °C
Thermometer for room air 0,1 °C 0,3 °C
Hygrometer 1 % relative humidity 5 % relative humidity
Barometer 0,1 kPa 1 kPa
Timing device 1 s not applicable
6 Test liquid
Use distilled or deionized water conforming to grade 3 or better as specified in ISO 3696:1987. The
water temperature shall be within ±0,5 °C of ambient air temperature (see 7.2).
7 Test conditions
7.1 General
All equipment used to test the POVA shall be operated as specified in the manufacturer’s instructions.
7.2 Test room
The test shall be carried out in a draught-free room with a stable environment. The test room shall have
a relative humidity between 45 % and 80 % and a temperature of (20 ± 3) °C with a maximum variation
of ±0,5 °C during the test. Prior to the test, the apparatus to be tested, all test equipment, and test liquid
shall have reached equilibrium within the specified conditions. The temperature variation of the test
room during this time should not be more than 0,5 °C per hour.
The environmental conditions, air temperature and air humidity, shall be within the specified limits for
the test room for at least 2 h before starting the test (minimum equilibration time) and during the test
itself.
NOTE It is unlikely that this minimum equilibration time will be less than 2 h and can be considerably longer.
When the POVA is required for use in a country which has adopted a standard reference temperature
[1]
of 27 °C (the alternative temperature recommended in ISO 384 for such use), this figure shall replace
the reference to 20 °C.
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ISO 8655-6:2022(E)
7.3 Evaporation
Particularly for small tested volumes (<50 µl) errors due to evaporation of the test liquid during
weighing should be taken into consideration. Apart from the geometry of the weighing vessel, the test
cycle time (see 7.4) is important.
NOTE Especially for testing apparatus of the lowest volume possible, evaporation loss is an issue. A way to
handle evaporation loss is, for example, careful selection of the geometry of the weighing vessel.
Any measures to minimise evaporation (e.g. the use of a weighing vessel with a lid) should be considered
while the contribution to uncertainty due to evaporation should be estimated.
In order to keep the error due to evaporation as small as possible, the use of an evaporation trap may be
considered.
The error due to evaporation for the measuring series shall be determined experimentally in the
cycle (see 8.3.2) or in a separate study and corrected mathematically (see 9.1). The uncertainty of this
correction shall be considered in the measurement uncertainty.
7.4 Test cycle time
The test cycle time is the time required to complete the weighing of one delivered volume and shall be
kept to a minimum.
In the case of air-displacement pipettes, the test cycle time is the time between 8.3.2 h) and 8.3.2 r).
It is important that the test cycle time, as defined above, is regular from cycle to cycle, so that a reliable
mathematical compensation of the error due to evaporation during the measuring series can be applied.
8 Procedure
8.1 General
8.1.1 Test volume
In the case of a fixed-volume apparatus, the test volume is the nominal volume. In the case of variable-
volume (user selectable volume) POVA, at least the following three volumes shall be tested:
— nominal volume;
— 50 % of the nominal volume or the closest possible (if equidistant, use the higher value);
— the lower limit of the usable volume range or 10 % of the nominal volume (whichever is greater).
8.1.2 Number of measurements
To determine the measurement error of a POVA according to this document, ten measurements or
more for each volume to be tested shall be performed. These measurements are used to calculate the
systematic and the random error of measurement in accordance with Clause 9.
8.1.3 Weighing procedure
For apparatus designed to deliver (Ex), weighing shall always involve delivery of test liquid into the
weighing vessel. Weighing for apparatus designed to contain (In) shall always involve removal of test
liquid from the weighing vessel.
NOTE An example of contained (In) is the sample uptake step in the use of a dilutor.
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ISO 8655-6:2022(E)
The weighing vessel shall be clean and have enough liquid inside to cover the bottom of the vessel when
the measurement procedure is started, to keep the relative humidity sufficiently high.
8.1.4 Test conditions during weighing procedure
At the start and at the end of the measurements, the temperature of the test liquid shall be recorded.
The air temperature, the barometric pressure and the relative humidity in the test room shall be
recorded (see 7.2).
NOTE Air temperature and barometric pressure are necessary for the calculation of the correction factor Z
(see 9.3 and Annex A); the relative humidity is necessary for the stability of the room conditions and is necessary
for documentation in the test report [see Clause 10, item e)].
8.1.5 Dispensing of samples
The test liquid shall be delivered into the weighing vessel following the specific procedures described
in 8.2 to 8.9 unless the POVA manufacturer's instructions specify a different volume delivery procedure,
in which case the procedure described by the manufacturer's instructions may be used. If the volume
delivery procedure specified in the manufacturer's instructions is used, that procedure shall be
documented in the test report in sufficient detail to allow the test to be replicated.
8.2 Preparation
Leave the POVA under test, the test equipment, exchangeable parts, and test liquid to reach thermal
equilibrium (see 7.2).
If using a variable volume POVA, select the test volume; this setting shall not be altered during the test
cycle of all replicate measurements.
If testing a burette, dilutor, or dispenser, place the POVA under test, with its reservoir already filled with
test liquid, as close to the balance as possible. Prime the POVA under test according to manufacturer's
instructions in order to remove any air bubbles inside the tubes and valves. Set the delivery velocity
according to the manufacturer’s instructions. The first drops of liquid might need to be discarded
before starting the calibration, if indicated in the manufacturer's instructions.
8.3 Single-channel air displacement pipettes (in accordance with ISO 8655-2)
8.3.1 General
In the case of electronic motorised pipettes, aspiration and delivery of test liquid are automatic. The
remainder of the procedure is carried out following the steps described in 8.3.2. The user should refer
to the manufacturer's instructions or operation manual for speed settings of aspiration and delivery.
NOTE More information regarding this type of piston pipette can be found in ISO 8655-2:2022, Annex B.
Forward pipetting shall always be performed.
8.3.2 Test cycle
Perform the test cycle as follows:
a) Fit the selected tip on the piston pipette.
b) In order to reach humidity equilibrium in the air-displacement piston pipette, aspirate the test
liquid five times.
c) Depress plunger.
d) Hold the pipette in a vertical position, immerse the tip in the test liquid to the appropriate depth
below the surface of the test liquid (see Table 3).
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ISO 8655-6:2022(E)
[7, 8]
Table 3 — Immersion depths during aspiration and wait time after aspiration of test liquid
Volume Immersion depth Wait time
[µl] [mm] [s]
≤ 1 1 to 2 1
> 1 to 100 2 to 3 1
> 100 to 1 000 2 to 4 1
> 1 000 to 20 000 3 to 6 3
e) Release the plunger slowly, if hand operated.
f) Pause for the recommended wait time (see Table 3).
g) Withdraw tip vertically and carefully from the test liquid.
h) Record the balance indication m of the weighing vessel or tare the balance to zero (m = 0).
0 0
i) Start the timing device; this may be omitted if using a weighing vessel with lid, or an evaporation
trap.
j) If the weighing vessel has a lid, remove it.
k) Touch the tip on the inside of the weighing vessel at an angle of approximately 30° to 45°.
l) Depress the plunger and deliver the test liquid into the weighing vessel.
m) Where applicable, use the blow-out feature of the piston pipette (second stop, based on pipette
type) to expel the last drop of liquid before drawing the delivery end of the tip along the inner wall
of the weighing vessel.
n) Draw the tip approximately 8 mm to 10 mm along the inner wall of the weighing vessel to remove
any droplets at or around the tip orifice.
o) Re
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 8655-6
Deuxième édition
2022-04
Version corrigée
2022-06
Appareils volumétriques à piston —
Partie 6:
Mode opératoire de mesure
gravimétrique de référence pour la
détermination de volumes
Piston-operated volumetric apparatus —
Part 6: Gravimetric reference measurement procedure for the
determination of volume
Numéro de référence
ISO 8655-6:2022(F)
© ISO 2022
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ISO 8655-6:2022(F)
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
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être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
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ISO 8655-6:2022(F)
Sommaire Page
Avant-propos .v
Introduction .vii
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives .1
3 Termes et définitions . 1
4 Exigences générales . .2
5 Équipement d’essai . 2
5.1 Généralités . 2
5.2 Balance . 2
5.3 Réservoir de liquide . 3
5.4 Récipient de pesage . 3
5.5 Dispositifs de mesure . 3
6 Liquide d’essai . 4
7 Conditions d’essai . 4
7.1 Généralités . 4
7.2 Laboratoire d’essai . 4
7.3 Évaporation . 4
7.4 Durée du cycle d’essai . 5
8 Mode opératoire . 5
8.1 Généralités . 5
8.1.1 Volume d’essai . 5
8.1.2 Nombre de mesurages . 5
8.1.3 Mode opératoire de pesage . 5
8.1.4 Conditions d’essai au cours du mode opératoire de pesage . 6
8.1.5 Distribution des échantillons . 6
8.2 Préparation . 6
8.3 Pipettes monocanales à déplacement d’air (conformément à l’ISO 8655-2). 6
8.3.1 Généralités . 6
8.3.2 Cycle d’essai . 6
8.4 Pipettes multicanaux (conformément à l’ISO 8655-2) . 8
8.5 Pipettes à déplacement positif (conformément à l’ISO 8655-2) . . 8
8.6 Burettes (conformément à l’ISO 8655-3) . 9
8.7 Diluteurs (conformément à l’ISO 8655-4) . 9
8.7.1 Généralités . 9
8.7.2 Cycle d’essai . 9
8.8 Distributeurs (conformément à l’ISO 8655-5) . 10
8.9 Seringues (conformément à l’ISO 8655-9) . 11
8.9.1 Généralités . 11
8.9.2 Cycle d’essai . 11
9 Évaluation .11
9.1 Calcul de la perte par évaporation . 11
9.2 Calcul de la valeur de pesage corrigée de chaque quantité distribuée .12
9.3 Conversion des valeurs de pesage corrigées en volumes .12
9.3.1 Généralités .12
9.3.2 Calcul du volume à l’aide de la formule générale .12
9.3.3 Calcul du volume à l’aide du facteur de correction Z .13
9.3.4 Volume distribué moyen . 14
9.4 Erreur systématique de mesure . 14
9.5 Erreur de mesurage aléatoire . 15
9.6 Incertitude de mesure . 15
iii
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ISO 8655-6:2022(F)
10 Consignation des résultats .15
Annexe A (informative) Calcul de volumes à partir des relevés de la balance .17
Bibliographie .18
iv
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ISO 8655-6:2022(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document
a été rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2
(voir www.iso.org/directives).
L’attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www.iso.org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion
de l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www.iso.org/iso/fr/avant-propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 48, Équipement de laboratoire, en
collaboration avec le comité technique CEN/TC 332, Équipement de laboratoire, du Comité européen de
normalisation (CEN) conformément à l’accord de coopération technique entre l’ISO et le CEN (Accord de
Vienne).
La présente deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 8655-6:2002), qui a fait l’objet
d’une révision technique. Elle intègre également le Rectificatif technique ISO 8655-6:2002/Cor .1:2008),
qui a fait l’objet d’une révision technique.
Les principales modifications sont les suivantes:
— l’incertitude élargie de l’équipement d’essai dans les Tableaux 1 et 2 a été révisée en conjonction
avec l’ISO/TR 20461;
— l’Annexe B a été supprimée;
— l’Article 4 «Exigences générales» a été ajouté;
[13]
— la Formule (2) a été ajoutée en se fondant sur l’ISO 4787 .
Une liste de toutes les parties de la série ISO 8655 se trouve sur le site web de l’ISO.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www.iso.org/fr/members.html.
La présente version corrigée de l'ISO 8655:6:2022 inclut les corrections suivantes :
• Les valeurs dans la clé de la Formule (4) sont mises à jour pour inclure des virgules,,
v
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ISO 8655-6:2022(F)
• Les valeurs du Tableau A.1 sont mises à jour pour inclure des virgules.
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ISO 8655-6:2022(F)
Introduction
La série de normes ISO 8655 répond aux besoins des personnes suivantes:
— fabricants, en servant de base pour le contrôle de la qualité y compris, le cas échéant, la publication
des déclarations du fabricant;
— laboratoires d’étalonnage, laboratoires d’essai, utilisateurs de l’équipement et autres organismes,
en servant de base pour les étalonnages indépendants, les essais, les vérifications et les essais
de routine.
Les essais spécifiés dans la série de normes ISO 8655 sont destinés à être réalisés par du personnel
qualifié.
vii
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NORME INTERNATIONALE ISO 8655-6:2022(F)
Appareils volumétriques à piston —
Partie 6:
Mode opératoire de mesure gravimétrique de référence
pour la détermination de volumes
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie un mode opératoire de mesure gravimétrique de référence pour la
détermination du volume des appareils volumétriques à piston (AVAP). Le mode opératoire est
applicable aux systèmes complets comprenant l’appareil de base et toutes les parties sélectionnées pour
être utilisées avec l’appareil, à usage unique ou réutilisables, impliqués dans le mesurage par procédé
de distribution (Ex) ou de prélèvement (In).
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 3696:1987, Eau pour laboratoire à usage analytique — Spécification et méthodes d'essai
ISO 8655-1:2022, Appareils volumétriques à piston — Partie 1: Définitions, exigences générales et
recommandations pour l’utilisateur
ISO 8655-2:2022, Appareils volumétriques à piston — Partie 2: Pipettes
ISO 8655-3, Appareils volumétriques à piston — Partie 3: Burettes
ISO 8655-4, Appareils volumétriques à piston — Partie 4: Diluteurs
ISO 8655-5, Appareils volumétriques à piston — Partie 5: Distributeurs
ISO 8655-9, Appareils volumétriques à piston — Partie 9: Seringues de laboratoire haute précision pour
utilisation manuelle
Guide ISO/IEC 2, Normalisation et activités connexes — Vocabulaire général
Guide ISO/IEC 99, Vocabulaire international de métrologie — Concepts fondamentaux et généraux et
termes associés (VIM)
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions donnés dans l’ISO 8655-1, le
Guide ISO/IEC 2 et le Guide ISO/IEC 99 s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées
en normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https:// www .iso .org/ obp;
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse https:// www .electropedia .org/ .
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ISO 8655-6:2022(F)
4 Exigences générales
Lors de la réalisation d’étalonnages conformément au mode opératoire de mesure de référence décrite
dans le présent document, toutes les dispositions et exigences du présent document doivent être
respectées, voire dépassées (30 réplicats par volume au lieu des 10 imposés, par exemple). Si une ou
plusieurs de ces exigences ne sont pas respectées, la conformité au présent document ne doit pas être
revendiquée.
5 Équipement d’essai
5.1 Généralités
Les mesurages effectués par les équipements suivants (balance, thermomètres, hygromètre, baromètre)
doivent être traçables par rapport au système international d’unités (SI) et doivent satisfaire aux
exigences relatives à l’incertitude du présent document.
[10]
NOTE L’ISO/TR 20461 fournit un exemple de calcul de l’incertitude élargie d’un mode opératoire
gravimétrique de référence.
5.2 Balance
La balance utilisée pour les essais doit être choisie conformément aux exigences minimales spécifiées
dans le Tableau 1, en fonction du volume nominal de l’appareil soumis à essai. Les paramètres de la
balance sont définis de sorte que l’incertitude élargie lors de l’utilisation soit inférieure à un quart des
erreurs maximales systématiques tolérées de l’appareillage.
Tableau 1 — Exigences minimales pour les balances
Volume nominal de l’appareillage Incertitude élargie lors
a
Résolution (d) Répétabilité (s)
a, b
soumis à essai (V) de l’utilisation U (k = 2)
mg mg mg
c c, e c, e
0,001 0,006 0,012
0,5 µl ≤ V < 20 µl
d d d
0,01 0,03 0,06
20 μl ≤ V < 200 μl 0,01 0,025 0,05
200 μl ≤ V ≤ 10 ml 0,1 0,2 0,4
10 ml < V ≤ 1 000 ml 1 2 4
1 000 ml < V ≤ 2 000 ml 10 10 40
a
Les valeurs de répétabilité et d’incertitude élargie lors de l’utilisation indiquées dans ce tableau s’appliquent à la
détermination du volume d’un appareil monocanal. Lorsqu’une balance monocanal est utilisée exclusivement à des fins de
détermination du volume de pipettes multicanaux, les valeurs de répétabilité et d’incertitude élargie lors de l’utilisation
sont deux fois supérieures aux valeurs de ce tableau. Voir également la Note de pied de page d.
b
L’incertitude élargie lors de l’utilisation peut être estimée conformément à la Référence [2] ou à la Référence [11] à la
valeur du volume nominal. L’incertitude élargie lors de l’utilisation doit inclure les erreurs non corrigées ainsi que les effets
possibles de la dérive et de l’environnement sur la sensibilité de la balance. Il est recommandé de procéder régulièrement
à des ajustements de la sensibilité pour améliorer la sensibilité de la balance. L’incertitude élargie lors de l’utilisation peut
être obtenue dans le certificat d’étalonnage de la balance ou calculée séparément (voir l’exemple dans l’ISO/TR 20461).
L’incertitude élargie lors de l’utilisation peut être estimée à partir de l’incertitude élargie de l’étalonnage en tenant compte
des contributions supplémentaires décrites ci-dessus, le cas échéant.
c
Balance monocanal.
d
Balance multicanal, uniquement valable pour les pipettes multicanaux. Il est permis d’utiliser des balances multicanaux
présentant une précision d’affichage de 0,01 mg pour soumettre à essai des pipettes multicanaux avec des volumes
nominaux inférieurs à 20 µl uniquement si l’incertitude élargie lors de l’utilisation est inférieure à un quart des erreurs
maximales systématiques tolérées de l’appareillage.
e
Pour les pipettes monocanal d’un volume nominal inférieur à 2 µl, une balance présentant une répétabilité supérieure
et une incertitude élargie inférieure aux valeurs indiquées dans le tableau doit être utilisée de manière à ce que l’incertitude
élargie lors de l’utilisation soit inférieure à un quart de l’erreur systématique maximale tolérée de l’appareil.
2
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5.3 Réservoir de liquide
Le réservoir de liquide doit présenter une capacité suffisante pour contenir l’intégralité du liquide
d’essai susceptible d’être requis pour la série complète d’essais.
NOTE La différence de température entre le liquide d’essai et la température ambiante peut être réduite
en utilisant un réservoir de liquide approprié.
5.4 Récipient de pesage
Il convient de choisir le récipient de pesage en fonction du mode opératoire d’essai sélectionné
conformément à l’Article 8. Des précautions doivent être prises concernant la perte d’eau par
évaporation au cours du mode opératoire de distribution et de pesage.
5.5 Dispositifs de mesure
Les exigences minimales pour chaque dispositif de mesure pertinent sont spécifiées dans le Tableau 2.
3
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Tableau 2 — Exigences minimales relatives aux dispositifs de mesure
Incertitude de mesure élargie
Dispositif Résolution
(k = 2)
Thermomètre pour liquides 0,1 °C 0,2 °C
Thermomètre pour air ambiant 0,1 °C 0,3 °C
Hygromètre 1 % d’humidité relative 5 % d’humidité relative
Baromètre 0,1 kPa 1 kPa
Chronomètre 1 s non applicable
6 Liquide d’essai
Utiliser de l’eau, distillée ou déionisée, de «qualité 3» ou supérieure tel que spécifié dans l’ISO 3696:1987.
La température de l’eau doit se situer à ± 0,5 °C de la température ambiante (voir 7.2).
7 Conditions d’essai
7.1 Généralités
Tous les équipements utilisés pour soumettre l’AVAP à essai doivent être utilisés comme spécifié dans
les instructions du fabricant.
7.2 Laboratoire d’essai
L’essai doit être réalisé dans un laboratoire exempt de courants d’air avec un environnement stable.
Le laboratoire d’essai doit présenter une humidité relative comprise entre 45 % et 80 % et une
température de (20 ± 3) °C avec une variation maximale de ± 0,5 °C au cours de l’essai. Avant de
procéder à l’essai, l’appareil à soumettre à essai, l’ensemble de l’équipement d’essai, ainsi que le liquide
d’essai doivent avoir atteint l’équilibre dans les conditions spécifiées. Il convient que la température du
laboratoire d’essai ne varie pas plus de 0,5 °C par heure au cours de cette période.
Les conditions environnementales, la température et l’humidité de l’air doivent se situer dans les limites
spécifiées pour le laboratoire d’essai pendant au moins 2 h avant le début de l’essai (temps d’équilibrage
minimum) et pendant l’essai lui-même.
NOTE Il est peu probable que ce temps d’équilibrage minimum soit inférieur à 2 h ou qu’il puisse être
considérablement plus long.
Lorsque l’AVAP est requis pour une utilisation dans un pays qui a adopté une température de référence
[1]
standard de 27 °C (la température alternative recommandée dans l’ISO 384 à cette fin), cette valeur
doit remplacer la référence à 20 °C.
7.3 Évaporation
Dans le cas de faibles volumes d’essai (<50 µl), il convient de prendre en compte les erreurs dues
à l’évaporation du liquide d’essai au cours du pesage. Outre la géométrie du récipient de pesage, la durée
du cycle d’essai (voir 7.4) est importante.
NOTE Les pertes par évaporation constituent un problème, notamment pour les essais sur des appareils à
très faible volume. La sélection minutieuse de la géométrie du récipient de pesage constitue, par exemple, une
solution permettant de limiter la perte par évaporation.
Il convient d’envisager d’appliquer toute mesure pour réduire le plus possible l’évaporation (par exemple,
en utilisant un récipient de pesage doté d’un couvercle) et d’estimer la contribution à l’incertitude de
l’évaporation.
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Afin de maintenir l’erreur due à l’évaporation aussi faible que possible, l’utilisation d’un piège à humidité
peut être envisagée.
L’erreur due à l’évaporation durant la série de mesures doit être déterminée par voie expérimentale au
cours du cycle (voir 8.3.2) ou dans le cadre d’une étude distincte et corrigée de façon mathématique
(voir 9.1). L’incertitude de cette correction doit être prise en compte dans l’incertitude de mesure.
7.4 Durée du cycle d’essai
La durée du cycle d’essai correspond au temps nécessaire pour effectuer le pesage d’un volume délivré
et doit être la plus faible possible.
Dans le cas des pipettes à déplacement d’air, la durée du cycle d’essai équivaut au temps entre 8.3.2 h)
et 8.3.2 r).
Il est important que la durée du cycle d’essai, définie ci-dessus, soit régulière d’un cycle à un autre,
de sorte qu’une compensation mathématique fiable de l’erreur due à l’évaporation au cours de la série
de mesurages puisse être appliquée.
8 Mode opératoire
8.1 Généralités
8.1.1 Volume d’essai
Dans le cas d’un appareil à volume fixe, le volume d’essai est le volume nominal. Dans le cas d’un AVAP
à volume variable (volume choisi par l’utilisateur), au moins trois volumes doivent être soumis à essai:
— le volume nominal;
— 50 % du volume nominal ou du volume le plus proche possible (si équidistant, utiliser la valeur la
plus élevée);
— la limite inférieure de la plage de volume ou 10 % du volume nominal (en prenant la valeur la plus
élevée des deux).
8.1.2 Nombre de mesurages
Afin de déterminer l’erreur de mesure d’un AVAP conformément au présent document, dix mesures
ou plus doivent être effectuées pour chaque volume à soumettre à essai. Ces mesures sont utilisées
pour calculer l’erreur systématique et aléatoire de mesure conformément à l’Article 9.
8.1.3 Mode opératoire de pesage
Dans le cas des appareils conçus pour la distribution (Ex), le pesage doit toujours impliquer la
distribution du liquide d’essai dans le récipient de pesage. Dans le cas des appareils conçus pour
l’aspiration (In), le pesage doit toujours impliquer l’aspiration du liquide d’essai du récipient de pesage.
NOTE L’étape d’aspiration de l’échantillon dans le cadre de l’utilisation d’un diluteur en est un exemple.
Le récipient de pesage doit être propre et contenir suffisamment de liquide pour couvrir le fond du
récipient au début du mode opératoire de pesage afin de maintenir une humidité relative suffisamment
élevée.
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8.1.4 Conditions d’essai au cours du mode opératoire de pesage
Au début et à la fin des mesurages, la température du liquide d’essai doit être enregistrée. La
température de l’air, la pression barométrique et l’humidité relative dans le laboratoire d’essai doivent
être enregistrées (voir 7.2).
NOTE La température de l’air et la pression barométrique sont nécessaires pour le calcul du facteur de
correction Z (voir 9.3 et Annexe A). L’humidité relative est nécessaire pour la stabilité des conditions de la pièce
et pour la documentation dans le rapport d’essai [voir l’Article 10, point e)].
8.1.5 Distribution des échantillons
Le liquide d’essai doit être distribué dans le récipient de pesage selon les modes opératoires spécifiques
décrits de 8.2 à 8.9, à moins que les instructions du fabricant de l’AVAP ne spécifient un autre mode
opératoire de distribution, auquel cas le mode opératoire décrit dans les instructions du fabricant
peut être utilisé. En cas d’utilisation du mode opératoire de distribution de volume spécifié dans les
instructions du fabricant, ce mode opératoire doit être documenté dans le rapport d’essai de manière
suffisamment détaillée afin de pouvoir reproduire l’essai.
8.2 Préparation
Laisser l’AVAP soumis à essai, l’équipement d’essai, les pièces échangeables et le liquide d’essai atteindre
l’équilibre thermique (vo
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 8655-6
Deuxième édition
2022-04
Appareils volumétriques à piston —
Partie 6:
Mode opératoire de mesure
gravimétrique de référence pour la
détermination de volumes
Piston-operated volumetric apparatus —
Part 6: Gravimetric reference measurement procedure for the
determination of volume
Numéro de référence
ISO 8655-6:2022(F)
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
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Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
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Web: www.iso.org
Publié en Suisse
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ISO 8655-6:2022(F)
Sommaire Page
Avant-propos .v
Introduction . vi
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives .1
3 Termes et définitions . 1
4 Exigences générales . .2
5 Équipement d’essai . 2
5.1 Généralités . 2
5.2 Balance . 2
5.3 Réservoir de liquide . 3
5.4 Récipient de pesage . 3
5.5 Dispositifs de mesure . 3
6 Liquide d’essai . 4
7 Conditions d’essai . 4
7.1 Généralités . 4
7.2 Laboratoire d’essai . 4
7.3 Évaporation . 4
7.4 Durée du cycle d’essai . 5
8 Mode opératoire . 5
8.1 Généralités . 5
8.1.1 Volume d’essai . 5
8.1.2 Nombre de mesurages . 5
8.1.3 Mode opératoire de pesage . 5
8.1.4 Conditions d’essai au cours du mode opératoire de pesage . 6
8.1.5 Distribution des échantillons . 6
8.2 Préparation . 6
8.3 Pipettes monocanales à déplacement d’air (conformément à l’ISO 8655-2). 6
8.3.1 Généralités . 6
8.3.2 Cycle d’essai . 6
8.4 Pipettes multicanaux (conformément à l’ISO 8655-2) . 8
8.5 Pipettes à déplacement positif (conformément à l’ISO 8655-2) . . 8
8.6 Burettes (conformément à l’ISO 8655-3) . 9
8.7 Diluteurs (conformément à l’ISO 8655-4) . 9
8.7.1 Généralités . 9
8.7.2 Cycle d’essai . 9
8.8 Distributeurs (conformément à l’ISO 8655-5) . 10
8.9 Seringues (conformément à l’ISO 8655-9) . 11
8.9.1 Généralités . 11
8.9.2 Cycle d’essai . 11
9 Évaluation .11
9.1 Calcul de la perte par évaporation . 11
9.2 Calcul de la valeur de pesage corrigée de chaque quantité distribuée .12
9.3 Conversion des valeurs de pesage corrigées en volumes .12
9.3.1 Généralités .12
9.3.2 Calcul du volume à l’aide de la formule générale .12
9.3.3 Calcul du volume à l’aide du facteur de correction Z .13
9.3.4 Volume distribué moyen . 14
9.4 Erreur systématique de mesure . 14
9.5 Erreur de mesurage aléatoire . 15
9.6 Incertitude de mesure . 15
iii
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10 Consignation des résultats .15
Annexe A (informative) Calcul de volumes à partir des relevés de la balance .17
Bibliographie .18
iv
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ISO 8655-6:2022(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document
a été rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2
(voir www.iso.org/directives).
L’attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www.iso.org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion
de l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www.iso.org/iso/fr/avant-propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 48, Équipement de laboratoire, en
collaboration avec le comité technique CEN/TC 332, Équipement de laboratoire, du Comité européen de
normalisation (CEN) conformément à l’accord de coopération technique entre l’ISO et le CEN (Accord de
Vienne).
La présente deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 8655-6:2002), qui a fait l’objet
d’une révision technique. Elle intègre également le Rectificatif technique ISO 8655-6:2002/Cor .1:2008),
qui a fait l’objet d’une révision technique.
Les principales modifications sont les suivantes:
— l’incertitude élargie de l’équipement d’essai dans les Tableaux 1 et 2 a été révisée en conjonction
avec l’ISO/TR 20461;
— l’Annexe B a été supprimée;
— l’Article 4 «Exigences générales» a été ajouté;
[13]
— la Formule (2) a été ajoutée en se fondant sur l’ISO 4787 .
Une liste de toutes les parties de la série ISO 8655 se trouve sur le site web de l’ISO.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www.iso.org/fr/members.html.
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ISO 8655-6:2022(F)
Introduction
La série de normes ISO 8655 répond aux besoins des personnes suivantes:
— fabricants, en servant de base pour le contrôle de la qualité y compris, le cas échéant, la publication
des déclarations du fabricant;
— laboratoires d’étalonnage, laboratoires d’essai, utilisateurs de l’équipement et autres organismes,
en servant de base pour les étalonnages indépendants, les essais, les vérifications et les essais
de routine.
Les essais spécifiés dans la série de normes ISO 8655 sont destinés à être réalisés par du personnel
qualifié.
vi
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NORME INTERNATIONALE ISO 8655-6:2022(F)
Appareils volumétriques à piston —
Partie 6:
Mode opératoire de mesure gravimétrique de référence
pour la détermination de volumes
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie un mode opératoire de mesure gravimétrique de référence pour la
détermination du volume des appareils volumétriques à piston (AVAP). Le mode opératoire est
applicable aux systèmes complets comprenant l’appareil de base et toutes les parties sélectionnées pour
être utilisées avec l’appareil, à usage unique ou réutilisables, impliqués dans le mesurage par procédé
de distribution (Ex) ou de prélèvement (In).
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 3696:1987, Eau pour laboratoire à usage analytique — Spécification et méthodes d'essai
ISO 8655-1:2022, Appareils volumétriques à piston — Partie 1: Définitions, exigences générales et
recommandations pour l’utilisateur
ISO 8655-2:2022, Appareils volumétriques à piston — Partie 2: Pipettes
ISO 8655-3, Appareils volumétriques à piston — Partie 3: Burettes
ISO 8655-4, Appareils volumétriques à piston — Partie 4: Diluteurs
ISO 8655-5, Appareils volumétriques à piston — Partie 5: Distributeurs
ISO 8655-9, Appareils volumétriques à piston — Partie 9: Seringues de laboratoire haute précision pour
utilisation manuelle
Guide ISO/IEC 2, Normalisation et activités connexes — Vocabulaire général
Guide ISO/IEC 99, Vocabulaire international de métrologie — Concepts fondamentaux et généraux et
termes associés (VIM)
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions donnés dans l’ISO 8655-1, le
Guide ISO/IEC 2 et le Guide ISO/IEC 99 s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées
en normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https:// www .iso .org/ obp;
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse https:// www .electropedia .org/ .
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ISO 8655-6:2022(F)
4 Exigences générales
Lors de la réalisation d’étalonnages conformément au mode opératoire de mesure de référence décrite
dans le présent document, toutes les dispositions et exigences du présent document doivent être
respectées, voire dépassées (30 réplicats par volume au lieu des 10 imposés, par exemple). Si une ou
plusieurs de ces exigences ne sont pas respectées, la conformité au présent document ne doit pas être
revendiquée.
5 Équipement d’essai
5.1 Généralités
Les mesurages effectués par les équipements suivants (balance, thermomètres, hygromètre, baromètre)
doivent être traçables par rapport au système international d’unités (SI) et doivent satisfaire aux
exigences relatives à l’incertitude du présent document.
[10]
NOTE L’ISO/TR 20461 fournit un exemple de calcul de l’incertitude élargie d’un mode opératoire
gravimétrique de référence.
5.2 Balance
La balance utilisée pour les essais doit être choisie conformément aux exigences minimales spécifiées
dans le Tableau 1, en fonction du volume nominal de l’appareil soumis à essai. Les paramètres de la
balance sont définis de sorte que l’incertitude élargie lors de l’utilisation soit inférieure à un quart des
erreurs maximales systématiques tolérées de l’appareillage.
Tableau 1 — Exigences minimales pour les balances
Volume nominal de l’appareillage Incertitude élargie lors
a
Résolution (d) Répétabilité (s)
a, b
soumis à essai (V) de l’utilisation U (k = 2)
mg mg mg
c c, e c, e
0,001 0,006 0,012
0,5 µl ≤ V < 20 µl
d d d
0,01 0,03 0,06
20 μl ≤ V < 200 μl 0,01 0,025 0,05
200 μl ≤ V ≤ 10 ml 0,1 0,2 0,4
10 ml < V ≤ 1 000 ml 1 2 4
1 000 ml < V ≤ 2 000 ml 10 10 40
a
Les valeurs de répétabilité et d’incertitude élargie lors de l’utilisation indiquées dans ce tableau s’appliquent à la
détermination du volume d’un appareil monocanal. Lorsqu’une balance monocanal est utilisée exclusivement à des fins de
détermination du volume de pipettes multicanaux, les valeurs de répétabilité et d’incertitude élargie lors de l’utilisation
sont deux fois supérieures aux valeurs de ce tableau. Voir également la Note de pied de page d.
b
L’incertitude élargie lors de l’utilisation peut être estimée conformément à la Référence [2] ou à la Référence [11] à la
valeur du volume nominal. L’incertitude élargie lors de l’utilisation doit inclure les erreurs non corrigées ainsi que les effets
possibles de la dérive et de l’environnement sur la sensibilité de la balance. Il est recommandé de procéder régulièrement
à des ajustements de la sensibilité pour améliorer la sensibilité de la balance. L’incertitude élargie lors de l’utilisation peut
être obtenue dans le certificat d’étalonnage de la balance ou calculée séparément (voir l’exemple dans l’ISO/TR 20461).
L’incertitude élargie lors de l’utilisation peut être estimée à partir de l’incertitude élargie de l’étalonnage en tenant compte
des contributions supplémentaires décrites ci-dessus, le cas échéant.
c
Balance monocanal.
d
Balance multicanal, uniquement valable pour les pipettes multicanaux. Il est permis d’utiliser des balances multicanaux
présentant une précision d’affichage de 0,01 mg pour soumettre à essai des pipettes multicanaux avec des volumes
nominaux inférieurs à 20 µl uniquement si l’incertitude élargie lors de l’utilisation est inférieure à un quart des erreurs
maximales systématiques tolérées de l’appareillage.
e
Pour les pipettes monocanal d’un volume nominal inférieur à 2 µl, une balance présentant une répétabilité supérieure
et une incertitude élargie inférieure aux valeurs indiquées dans le tableau doit être utilisée de manière à ce que l’incertitude
élargie lors de l’utilisation soit inférieure à un quart de l’erreur systématique maximale tolérée de l’appareil.
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5.3 Réservoir de liquide
Le réservoir de liquide doit présenter une capacité suffisante pour contenir l’intégralité du liquide
d’essai susceptible d’être requis pour la série complète d’essais.
NOTE La différence de température entre le liquide d’essai et la température ambiante peut être réduite
en utilisant un réservoir de liquide approprié.
5.4 Récipient de pesage
Il convient de choisir le récipient de pesage en fonction du mode opératoire d’essai sélectionné
conformément à l’Article 8. Des précautions doivent être prises concernant la perte d’eau par
évaporation au cours du mode opératoire de distribution et de pesage.
5.5 Dispositifs de mesure
Les exigences minimales pour chaque dispositif de mesure pertinent sont spécifiées dans le Tableau 2.
3
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Tableau 2 — Exigences minimales relatives aux dispositifs de mesure
Incertitude de mesure élargie
Dispositif Résolution
(k = 2)
Thermomètre pour liquides 0,1 °C 0,2 °C
Thermomètre pour air ambiant 0,1 °C 0,3 °C
Hygromètre 1 % d’humidité relative 5 % d’humidité relative
Baromètre 0,1 kPa 1 kPa
Chronomètre 1 s non applicable
6 Liquide d’essai
Utiliser de l’eau, distillée ou déionisée, de «qualité 3» ou supérieure tel que spécifié dans l’ISO 3696:1987.
La température de l’eau doit se situer à ± 0,5 °C de la température ambiante (voir 7.2).
7 Conditions d’essai
7.1 Généralités
Tous les équipements utilisés pour soumettre l’AVAP à essai doivent être utilisés comme spécifié dans
les instructions du fabricant.
7.2 Laboratoire d’essai
L’essai doit être réalisé dans un laboratoire exempt de courants d’air avec un environnement stable.
Le laboratoire d’essai doit présenter une humidité relative comprise entre 45 % et 80 % et une
température de (20 ± 3) °C avec une variation maximale de ± 0,5 °C au cours de l’essai. Avant de
procéder à l’essai, l’appareil à soumettre à essai, l’ensemble de l’équipement d’essai, ainsi que le liquide
d’essai doivent avoir atteint l’équilibre dans les conditions spécifiées. Il convient que la température du
laboratoire d’essai ne varie pas plus de 0,5 °C par heure au cours de cette période.
Les conditions environnementales, la température et l’humidité de l’air doivent se situer dans les limites
spécifiées pour le laboratoire d’essai pendant au moins 2 h avant le début de l’essai (temps d’équilibrage
minimum) et pendant l’essai lui-même.
NOTE Il est peu probable que ce temps d’équilibrage minimum soit inférieur à 2 h ou qu’il puisse être
considérablement plus long.
Lorsque l’AVAP est requis pour une utilisation dans un pays qui a adopté une température de référence
[1]
standard de 27 °C (la température alternative recommandée dans l’ISO 384 à cette fin), cette valeur
doit remplacer la référence à 20 °C.
7.3 Évaporation
Dans le cas de faibles volumes d’essai (<50 µl), il convient de prendre en compte les erreurs dues
à l’évaporation du liquide d’essai au cours du pesage. Outre la géométrie du récipient de pesage, la durée
du cycle d’essai (voir 7.4) est importante.
NOTE Les pertes par évaporation constituent un problème, notamment pour les essais sur des appareils à
très faible volume. La sélection minutieuse de la géométrie du récipient de pesage constitue, par exemple, une
solution permettant de limiter la perte par évaporation.
Il convient d’envisager d’appliquer toute mesure pour réduire le plus possible l’évaporation (par exemple,
en utilisant un récipient de pesage doté d’un couvercle) et d’estimer la contribution à l’incertitude de
l’évaporation.
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ISO 8655-6:2022(F)
Afin de maintenir l’erreur due à l’évaporation aussi faible que possible, l’utilisation d’un piège à humidité
peut être envisagée.
L’erreur due à l’évaporation durant la série de mesures doit être déterminée par voie expérimentale au
cours du cycle (voir 8.3.2) ou dans le cadre d’une étude distincte et corrigée de façon mathématique
(voir 9.1). L’incertitude de cette correction doit être prise en compte dans l’incertitude de mesure.
7.4 Durée du cycle d’essai
La durée du cycle d’essai correspond au temps nécessaire pour effectuer le pesage d’un volume délivré
et doit être la plus faible possible.
Dans le cas des pipettes à déplacement d’air, la durée du cycle d’essai équivaut au temps entre 8.3.2 h)
et 8.3.2 r).
Il est important que la durée du cycle d’essai, définie ci-dessus, soit régulière d’un cycle à un autre,
de sorte qu’une compensation mathématique fiable de l’erreur due à l’évaporation au cours de la série
de mesurages puisse être appliquée.
8 Mode opératoire
8.1 Généralités
8.1.1 Volume d’essai
Dans le cas d’un appareil à volume fixe, le volume d’essai est le volume nominal. Dans le cas d’un AVAP
à volume variable (volume choisi par l’utilisateur), au moins trois volumes doivent être soumis à essai:
— le volume nominal;
— 50 % du volume nominal ou du volume le plus proche possible (si équidistant, utiliser la valeur la
plus élevée);
— la limite inférieure de la plage de volume ou 10 % du volume nominal (en prenant la valeur la plus
élevée des deux).
8.1.2 Nombre de mesurages
Afin de déterminer l’erreur de mesure d’un AVAP conformément au présent document, dix mesures
ou plus doivent être effectuées pour chaque volume à soumettre à essai. Ces mesures sont utilisées
pour calculer l’erreur systématique et aléatoire de mesure conformément à l’Article 9.
8.1.3 Mode opératoire de pesage
Dans le cas des appareils conçus pour la distribution (Ex), le pesage doit toujours impliquer la
distribution du liquide d’essai dans le récipient de pesage. Dans le cas des appareils conçus pour
l’aspiration (In), le pesage doit toujours impliquer l’aspiration du liquide d’essai du récipient de pesage.
NOTE L’étape d’aspiration de l’échantillon dans le cadre de l’utilisation d’un diluteur en est un exemple.
Le récipient de pesage doit être propre et contenir suffisamment de liquide pour couvrir le fond du
récipient au début du mode opératoire de pesage afin de maintenir une humidité relative suffisamment
élevée.
5
© ISO 2022 – Tous droits réservés
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ISO 8655-6:2022(F)
8.1.4 Conditions d’essai au cours du mode opératoire de pesage
Au début et à la fin des mesurages, la température du liquide d’essai doit être enregistrée. La
température de l’air, la pression barométrique et l’humidité relative dans le laboratoire d’essai doivent
être enregistrées (voir 7.2).
NOTE La température de l’air et la pression barométrique sont nécessaires pour le calcul du facteur de
correction Z (voir 9.3 et Annexe A). L’humidité relative est nécessaire pour la stabilité des conditions de la pièce
et pour la documentation dans le rapport d’essai [voir l’Article 10, point e)].
8.1.5 Distribution des échantillons
Le liquide d’essai doit être distribué dans le récipient de pesage selon les modes opératoires spécifiques
décrits de 8.2 à 8.9, à moins que les instructions du fabricant de l’AVAP ne spécifient un autre mode
opératoire de distribution, auquel cas le mode opératoire décrit dans les instructions du fabricant
peut être utilisé. En cas d’utilisation du mode opératoire de distribution de volume spécifié dans les
instructions du fabricant, ce mode opératoire doit être documenté dans le rapport d’essai de manière
suffisamment détaillée afin de pouvoir reproduire l’essai.
8.2 Préparation
Laisser l’AVAP soumis à essai, l’équipement d’essai, les pièces échangeables et le liquide d’essai atteindre
l’équilibre thermique (voir 7.2).
Si un AVAP à volume variable est utilisé, sélectionner le volume d’essai; ce réglage ne doit pas être
modifié au cours du cycle d’essai de tous les mesurages répliqués.
Dans le cas d’un essai réalisé sur une burette ou un distributeur, placer l’AVAP soumis à essai, dont le
réservoir contient déjà le liquide d’essai, le plus près possible de la balance. Amorcer l’AVAP soumis
...
FINAL
INTERNATIONAL ISO/FDIS
DRAFT
STANDARD 8655-6
ISO/TC 48
Piston-operated volumetric
Secretariat: DIN
apparatus —
Voting begins on:
2021-11-17
Part 6:
Voting terminates on:
Gravimetric reference measurement
2022-01-12
procedure for the determination of
volume
Appareils volumétriques à piston —
Partie 6: Méthode gravimétrique de mesurage de référence pour la
détermination du volume
ISO/CEN PARALLEL PROCESSING
RECIPIENTS OF THIS DRAFT ARE INVITED TO
SUBMIT, WITH THEIR COMMENTS, NOTIFICATION
OF ANY RELEVANT PATENT RIGHTS OF WHICH
THEY ARE AWARE AND TO PROVIDE SUPPOR TING
DOCUMENTATION.
IN ADDITION TO THEIR EVALUATION AS
Reference number
BEING ACCEPTABLE FOR INDUSTRIAL, TECHNO-
ISO/FDIS 8655-6:2021(E)
LOGICAL, COMMERCIAL AND USER PURPOSES,
DRAFT INTERNATIONAL STANDARDS MAY ON
OCCASION HAVE TO BE CONSIDERED IN THE
LIGHT OF THEIR POTENTIAL TO BECOME STAN-
DARDS TO WHICH REFERENCE MAY BE MADE IN
NATIONAL REGULATIONS. © ISO 2021
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COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
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be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on
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or ISO’s member body in the country of the requester.
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Website: www.iso.org
Published in Switzerland
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ISO/FDIS 8655-6:2021(E)
Contents Page
Foreword .v
Introduction . vi
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 General requirements . 2
5 Test equipment .2
5.1 General . 2
5.2 Balance . 2
5.3 Liquid reservoir . 3
5.4 Weighing vessel. 3
5.5 Measuring devices . 3
6 Test liquid . 3
7 Test conditions .3
7.1 General . 3
7.2 Test room . 3
7.3 Evaporation . 4
7.4 Test cycle time . 4
8 Procedure .4
8.1 General . 4
8.1.1 Test volume . 4
8.1.2 Number of measurements . 4
8.1.3 Weighing procedure . 4
8.1.4 Test conditions during weighing procedure . 5
8.1.5 Dispensing of samples . 5
8.2 Preparation . 5
8.3 Single-channel air displacement pipettes (in accordance with ISO 8655-2) . 5
8.3.1 General . 5
8.3.2 Test cycle . 5
8.4 Multi-channel pipettes (in accordance with ISO 8655-2) . 7
8.5 Positive displacement pipettes (in accordance with ISO 8655-2) . 7
8.6 Burettes (in accordance with ISO 8655-3) . 7
8.7 Dilutors (in accordance with ISO 8655-4) . 8
8.7.1 General . 8
8.7.2 Test cycle . 8
8.8 Dispensers (in accordance with ISO 8655-5) . 9
8.9 Syringes (in accordance with ISO 8655-9) . 9
8.9.1 General . 9
8.9.2 Test cycle . 9
9 Evaluation .10
9.1 Calculation of evaporation loss . 10
9.2 Calculation of the corrected weighing value of each quantity delivered . 10
9.3 Conversion of the corrected weighing values to volume . 10
9.3.1 General . 10
9.3.2 Calculation of volume using the general formula . 10
9.3.3 Calculation of volume using Z correction factor .12
9.3.4 Mean delivered volume.12
9.4 Systematic error of measurement . 13
9.5 Random error of measurement .13
9.6 Uncertainty of measurement .13
iii
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ISO/FDIS 8655-6:2021(E)
10 Reporting of results .14
Annex A (informative) Calculation of volumes from balance readings .15
Bibliography .16
iv
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ISO/FDIS 8655-6:2021(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to
the World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see
www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 48, Laboratory equipment, in collaboration
with the European Committee for Standardization (CEN) Technical Committee CEN/TC 332, Laboratory
equipment, in accordance with the Agreement on technical cooperation between ISO and CEN (Vienna
Agreement).
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 8655-6:2002), which has been technically
revised. It also incorporates the Technical Corrigendum ISO 8655-6:2002/Cor .1:2008), which has been
technically revised.
The main changes compared to the previous edition are as follows:
— expanded uncertainty of the test equipment in Table 1 and 2 has been revised in conjunction with
ISO/TR 20461;
— Annex B has been deleted;
— new Clause 4 “General requirements” has been added;
[13]
— Formula (2) has been added based on ISO 4787 .
A list of all parts in the ISO 8655 series can be found on the ISO website.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.
v
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ISO/FDIS 8655-6:2021(E)
Introduction
The ISO 8655 series addresses the needs of:
— manufacturers, as a basis for quality control including, where appropriate, the issuance of
manufacturer’s declarations;
— calibration laboratories, test houses, users of the equipment and other bodies as a basis for
independent calibration, testing, verification and routine tests.
The tests specified in the ISO 8655 series are intended to be carried out by trained personnel.
vi
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FINAL DRAFT INTERNATIONAL STANDARD ISO/FDIS 8655-6:2021(E)
Piston-operated volumetric apparatus —
Part 6:
Gravimetric reference measurement procedure for the
determination of volume
1 Scope
This document specifies a gravimetric reference measurement procedure for the determination
of volume of piston-operated volumetric apparatus (POVA). The procedure applicable to complete
systems comprising the basic apparatus and all parts selected for use with the apparatus, disposable or
reusable, involved in the measurement by delivery (Ex) or contained (In).
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 3696:1987, Water for analytical laboratory use — Specification and test methods
1)
ISO 8655-1:— , Piston-operated volumetric apparatus — Part 1: Terminology, general requirements and
user recommendation
2)
ISO 8655-2:— , Piston-operated volumetric apparatus — Part 2: Pipettes
ISO 8655-3, Piston-operated volumetric apparatus — Part 3: Burettes
ISO 8655-4, Piston-operated volumetric apparatus — Part 4: Dilutors
ISO 8655-5, Piston-operated volumetric apparatus — Part 5: Dispensers
ISO 8655-9, Piston-operated volumetric apparatus — Part 9: Manually operated precision laboratory
syringes
ISO/IEC Guide 2, Standardization and related activities — General vocabulary
ISO/IEC Guide 99, International vocabulary of metrology — Basic and general concepts and associated
terms (VIM)
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the terms and definitions given in ISO 8655-1, ISO/IEC Guide 2 and
ISO/IEC Guide 99 apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at https:// www .electropedia .org/
1) Under preparation. Stage at the time of publication ISO/FDIS 8655-1:2021.
2) Under preparation. Stage at the time of publication ISO/FDIS 8655-2:2021.
1
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ISO/FDIS 8655-6:2021(E)
4 General requirements
When performing calibrations according to the reference measurement procedure described in
this document, all provisions and requirements of this document shall be followed or exceeded (e. g.
performing 30 instead of 10 replicates per volume). If one or more of those requirements are not
followed, conformity to this document shall not be claimed.
5 Test equipment
5.1 General
Measurements by the following equipment (balance, thermometers, hygrometer, barometer) shall be
traceable to the International System of Units (SI) and shall meet the uncertainty requirements of this
document.
NOTE An example of the calculation of the expanded uncertainty of the gravimetric reference procedure is
[10]
given in ISO/TR 20461 .
5.2 Balance
The balance used for testing shall be chosen according to the minimum requirements specified in
Table 1, depending on the nominal volume of the apparatus under test. The balance parameters are
defined so that the expanded uncertainty in use is less than one-fourth of the maximum permissible
systematic error of the apparatus.
Table 1 — Minimum requirements for balances
Nominal volume of appa- Expanded uncertainty in
a
Resolution (d) Repeatability (s)
a, b
ratus under test (V) use U (k = 2)
mg mg mg
c c, e c, e
0,001 0,006 0,012
0,5 µl ≤ V < 20 µl
d d d
0,01 0,03 0,06
20 μl ≤ V < 200 μl 0,01 0,025 0,05
200 μl ≤ V ≤ 10 ml 0,1 0,2 0,4
10 ml < V ≤ 1 000 ml 1 2 4
1 000 ml < V ≤ 2 000 ml 10 10 40
a
The repeatability and expanded uncertainty in use value, in this table, apply in the volume determination of a single
channel apparatus. When a single-channel balance is used exclusively for volume determination of multichannel pipettes
the repeatability and expanded uncertainty in use values are double the values of this table. See also Footnote d.
b
Expanded uncertainty in use can be estimated according to Reference [2] or Reference [11] at the value of the nominal
volume. Expanded uncertainty in use shall include non-corrected errors as well as possible drift and environmental
effects to balance sensitivity. Regular sensitivity adjustments are recommended to improve balance sensitivity. Expanded
uncertainty in use may be taken from the balance calibration certificate or calculated separately (see example in
ISO/TR 20461). Expanded uncertainty in use can be estimated from the expanded uncertainty of calibration by considering
additional contributions as described above, where applicable
c
Single-channel balance.
d
Multi-channel balance, only valid for multi-channel pipettes. Multi-channel balances of 0,01 mg readability may be
used to test multi-channel pipettes with nominal volumes below 20 µl only if the expanded uncertainty in use is less than
one-fourth of the maximum permissible systematic error of the apparatus.
e
For single-channel pipettes of nominal volumes of less than 2 µl, a balance with a repeatability and an expanded
uncertainty better than the values in the table shall be used so that the expanded uncertainty in use is less than one-fourth
of the maximum permissible systematic error of the apparatus.
2
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ISO/FDIS 8655-6:2021(E)
5.3 Liquid reservoir
The liquid reservoir shall have sufficient capacity for all the test liquid likely to be required for the
complete series of tests.
NOTE The temperature difference between the test liquid and the room temperature can be minimized by
the use of an appropriate liquid reservoir.
5.4 Weighing vessel
The weighing vessel should be chosen for the selected test procedure according to Clause 8. Care shall
be taken regarding the evaporation loss of water during the delivery and weighing procedure.
5.5 Measuring devices
The minimum requirements for each relevant measurement device are specified in Table 2.
Table 2 — Minimum requirements for the measuring devices
Expanded uncertainty of meas-
urement
Device Resolution
(k = 2)
Thermometer for liquids 0,1 °C 0,2 °C
Thermometer for room air 0,1 °C 0,3 °C
Hygrometer 1 % relative humidity 5 % relative humidity
Barometer 0,1 kPa 1 kPa
Timing device 1 s not applicable
6 Test liquid
Use distilled or deionized water conforming to grade 3 or better as specified in ISO 3696:1987. The
water temperature shall be within ±0,5 °C of ambient air temperature (see 7.2).
7 Test conditions
7.1 General
All equipment used to test the POVA shall be operated as specified in the operation manual.
7.2 Test room
The test shall be carried out in a draught-free room with a stable environment. The test room shall have
a relative humidity between 45 % and 80 % and a temperature of (20 ± 3) °C with a maximum variation
of ±0,5 °C during the test. Prior to the test, the apparatus to be tested, all test equipment, and test liquid
shall have reached equilibrium within the specified conditions. The temperature variation of the test
room during this time should not be more than 0,5 °C per hour.
The environmental conditions, air temperature and air humidity, shall be within the specified limits for
the test room for at least 2 h before starting the test (minimum equilibration time) and during the test
itself.
NOTE It is unlikely that this minimum equilibration time will be less than 2 h and can be considerably longer.
When the POVA is required for use in a country which has adopted a standard reference temperature
[1]
of 27 °C (the alternative temperature recommended in ISO 384 for such use), this figure shall replace
the reference to 20 °C.
3
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ISO/FDIS 8655-6:2021(E)
7.3 Evaporation
Particularly for small tested volumes (<50 µl) errors due to evaporation of the test liquid during
weighing should be taken into consideration. Apart from the geometry of the weighing vessel, the test
cycle time (see 7.4) is important.
NOTE Especially for testing apparatus of the lowest volume possible, evaporation loss is an issue. A way to
handle evaporation loss is, for example, careful selection of the geometry of the weighing vessel.
Any measures to minimise evaporation (e.g. the use of a weighing vessel with a lid) should be considered
while the contribution to uncertainty due to evaporation should be estimated.
In order to keep the error due to evaporation as small as possible, the use of an evaporation trap may be
considered.
The error due to evaporation for the measuring series shall be determined experimentally in the
cycle (see 8.3.2) or in a separate study and corrected mathematically (see 9.1). The uncertainty of this
correction shall be considered in the uncertainty of measurement.
7.4 Test cycle time
The test cycle time is the time required to complete the weighing of one delivered volume and shall be
kept to a minimum.
In the case of air-displacement pipettes, the test cycle time is the time between 8.3.2 h) and 8.3.2 r).
It is important that the test cycle time, as defined above, is regular from cycle to cycle, so that a reliable
mathematical compensation of the error due to evaporation during the measuring series can be applied.
8 Procedure
8.1 General
8.1.1 Test volume
In the case of a fixed-volume apparatus, the test volume is the nominal volume. In the case of variable-
volume (user selectable volume) POVA, at least the following three volumes shall be tested:
— nominal volume;
— 50 % of the nominal volume or the closest possible (if equidistant, use the higher value);
— the lower limit of the usable volume range or 10 % of the nominal volume (whichever is greater).
8.1.2 Number of measurements
To determine the measurement error of a POVA according to this document, ten measurements or
more for each volume to be tested shall be performed. These measurements are used to calculate the
systematic and the random error of measurement in accordance with Clause 9.
8.1.3 Weighing procedure
For apparatus designed to deliver (Ex), weighing shall always involve delivery of test liquid into the
weighing vessel. Weighing for apparatus designed to contain (In) shall always involve removal of test
liquid from the weighing vessel.
NOTE An example of contained (In) is the sample uptake step in the use of a dilutor.
4
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ISO/FDIS 8655-6:2021(E)
The weighing vessel shall be clean and have enough liquid inside to cover the bottom of the vessel when
the measurement procedure is started, to keep the relative humidity sufficiently high.
8.1.4 Test conditions during weighing procedure
At the start and at the end of the measurements, the temperature of the test liquid shall be recorded.
The air temperature, the barometric pressure and the relative humidity in the test room shall be
recorded (see 7.2).
NOTE Air temperature and barometric pressure are necessary for the calculation of the correction factor Z
(see 9.3 and Annex A); the relative humidity is necessary for the stability of the room conditions and is necessary
for documentation in the test report [see Clause 10, item e)].
8.1.5 Dispensing of samples
The test liquid shall be delivered into the weighing vessel following the specific procedures described
in 8.2 to 8.9 unless the POVA manufacturer's instructions specify a different volume delivery procedure,
in which case the procedure described by the manufacturer's instructions may be used. If the volume
delivery procedure specified in the manufacturer's instruction is used, that procedure shall be
documented in the test report in sufficient detail to allow the test to be replicated.
8.2 Preparation
Leave the POVA under test, the test equipment, exchangeable parts, and test liquid to reach thermal
equilibrium (see 7.2).
If using a variable volume POVA, select the test volume; this setting shall not be altered during the test
cycle of all replicate measurements.
If testing a burette, dilutor, or dispenser, place the POVA under test, with its reservoir already filled with
test liquid, as close to the balance as possible. Prime the POVA under test according to manufacturer's
instructions in order to remove any air bubbles inside the tubes and valves. Set the delivery velocity
according to the manufacturer’s instructions. The first drops of liquid might need to be discarded
before starting the calibration, if indicated in the manufacturer's instruction.
8.3 Single-channel air displacement pipettes (in accordance with ISO 8655-2)
8.3.1 General
In the case of electronic motorised pipettes, aspiration and delivery of test liquid are automatic. The
remainder of the procedure is carried out following the steps described in 8.3.2. The user should refer
to the operation manual for speed settings of aspiration and delivery.
NOTE More information regarding this type of piston pipettes can be found in ISO 8655-2:—, Annex B.
Forward pipetting shall always be performed.
8.3.2 Test cycle
Perform the test cycle as follows:
a) Fit the selected tip on the piston pipette.
b) In order to reach humidity equilibrium in the air-displacement piston pipette, aspirate the test
liquid five times.
c) Depress plunger.
d) Holding the pipette in a vertical position, immerse the tip in the test liquid to the appropriate depth
below the surface of the test liquid (see Table 3).
5
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ISO/FDIS 8655-6:2021(E)
[7, 8]
Table 3 — Immersion depths during aspiration and wait time after aspiration of test liquid
Volume Immersion depth Wait time
[µl] [mm] [s]
≤ 1 1 to 2 1
> 1 to 100 2 to 3 1
> 100 to 1 000 2 to 4 1
> 1 000 to 20 000 3 to 6 3
e) Release the plunger slowly, if hand operated.
f) Pause for the recommended wait time (see Table 3).
g) Withdraw tip vertically and carefully from t
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.