ISO 7954:1987
(Main)Microbiology — General guidance for enumeration of yeasts and moulds — Colony count technique at 25 degrees C
Microbiology — General guidance for enumeration of yeasts and moulds — Colony count technique at 25 degrees C
The method consists in preparing of poured plates using a specified selective culture medium and a specified quantity of a test sample, further dilutions of the test sample. Then aerobic incubation of the plates at 25 degrees centigrade for 3, 4 or 5 days, followed by calculation of the number of yeasts and moulds per gram or per millilitre of the sample from the number of colonies obtained on plates chosen at dilution levels so as to give a significant result.
Microbiologie — Directives générales pour le dénombrement des levures et moisissures — Technique par comptage des colonies à 25 degrés C
La présente Norme internationale donne des directives générales pour le dénombrement des levures et moisissures revivifiables dans les produits destinés à la consommation humaine ou à l'alimentation animale, par comptage des colonies à 25 °C. NOTE -- Du fait de la nature même des levures et des moisissures, le dénombrement sera sujet à certaines imprécisions.
General Information
Relations
Buy Standard
Standards Content (Sample)
IS0
INTERNATIONAL STANDARD
7954
First edition
1987-1 l-01
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEXAYHAPOAHAH OPTAHM3A~MR IlO CTAH~APTM3A~MM
General guidance for enumeration of
Microbiology -
Colony count technique at 25 OC
yeasts and moulds -
Microbio logie - Directives g&xh/es pour le dbnombrement des levures et moisissures -
Technique par comptage des colonies B 25 OC
Reference num ber
---------------------- Page: 1 ----------------------
Foreword
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national standards bodies (IS0 member bodies). The work of preparing International
Standards is normally carried out through IS0 technical committees. Each member
body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the IS0 Council. They are approved in accordance with IS0 procedures requiring at
least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard IS0 7954 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34,
Agricultural food products.
Users should note that all International Standards undergo revision from time to time
and that any reference made herein to any other International Standard implies its
latest edition, unless otherwise stated.
0 International Organization for Standardization, 1987
Printed in Switzerland
---------------------- Page: 2 ----------------------
INTERNATIONAL STANDARD IS0 7954 : 1987 (E)
General guidance for enumeration of
Microbiology -
count technique at 25 OC
yeasts and moulds - Colony
0 Introduction IS0 7218, Microbiology - General instructions for micro-
biological examinations.
This International Standard is intended to provide general
guidance for the microbiological examination of food products
not dealt with by existing International Standards and to be
3 Definition
taken into consideration by bodies preparing microbiological
methods of test for application to foods or to animal feeding
For the purpose of this International Standard, the following
stuffs.
definition applies.
Because of the large variety of products within this field of ap-
yeasts and moulds : Micro-organisms which at 25 OC form
plication, these guidelines may not be appropriate for some
colonies in a selective medium according to the method
products in every detail, and for some other products it may be
specified in this International Standard.
necessary to use different methods.
Nevertheless, it is hoped that in all cases every attempt will be
4 Principle
made to apply the guidelines provided as far as possible and
that deviations from them will only be made if absolutely
necessary for technical reasons.
4.1 Preparation of poured plates using a specified selective
culture medium and a specified quantity of the test sample if
When this International Standard is next reviewed, account will
the initial product is liquid, or of an initial suspension in the case
be taken of all information then available regarding the extent
of other products.
to which the guidelines have been followed and the reasons for
deviation from them in the case of particular products.
Preparation of other plates, under the same conditions, using
decimal dilutions of the test sample or of the initial suspension.
The harmonization of test methods cannot be immediate, and
for certain groups of products International Standards and/or
4.2 Aerobic incubation of the plates at 25 OC for 3, 4 or
national standards may already exist that do not comply with
5 days.
In cases where International Standards
these guidelines.
already exist for the product to be tested, they should be
4.3 Calculation of the number of yeasts and moulds per gram
followed, but it is hoped that when such standards are review-
ed they will be changed to comply with this International Stan- or per millilitre of sample from the number of colonies obtained
on plates chosen at dilution levels so as to give a significant
dard so that eventually the only remaining departures from
these guidelines will be those necessary for well-established resu It.
technical reasons.
5 Diluent and culture medium
1 Scope and field of application
5.1 Basic materials
This International Standard gives general guidance for the
enumeration of viable yeasts and moulds in products intended
In order to improve the reproducibility of the results, it is
for human consumption or feeding of animals by means of the
recommended that, for the preparation of the culture medium,
colony count technique at 25 OC.
dehydrated basic components or a complete dehydrated
medium be used. The manufacturer’s instructions shall be
NOTE
- Owing to the nature of yeasts and moulds, the enumeration
rigorously followed.
is subject to certain imprecisions.
The chemical products used shall be of recognized analytical
quality.
2 References
The water used shall be distilled or deionized water, free from
IS0 6887, Microbiology - General guidance for the prepara-
substances that might inhibit the growth of yeasts and moulds
tion of dilutions for microbiological examination.
under the test conditions.
1
---------------------- Page: 3 ----------------------
IS0 7954 : 1987 (E)
b) in the autoclave (6.1) by maintaining it at 121 * 1 OC for
Measurements of pH shall be made using a temperature-
not less than 20 min.
compensated pH meter (6.4).
If the prepared diluent and culture medium are not used im-
6.2 Incubator, capable of being maintained at 25 + - 1 OC.
mediately, they shall, unless otherwise stated, be stored in the
dark at between 0 and 5 OC, for no longer than 1 month, in con-
6.3 Water-bath, capable of being maintained at 45 + - 1 OC.
ditions which do not produce any change in their composition.
6.4 Temperature-compensated pH meter, having an ac-
5.2 Diluent
curacy of calibration of + 0,l pH unit at 25 OC.
Refer to IS0 6887 and to any International Standard dealing
6.5 Culture bottles or flasks.
with the product under examination.
NOTE - Bottles or flasks with non-toxic metal screw-caps may be
used.
5.3 Yeast extract-dextrose-chloramphenicol-agar
medium
6.6 Graduated pipettes, calibrated for bacteriological use
Table
only, of nominal capacities 10 and 1 ml, graduated in divisions
of 0,5 and 0,l ml respectively, and with an outflow opening of
Component Quantity
2to3mm
Yeast extract
59
I I
Dextrose (C6H ,206) 6.7 Petri dishes, of diameter 90 to 100 mm.
20 Cl
Chloramphenicol (c11 H &12N20~) OJ 9”
Agar 12 to 15 g””
7 Sampling
Water 1000 ml
Carry out sampling in accordance with the specific Inter-
In order to obtain a final concentration of 100 pg/ml of medium.
national Standard appropriate to
...
ISO
NORME INTERNATIONALE
7954
Première édition
1987-l l-01
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEXAYHAPOAHAR OPrAHM3A~MR Il0 CTAHflAPTM3AuMM
I
Directives générales pour le
Microbiologie -
dénombrement des levures et moisissures -
Technique par comptage des colonies à 25 OC
Microbiology - General guidance for enurneration of yeasts and moulds - Colony Count
technique at 25 OC
Numéro de référence
ISO 7954 : 1987 (F)
---------------------- Page: 1 ----------------------
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est normalement confiée aux comités techniques de I’ISO.
Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, .en liaison avec I’ISO participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I’ISO qui requièrent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 7954 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires.
L’attention des utilisateurs est attirée sur le fait que toutes les Normes internationales
sont de temps en temps soumises à révision et que toute référence faite à une autre
Norme internationale dans le présent document implique qu’il s’agit, sauf indication
contraire, de la dernière édition.
Organisation internationale de normalisation, 1987
0
Imprimé en Suisse
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 7954 : 1987 (F)
NORME INTERNATIONALE
Microbiologie - Directives générales pour le
dénombrement des levures et moisissures -
Technique par comptage des colonies à 25 OC
0 Introduction 2 Références
ISO 6887, Microbiologie - Directives générales pour la prépa-
La présente Norme internationale se propose de fournir des
ration des dilutions en vue de l’examen microbiologique.
directives générales pour l’examen microbiologique de produits
alimentaires non concernés par les Normes internationales exis-
ISO 7218, Microbiologie - Directives générales pour les exa-
tant actuellement et pour être prises en considération par les
mens microbiologiques.
organisations élaborant des méthodes d’essai microbiologiques
destinées à être appliquées à des produits alimentaires ou à des
aliments pour animaux.
3 Définition
En raison de la grande diversité des produits entrant dans ce
domaine d’application, il est possible que ces directives, dans
Dans le cadre de la présente Norme internationale, la définition
tous leurs détails, ne conviennent pas exactement à certains
suivante est applicable.
produits et que, pour certains autres produits, il puisse être
nécessaire d’employer des méthodes différentes.
levures et moisissures : Micro-organismes qui à 25 OC for-
ment des colonies dans un milieu sélectif selon la méthode spé-
Néanmoins, il est à espérer que, dans tous les cas, tous les
cifiée dans la présente Norme internationale.
efforts seront faits pour appliquer, chaque fois qu’il sera possi-
ble, les directives données et qu’on n’aura recours à des déro-
gations que si cela est absolument nécessaire pour des raisons
techniques.
4 Principe
4.1 Ensemencement en profondeur d’un milieu de culture
Lorsque la présente Norme internationale sera réexaminée, il
sélectif déterminé, coulé dans deux boîtes de Petri, avec une
sera tenu compte de tous les renseignements disponibles à ce
quantité définie de l’échantillon pour essai, si le produit est
moment-là, à savoir dans quelle mesure les directives auront
liquide, ou de la suspension mère pour les autres produits.
été suivies et les raisons pour lesquelles il aura été nécessaire
d’y déroger dans le cas de produits particuliers.
Dans les mêmes conditions, ensemencement des dilutions
décimales des autres boîtes, obtenues à partir de l’échantillon
L’harmonisation des méthodes d’essai ne peut pas être immé-
pour essai ou de la suspension mère.
diate et, pour certains groupes de produits, des Normes inter-
nationales et/ou des normes nationales existent peut-être déja,
qui ne concordent pas avec ces directives. Dans le cas où des 4.2 Incubation de ces boîtes en aérobiose à 25 OC pendant 3,
Normes internationales existent déjà pour le produit à contrô-
4 ou 5 jours.
ler, elles devront être appliquées, mais il serait souhaitable que,
lorsqu’elles viendront en révision, elles soient modifiées de
4.3 Calcul du nombre de levures et moisissures par gramme
facon à se conformer à la présente Norme internationale, si bien
ou par millilitre d’échantillon, à partir du nombre de colonies
que, finalement, les seules divergences restantes seront celles
obtenues dans des boîtes choisies aux niveaux de dilution don-
vraiment nécessaires pour des raisons techniques bien établies.
nant un résultat significatif.
1 Objet et domaine d’application
5 Milieu de culture et diluant
La présente Norme internationale donne des directives généra-
5.1 Composants de base
les pour le dénombrement des levures et moisissures revivifia-
bles dans les produits destinés à la consommation humaine ou
Pour améliorer la reproductibilité des résultats, il est recom-
à l’alimentation animale, par comptage des colonies à 25 OC.
mandé d’utiliser, pour la préparation du milieu de culture, des
composants de base déshydratés ou un milieu complet déshy-
draté. Les prescriptions du fabricant doivent être suivies scru-
NOTE - Du fait de la nature même des levures et des moisissures, le
dénombrement sera sujet à certaines imprécisions. puleusement.
1
---------------------- Page: 3 ----------------------
SO 7954 : 1987 (FI
Les produits ch imiques u tilisés doivent être de qualité analy- 6.1 Appareil pour la stérilisation en chaleur sèche (four)
tique reconnue. ou en chaleur humide (autoclave) (autoclave autonome ou
faisant partie d’un ensemble pour la préparation et la répartition
L’eau utilisée doit être distillée ou déionisée, exempte de sub- des milieux.
stances susceptibles d’inhiber la croissance des levures et des
moisissures dans les conditions de l’essai. Le matériel destiné à entrer en contact avec le diluant, le milieu
de culture et l’échantillon, sauf s’il est livré stérile (particulière-
mesures du pH doivent être effectuées au moyen d’un ment le matériel en matière plastique), doit être stérilisé par
Les
,mètre à compensation de température (6.4). l’une des méthodes suivantes :
PH-
Si le diluant et le milieu ne sont pas utilisés extemporanément, a) au four (6.1), en le maintenant à une température de
ils doivent, sauf spécifications contraires, être conservés à 170 à 175 OC pendant au moins 1 h;
l’obscurité entre 0 et 5 OC pendant 1 mois au maximum, dans
des conditions évitant toute modification de leur composition. b) à l’autoclave (6.1), en le maintenant à une température
de 121 + 1 OC pendant au moins 20 min.
-
5.2 Diluant
6.2 Étuve, réglable à 25 + 1 OC,
-
I’ISO 6887 et à la Norme internationale spécifique
Se reporter à
du produit à examiner. 6.3 Bain d’eau, réglable à 45 + 1 OC.
-
I
6.4 pH-mètre à compensation de température, ayant
5.3 Gel ose à l’extra it de levure au dextrose
une précision de réglage de k 0,l unité de pH à 25 OC.
chl oram phénicol
6.5 Tubes de culture
...
ISO
NORME INTERNATIONALE
7954
Première édition
1987-l l-01
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION
ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
MEXAYHAPOAHAR OPrAHM3A~MR Il0 CTAHflAPTM3AuMM
I
Directives générales pour le
Microbiologie -
dénombrement des levures et moisissures -
Technique par comptage des colonies à 25 OC
Microbiology - General guidance for enurneration of yeasts and moulds - Colony Count
technique at 25 OC
Numéro de référence
ISO 7954 : 1987 (F)
---------------------- Page: 1 ----------------------
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est normalement confiée aux comités techniques de I’ISO.
Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, .en liaison avec I’ISO participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I’ISO qui requièrent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 7954 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires.
L’attention des utilisateurs est attirée sur le fait que toutes les Normes internationales
sont de temps en temps soumises à révision et que toute référence faite à une autre
Norme internationale dans le présent document implique qu’il s’agit, sauf indication
contraire, de la dernière édition.
Organisation internationale de normalisation, 1987
0
Imprimé en Suisse
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 7954 : 1987 (F)
NORME INTERNATIONALE
Microbiologie - Directives générales pour le
dénombrement des levures et moisissures -
Technique par comptage des colonies à 25 OC
0 Introduction 2 Références
ISO 6887, Microbiologie - Directives générales pour la prépa-
La présente Norme internationale se propose de fournir des
ration des dilutions en vue de l’examen microbiologique.
directives générales pour l’examen microbiologique de produits
alimentaires non concernés par les Normes internationales exis-
ISO 7218, Microbiologie - Directives générales pour les exa-
tant actuellement et pour être prises en considération par les
mens microbiologiques.
organisations élaborant des méthodes d’essai microbiologiques
destinées à être appliquées à des produits alimentaires ou à des
aliments pour animaux.
3 Définition
En raison de la grande diversité des produits entrant dans ce
domaine d’application, il est possible que ces directives, dans
Dans le cadre de la présente Norme internationale, la définition
tous leurs détails, ne conviennent pas exactement à certains
suivante est applicable.
produits et que, pour certains autres produits, il puisse être
nécessaire d’employer des méthodes différentes.
levures et moisissures : Micro-organismes qui à 25 OC for-
ment des colonies dans un milieu sélectif selon la méthode spé-
Néanmoins, il est à espérer que, dans tous les cas, tous les
cifiée dans la présente Norme internationale.
efforts seront faits pour appliquer, chaque fois qu’il sera possi-
ble, les directives données et qu’on n’aura recours à des déro-
gations que si cela est absolument nécessaire pour des raisons
techniques.
4 Principe
4.1 Ensemencement en profondeur d’un milieu de culture
Lorsque la présente Norme internationale sera réexaminée, il
sélectif déterminé, coulé dans deux boîtes de Petri, avec une
sera tenu compte de tous les renseignements disponibles à ce
quantité définie de l’échantillon pour essai, si le produit est
moment-là, à savoir dans quelle mesure les directives auront
liquide, ou de la suspension mère pour les autres produits.
été suivies et les raisons pour lesquelles il aura été nécessaire
d’y déroger dans le cas de produits particuliers.
Dans les mêmes conditions, ensemencement des dilutions
décimales des autres boîtes, obtenues à partir de l’échantillon
L’harmonisation des méthodes d’essai ne peut pas être immé-
pour essai ou de la suspension mère.
diate et, pour certains groupes de produits, des Normes inter-
nationales et/ou des normes nationales existent peut-être déja,
qui ne concordent pas avec ces directives. Dans le cas où des 4.2 Incubation de ces boîtes en aérobiose à 25 OC pendant 3,
Normes internationales existent déjà pour le produit à contrô-
4 ou 5 jours.
ler, elles devront être appliquées, mais il serait souhaitable que,
lorsqu’elles viendront en révision, elles soient modifiées de
4.3 Calcul du nombre de levures et moisissures par gramme
facon à se conformer à la présente Norme internationale, si bien
ou par millilitre d’échantillon, à partir du nombre de colonies
que, finalement, les seules divergences restantes seront celles
obtenues dans des boîtes choisies aux niveaux de dilution don-
vraiment nécessaires pour des raisons techniques bien établies.
nant un résultat significatif.
1 Objet et domaine d’application
5 Milieu de culture et diluant
La présente Norme internationale donne des directives généra-
5.1 Composants de base
les pour le dénombrement des levures et moisissures revivifia-
bles dans les produits destinés à la consommation humaine ou
Pour améliorer la reproductibilité des résultats, il est recom-
à l’alimentation animale, par comptage des colonies à 25 OC.
mandé d’utiliser, pour la préparation du milieu de culture, des
composants de base déshydratés ou un milieu complet déshy-
draté. Les prescriptions du fabricant doivent être suivies scru-
NOTE - Du fait de la nature même des levures et des moisissures, le
dénombrement sera sujet à certaines imprécisions. puleusement.
1
---------------------- Page: 3 ----------------------
SO 7954 : 1987 (FI
Les produits ch imiques u tilisés doivent être de qualité analy- 6.1 Appareil pour la stérilisation en chaleur sèche (four)
tique reconnue. ou en chaleur humide (autoclave) (autoclave autonome ou
faisant partie d’un ensemble pour la préparation et la répartition
L’eau utilisée doit être distillée ou déionisée, exempte de sub- des milieux.
stances susceptibles d’inhiber la croissance des levures et des
moisissures dans les conditions de l’essai. Le matériel destiné à entrer en contact avec le diluant, le milieu
de culture et l’échantillon, sauf s’il est livré stérile (particulière-
mesures du pH doivent être effectuées au moyen d’un ment le matériel en matière plastique), doit être stérilisé par
Les
,mètre à compensation de température (6.4). l’une des méthodes suivantes :
PH-
Si le diluant et le milieu ne sont pas utilisés extemporanément, a) au four (6.1), en le maintenant à une température de
ils doivent, sauf spécifications contraires, être conservés à 170 à 175 OC pendant au moins 1 h;
l’obscurité entre 0 et 5 OC pendant 1 mois au maximum, dans
des conditions évitant toute modification de leur composition. b) à l’autoclave (6.1), en le maintenant à une température
de 121 + 1 OC pendant au moins 20 min.
-
5.2 Diluant
6.2 Étuve, réglable à 25 + 1 OC,
-
I’ISO 6887 et à la Norme internationale spécifique
Se reporter à
du produit à examiner. 6.3 Bain d’eau, réglable à 45 + 1 OC.
-
I
6.4 pH-mètre à compensation de température, ayant
5.3 Gel ose à l’extra it de levure au dextrose
une précision de réglage de k 0,l unité de pH à 25 OC.
chl oram phénicol
6.5 Tubes de culture
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.