Microbiology — General guidance for enumeration of Clostridium perfringens — Colony-count technique

Microbiologie — Directives générales pour le dénombrement de Clostridium perfringens — Technique par comptage des colonies

General Information

Status
Withdrawn
Publication Date
03-Jul-1985
Withdrawal Date
03-Jul-1985
Technical Committee
Current Stage
9599 - Withdrawal of International Standard
Completion Date
17-Apr-1997
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ISO 7937:1985 - Microbiology -- General guidance for enumeration of Clostridium perfringens -- Colony-count technique
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ISO 7937:1985 - Microbiology — General guidance for enumeration of Clostridium perfringens — Colony-count technique Released:7/4/1985
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International Standard 0 7937
~~ ~
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATIONWEWYHAPOIIHAR OPrAHHBAUHR no CTAHflAPTH3AUHH.ORGANlSATlON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Microbiology - General guidance for enumeration of
Clostridium perfringens - Colony count technique
Microbiologie - Directives générales pour le dénombrement de Clostridium perfringens - Méthode par comptage des colonies
First edition - 1985-07-01
UDC 579.67.087.23 : 579.852.13 Ref. No. IS0 7937-1s (E)
Descriptors : microbiological analysis, detection, micro-organisms, food products, bacteria count methods.
Price based on 7 pages

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IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national standards bodies (IS0 member bodies). The work of preparing International
Standards is normally carried out through IS0 technical committees. Each member
body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the IS0 Council. They are approved in accordance with IS0 procedures requiring at
least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard IS0 7937 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34,
, Agricultural food products.

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IS0 7937-1985 (E)
INTERNATIONAL STANDARD
Microbiology - General guidance for enumeration of
Clostridium perfringens - Colony count technique
O Introduction 1 Scope and field of application
This International Standard gives general guidance for the
O. 1 This International Standard is intended to provide general
enumeration of viable Clostridium perfringens in products in-
guidance for the examination of products not dealt with by ex-
tended for human consumption or feeding of animals.
isting International Standards and for the reference of bodies
preparing microbiological methods of test for application to
food products or to animal feeding stuffs. In view of the large
2 Reference
variety of products within this field of application, these
guidelines may not be appropriate for some prod- IS0 6887, Microbiology - General guidance for the prepara-
ucts in every detail, and for some other products it may be
tion of dilutions for microbiological examination.
necessary to use different methods. Nevertheless, it is hoped
that, in all cases, every attempt will be made to apply these
3 Definitions
guidelines as far as possible and that deviations from them will
only be made if absolutely necessary for technical reasons.
For the purpose of this International Standard, the following
definitions apply.
When this International Standard is next reviewed, account will
be taken of all information then available regarding the extent
3.1 Clostridium perfringens: Bacteria that form black col-
to which the guidelines have been followed and the reasons
onies in the specified selective medium and which give positive
which necessitated deviation from them in the case of par-
confirmatory reactions when the test is carried out by the
ticular products.
method specified in this International Standard.
The harmonization of test methods cannot be immediate, and
for certain groups of products, International Standards and/or
3.2 enumeration of C. perfringens: Determination of the
national standards that do not comply with the guidelines may number of viable and confirmed C. perfringens bacteria per
already exist. In cases where International Standards already millilitre or per gram of sample, when the test is carried out by
exist for the product to be tested, they should be followed, but the method specified in this International Standard.
it is hoped that, when they are reviewed, they will be aligned
with this International Standard so that, eventually, the only re-
4 Principle
maining departures from these guidelines will be those
necessary for well established technical reasons.
4.1 Inoculation of Petri dishes with a specified quantity of the
test sample if the initial product is liquid, or a specified quantity
0.2 For practical reasons, the definition of Clostridium per-
of the initial suspension in the case of other products.
fringens given in clause 3 and used as the basis for the pro-
cedure does not exclusively describe strains of Clostridium per-
Inoculation, under the same conditions, using decimal dilutions
fringens. In particular, the confirmatory tests are inadequate to
of the test sample or of the initial suspension.
Clostridium perfringens and other closely
distinguish between
related but less commonly encountered Clostridium species
Mixing with a selective medium (poured plate technique) and
such as C. paraperfringens and C. absonum.
adding an overlayer of the same medium.
4.2 Anaerobic incubation of the plates at 35 OC or 37 OC1)
0.3 For statistical reasons, the lowest limit for the number of
for 20 h.
colonies counted per dish has been set at 15, but, for practical
purposes, a count of lower numbers of Clostridium perfringens
is often required. The confidence limits of such determinations
4.3 Calculation, from the number of black colonies appearing
(estimated counts) are given in the annex.
on the plates, of the number of characteristic colonies.
1) The temperature should be agreed between the parties concerned and recorded in the test report.
1

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IS0 7937-1985 (E)
Store in a refrigerator at 4 f 2 OC.
4.4 Subjection of characteristic colonies to confirmatory pro-
cedures and calculation of the number of C. perfringens per
Discard unused medium 2 weeks after preparation.
millilitre or per gram of sample.
Preparation of agar plates for confirmation
5 Diluent, culture media and reagents
Transfer portions of about 15 ml of the base, melted and
cooled to approximately 45 OC, to Petri dishes and allow to
5.1 Basic materials
solidify.
In order to improve the reproducibility of the results, it is
Immediately before use, dry the plates, preferably with the
recommended that, for the preparation of the diluent and
lids off and the agar surface downwards, in a drying cabinet
culture media, dehydrated basic components, or complete
(6.2) at 50 OC for 30 min.
dehydrated media, be used. Similarly, commercially prepared
reagents may also be used. The manufacturer's instructions
If prepared in advance, the undried plates shall not be kept
shall be rigorously followed.
longer than 4 h at room temperature or 1 day at 4 OC.
Chemical products shall be of recognized analytical quality.
5.3.2 D-Cycloserine solution
The water used shall be distilled or deionized water, free from
Composition
substances that might inhibit the growth of Clostridium per-
fringens under the test conditions.
0-Cycloserine (use white crystalline powder only) 4,O g
Water 100 ml
Measurements of pH shall be made using a pH meter (6.51,
measurements being referred to a temperature of 25 OC. If the
Preparation
diluent and culture media are not used immediately, they shall,
unless otherwise stated, be stored in the dark at approximately Dissolve the o-cycloserine in the water and sterilize the solu-
4 OC, in conditions which do not produce any change in their tion by filtration.
composition.
Store in a refrigerator at 4 f 2 OC.
5.2 Diluent
Discard unused solution 4 weeks after preparation.
See IS0 6887 and the specific standard dealing with the
5.3.3 Complete medium
product to be examined.
Before plating (see 9.2). add 1 ml of the sterilized D-cycloserine
5.3 Egg-yolk-free tryptose-sulfite-cycloserine
solution (5.3.2) to each 100 ml of sterile melted base (5.3.1 1 at
agar (SC11)
50 OC.
5.3.1 Base
5.4 Fluid thioglycollate medium
Composition
Composition
Tryptose 2) 15,O g Pancreatic casein digest
Soytone2) 5,O g L-Cystine
Yeast extract 5,O g
Dextrose (D-glucose)
Disodium disulfite (Na2S205), anhydrous 1,og Yeast extract
5,O
Ammonium iron(ll1) citrate3) 1.09
Sodium chloride
Agar 12,O to 18,O 94)
Sodium thioglycollate (mercaptoacetate)
Water 1000ml
Agar
Resazu rin
Preparation
Water
Dissolve the components in the water by boiling.
Preparation
Adjust the pH so that it will be 7,6 after sterilization.
Dissolve the components in the water by boiling.
Transfer the base to tubes or flasks or bottles of capacity Adjust the pH so that it will be 7,l after sterilization.
not more than 500 ml.
Dispense 10 ml portions into test-tubes and sterilize at
121 OC for 15 min.
Sterilize for 10 min at 121 OC.
1) This was originally designated EY-free TSC (HAUSCHILD and HILÇHEIMER. Appl. Microbiol. 27 1974: 78-82].
2) The names tryptose and soytone are used at present only by certain producers of media. Any other pancreatic casein or soybean digest giving
comparable results may be used.
31 This reagent should contain at least 15 % (m/m) of iron.
4) According to the manufacturer's instructions.
2

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IS0 7937-1985 (E)
5.5 Motility-nitrate medium 5.7 Nitrite-detection reagent
Composition
5.7.1 5-amino-2-naphthalenesulfonic acid (5-2 ANSA)
solution
Peptone 5,O g
Dissolve 0,l g of 5-2 ANSA in 100 ml of 15 % (VI V) acetic acid
Beef extract 3,O g
solution. Filter through a filter paper.
Galactose 5,O g
Glycerol 5,O g
Store in a well-stoppered brown bottfe (preferably with a bulb-
Potassium nitrate (KNOJ) 1,og
type dropper) at 4 OC.
Disodium hydrogenorthophosphate ( Na2HP04) 23 g
1 ,O to 5,O gl)
Agar
1 000ml
Water 5.7.2 Sulfanilic acid solution
Dissolve 0,4 g of sulfanilic acid in 100 ml of 15 % ( V/ V) acetic
Preparation
acid solution. Filter through a filter paper.
Dissolve the components in the water by boiling.
Store in a well-stoppered brown bottle (preferably with a bulb-
type dropper) at 4 OC.
Adjust the pH so that it will be 7.3 after sterilization.
5.7.3 Preparation of complete reagent
'. Transfer the medium to culture tubes in 10 ml quantities and
0
sterilize at 121 OC for 15 min.
Mix equal volumes of the two solutions (5.7.1 and 5.7.2) just
before use.
If not used the same day, store in a refrigerator at 4 f 2OC;
just prior to use, heat in boiling water or flowing steam for
Discard unused reagent immediately.
15 min and then cool rapidly to the incubation temperature.
5.8 Zinc dust
Discard unused medium 4 weeks after preparation.
6 Apparatus and glassware
5.6 Lactose-gelatine medium
NOTE - Disposable apparatus is an acceptable alternative to
Composition
glassware if it has suitable specifications.
Tryptose 2) 15,O g
Usual microbiological laboratory equipment and in particular
Yeast extract 10,o 9
Lactose 10,o 9
6.1 Apparatus for dry sterilization (oven) or wet
Gelatine 120,o g
sterilization (autoclave) (autoclave operating either separ-
Phenol red 0,05 9
ately or as part of an apparatus for preparing and distributing
Water 1000ml
media).
0 Preparation
Apparatus that will come into contact with the diluent, culture
media, or the sample, except for apparatus that is supplied
sterile (in particular plastics apparatus), shall be sterilized by
Dissolve the components, except the lactose and phenol
one of the following methods :
red, in the water.
by being kept at 170 to 175 OC for not less than 1 h in an
a)
Adjust the pH so that it will be 7,5 after sterilization.
oven;
Add the lactose and phenol red, dispense 10 ml portions by being kept at 121 f 1 OC for not less than 20 min in
b)
into test-tubes and sterilize at 121 OC for 15 min.
an autoclave.
If not used the same day, store in a refrigerator at 4 rf- 2 OC.
6.2 Drying cabinet or oven, ventilated by convecti
...

Norme internationale @ 7937
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION*MEXJlYHAPOIlHAR OPrAHM3AUMR il0 CTAHJlAPTM3AUMMeORGANISATlON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Microbiologie - Directives générales pour le
dénombrement de Clostridium perfringens - Méthode
par comptage des colonies
Microbiology - General guidance for enumeration of Clostridium perfringens - Colony count technique
Première édition - 1985-07-01
I CDU 579.67.087.23 : 579.852.13 Réf. no : IS0 7937-1985 (FI
LL
-
Descripteurs : analyse microbiologique, détection, micro-organisme, produit alimentaire, comptage des bactéries.
8
Prix basé sur 7 pages

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Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d'organismes nationaux de normalisation (comités membres de I'ISO). L'élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de IWO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec IWO, participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I'ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I'ISO qui requièrent l'approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale IS0 7937 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires.
0 Organisation internationale de normalisation, 1986 O
Imprimé en Suisse

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IS0 7937-1985 (F)
NORM E I NTE R NAT1 O NALE
Microbiologie - Directives générales pour le
dénombrement de Clostridium perfringens - Méthode
par comptage des colonies
O Introduction 15, mais il est souvent demandé, pour des besoins pratiques,
de procéder à un comptage sur des nombres encore inférieurs
de Clostridium perfringens. Les limites de confiance de telles
0.1 La présente Norme internationale se propose de fournir
déterminations (estimation des petits nombres) sont données
des directives générales pour l'examen de produits non traités
en annexe.
dans les Normes internationales existant actuellement et pour la
référence par les organismes élaborant des méthodes d'essais
microbiologiques destinées à être appliquées à des produits ali-
1 Objet et domaine d'application
mentaires ou à des aliments pour animaux. En raison de la
grande diversité des produits entrant dans ce domaine d'appli-
La présente Norme internationale donne des directives généra-
cation, il est possible que ces directives, dans tous leurs détails,
les pour le dénombrement de Clostridium perfringens revivifia-
ne conviennent pas exactement à certains produits et que, pour
bles dans les produits destinés à la consommation humaine où
certains autres produits, il puisse être nécessaire d'employer
à l'alimentation animale.
des méthodes différentes. Néanmoins, il est à espérer que,
dans tous les cas, tous les efforts seront faits pour appliquer,
chaque fois qu'il sera possible, ces directives, et qu'on n'aura
recours à des dérogations que si cela est absolument nécessaire
2 Référence
pour des raisons techniques.
IS0 6887, Microbiologie - Directives générales pour la prépa-
Lorsque la présente Norme internationale sera réexaminée, il
ration des dilutions en vue de l'examen microbiologique.
sera tenu compte de tous les renseignements disponibles à ce
moment-là, à savoir dans quelle mesure les directives auront
été suivies et les raisons pour lesqueltes il aura été nécessaire
3 Définitions
d'y déroger dans le cas de produits particuliers.
e
Dans le cadre de la présente Norme internationale, les défini-
L'harmonisation des méthodes d'essai ne peut pas être immé-
tions suivantes sont applicables.
diate et, pour certains groupes de produits, des Normes inter-
nationales et/ou des normes nationales, qui ne concordent pas
avec ces directives, existent peut-être déjà. Dans le cas où des 3.1 Clostridium perfringens : Bactéries qui forment des colo-
Normes internationales existent déjà pour le produit à essayer, nies noires dans le milieu sélectif spécifié et qui donnent des
elles devront être appliquées, mais il serait souhaitable que, réactions de confirmation positives lorsque l'essai est effectué
lorsqu'elles viendront en révision, elles soient alignées sur la selon la méthode spécifiée dans la présente Norme internatio-
présente Norme internationale, si bien que, finalement, les seu- nale.
les divergences restantes seront celles qui sont nécessaires
pour des raisons techniques bien établies.
3.2 dénombrement de C. perfringens: Détermination du
nombre de bactéries Clostridium perfringens revivifiabies et
0.2 Pour des raisons pratiques, la définition de Clostridium confirmées par millilitre ou par gramme d'échantillon lorsque
perfringens donnée au chapitre 3 et utilisée comme base pour le
l'essai est effectué suivant la méthode spécifiée dans la pré-
mode opératoire, ne décrit pas exclusivement les souches de sente Norme internationale.
Clostridium perfringens. En particulier, les essais de confirma-
tion sont inadéquats pour distinguer Clostridium perfringens
des autres espèces de Clostridium proches, mais moins com-
4 Principe
munément rencontrées, telles que C. paraperfringens, C. abso-
num, etc.
4.1 Ensemencement des boîtes de Petri avec une quantité
déterminée de l'échantillon pour essai si le produit à examiner
0.3 Pour des raisons statistiques, il est admis que la limite du
est liquide, ou avec une quantité déterminée de la suspension
nombre de colonies le plus bas à compter par boîte est de
mère dans le cas d'autres produits.
1

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IS0 7937-1985 (FI
Dans les mêmes conditions, ensemencement des dilutions 5.3 Gélose tryptasè-sulfite 4 la cyclosérine (SC121
décimales obtenues à partir de l'échantillon pour essai ou de la exempte de jaune d'ceuf
suspension mère dans le cas d'autres produits.
5.3.4 Milieu de base
Mélange avec un milieu sélectif (ensemensement dans la
masse) et addition d'une couche du même milieu par dessus.
Composition
Tryptose3) 15,O 9
4.2 Incubation en anaérobiose des boîtes à 35 OC ou 37 OC')
Sojatone3) 5,O 9
durant 20 h.
Extrait de levure 5,O 9
Bisulfite disodique iNa$S2O5), anhydre 1,09
4.3 Calcul du nombre de colonies caractéristiques, à partir du
Citrate de fer(lll) ammoniacal4) 1,Og
nombre des colonies noires visibles sur les boîtes.
Agar-agar 12,Oà 18,095)
Eau 1000ml
4.4 Soumission des colonies caractéristiques aux opérations
Préparation
de confirmation et calcul du nombre de C. perfringens par milli-
litre ou par gramme d'échantillon.
Dissoudre les composants dans l'eau, en portant à ébulli-
tion.
il soit de 7,6 à
Ajuster le pH de sorte qu'après stérilisation,
5 Diluant, milieux de culture et réactifs
25 OC.
Transvaser le milieu de base dans des tubes ou flacons de
5.1 Composants de base
capacité maximale de 500 ml.
Pour améliorer la reproductibilité des résultats, il est recom-
Stériliser durant 10 min à 121 OC.
mandé d'utiliser, pour la préparation du diluant et des milieux
Conserver au réfrigérateur à 4 f 2 OC.
de culture, des composants de base déshydratés ou des milieux
complets déshydratés. De même, des réactifs préparés com-
Ne pas utiliser le milieu plus de 2 semaines après sa prépara-
mercialement peuvent être également utilisés. Les instructions
tion.
du fabricant doivent être suivies scrupuleusement.
Préparation des boîtes de gélose en vue de la confirmation
Les produits chimiques utilisés doivent être de qualité analyti-
que reconnue.
Répartir par quantités de 15 ml le milieu de base liquéfié et
refroidi à environ 45 OC dans des boîtes de Petri et laisser se
L'eau utilisée doit être de l'eau distillée ou déionisée, exempte
solidifier.
de substances susceptibles d'inhiber la croissance de Clostri-
dium perfringens dans les conditions de l'essai.
Immédiatement avant l'emploi, faire sécher les boîtes de
préférence ouvertes, avec la surface de la gélose orientée
vers le bas, dans une étuve (6.2) à 50 OC durant 30 min.
Les mesures du pH doivent être faites au moyen d'un pH-mètre
(6.51, réglé à la température de 25 OC.
Si elles sont préparées à l'avance, les boîtes non séchées ne
doivent pas être conservées plus de 4 h à la température
Si le diluant et les milieux de culture ne sont pas utilisés extem-
ambiante ou plus de 1 jour à 4 OC.
poranément, ils doivent, sauf spécifications contraires, être
conservés à l'obscurité à une température d'environ 4 OC, dans
des conditions évitant toute modification de leur composition. 5.3.2 Solution de D-cyclosérine
Composition
5.2 Diluant
D-cyclosérine (n'utiliser que de la poudre blanche
Voir IS0 6887 et la Norme spécifique traitant du produit à
cristalline) 4,O 9
examiner.
Eau 100 ml
1) La température d'incubation doit faire l'objet d'accord entre les parties concernées et doit être indiquée dans le procès-verbal d'essai.
2) SC était désigné à l'origine comme TSC exempt d'EY (HAUSCHILD and HILSHEIMER. Appl. Microbiol. 27 (1974) pp. 78-82).
3) Les dénominations «tryptose» et ((sojatonev ne sont utilisées actuellement que par certains fabricants de milieux. Tout autre digestat pancréatique
de caséine ou de soja fournissant des résultats comparables peut être utilisé.
4) Ce réactif doit contenir au moins 15 % (rn/rn) de fer.
5) Selon les instructions du fabricant.
2

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IS0 7937-1985 (FI
Préparation Répartir le milieu dans des tubes par quantités de 10 ml et
stériliser à 121 OC durant 15 min.
Dissoudre la D-cyclosérine dans l’eau et stériliser la solution
Si la préparation n‘est pas utilisée le jour même, conserver
par filtration.
au réfrigérateur à 4 f 2 OC; juste avant l’emploi chauffer
dans l’eau bouillante ou par courant de vapeur pendant
Conserver au réfrigérateur à 4 f 2 OC.
15 min, puis refroidir rapidement pour amener à la tempéra-
ture d’incubation.
Ne pas utiliser la solution plus de quatre semaines après sa
préparation.
Ne pas utiliser le milieu plus de 4 semaines après sa prépara-
tion.
5.3.3 Milieu complet
5.6 Milieu lactosé à la gélatine
Avant l‘ensemencement (voir 9.2), ajouter 1 ml de la solution
stérilisée de D-cyclosérine (5.3.2) par 100 ml de milieu de base
Composition
à 50 OC.
stérile (5.3.1) liquéfié
Tryptosez) 15,og
5.4 Milieu thioglycolate liquide
Extrait de levure 10,o g
Lactose 10,o g
Composition
Gélatine 120,o g
Rouge de phénol 0,05 g
Digestat pancréatique de caséine
Eau 1 000ml
L-cystine
Dextrose (d-glucoce)
Préparation
Dissoudre les composants à l‘exception du lactose et du
rouge de phénol dans l’eau.
Agar-agar
Resazurine Ajuster le pH de façon qu‘après stérilisation il soit de 7,5 à
Eau 25 OC.
Ajouter le lactose et le rouge de phénol, répartir par quanti-
Préparation
tés de 10 ml dans des tubes et stériliser à 121 OC durant
15 min.
Dissoudre les composants dans l‘eau en portant à ébullition.
Si la préparation n’est pas utilisée le jour même, conserver
Ajuster le pH de facon qu’après stérilisation, il soit de 7,l à
au réfrigérateur à 4 f 2 OC.
25 OC.
Juste avant l‘emploi, chauffer dans l’eau bouillante ou sous
Répartir dans des tubes par quantités de 10 ml et stériliser à
courant de vapeur durant 15 min, puis refroidir rapidement à
121 OC durant 15 min.
la température d’incubation.
(I) 5.5 Milieu nitrate-mobilité
Ne pas utiliser le milieu plus de 3 semaines après sa pré-
paration.
Composition
5.7 Réactif pour la recherche des nitrites
Peptone 5,O g
Extrait de viande de bœuf
3,O g
5.7.1 Solution d’acide amino-5 naphtalène9 sulfonique
Galactose 5,O g
15-2 ANSA)
Glycérol 5,O g
Nitrate de potassium (KNO,) 1,og
Dissoudre 0,l g de 5-2 ANSA dans 100 ml de solution d‘acide
Hydrogéno-orthophosphate disodique ( Na2HP04) 2,5 g
acétique à 15 % (I// VI. Filtrer sur papier filtre.
Agar-agar 1,0 à 5,O gl)
Eau 1000ml
Conserver dans un flacon de verre brun bien bouché (de préfé-
rence muni de compte-gouttes) à 4 OC.
Préparation
Dissoudre les composants dans l’eau en portant à ébullition.
5.7.2 Solution d’acide sulfanilique
Ajuster le pH de façon qu’après stérilisation, il soit de 7,3 à
Dissoudre 0,4 g d’acide sulfanilique dans 100 ml de solution
25 OC.
d’acide acétique à 15 % ( V/ VI. Filtrer sur papier filtre.
Selon les instructions du fabricant.
1)
Le nom de «tryptose» n’est actuellement utilisé que par certains fabricants. Tout autre digestat de caséine fournissant des résultats comparables
2)
peut être utilisé.
3

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IS0 7937-1985
6.8 Tubes à essais, de 18 mm de diamètre et 180 mm de
Conserver dans un flacon de verre brun bien bouché (de préfé-
longueur, et flacons de cultures, pour la stérilisation et la
rence muni de compte-gouttes) à 4 OC.
conservation des milieux de culture et l'incubation des milieux
liquides.
5.7.3 Préparation du réactif complet
Mélanger les volumes égaux des deux solutions (5.7.1 et 5.7.2)
6.9 Éprouvettes graduées, pour la préparation des milieux
juste avant l'emploi. complets.
Jeter immédiatement le réactif non utilisé.
6.10 Pipettes graduées, étalonnées spécialement pour
l'usage ba
...

Questions, Comments and Discussion

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