Microbiology of food, animal feed and water — Preparation, production, storage and performance testing of culture media

ISO 11133:2014 defines terms related to quality assurance of culture media and specifies the requirements for the preparation of culture media intended for the microbiological analysis of food, animal feed, and samples from the food or feed production environment as well as all kinds of water intended for consumption or used in food production. These requirements are applicable to all categories of culture media prepared for use in laboratories performing microbiological analyses. ISO 11133:2014 also sets criteria and describes methods for the performance testing of culture media. It applies to producers such as: commercial bodies producing and/or distributing ready-to-use or semi-finished reconstituted or dehydrated media; non-commercial bodies supplying media to third parties; microbiological laboratories preparing culture media for their own use.

Microbiologie des aliments, des aliments pour animaux et de l'eau — Préparation, production, stockage et essais de performance des milieux de culture

L'ISO 11133:2014 définit les termes relatifs à l'assurance qualité des milieux de culture et spécifie les exigences relatives à la préparation des milieux de culture destinés à être appliqués pour l'analyse microbiologique des aliments, des aliments pour animaux et des d'échantillons de la production d'aliments et d'aliments pour animaux ainsi que de tous les types d'eau destinés à la consommation ou utilisés dans la production alimentaire. Ces exigences sont applicables à toutes catégories de milieux de culture préparés pour être utilisés dans les laboratoires qui réalisent des analyses microbiologiques. L'ISO 11133:2014 définit également des critères et décrit des méthodes pour les essais de performance des milieux de culture. Elle s'applique aux producteurs tels que: les entités commerciales qui produisent et/ou distribuent des milieux prêts à l'emploi, semi-finis reconstitués ou déshydratés; les entités non commerciales qui fournissent des milieux à des tiers; les laboratoires de microbiologie qui préparent des milieux de culture pour leur propre usage.

General Information

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Published
Publication Date
13-May-2014
Current Stage
9092 - International Standard to be revised
Completion Date
08-Jul-2022
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ISO 11133:2014 - Microbiology of food, animal feed and water -- Preparation, production, storage and performance testing of culture media
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ISO 11133:2014 - Microbiology of food, animal feed and water -- Preparation, production, storage and performance testing of culture media
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Standards Content (sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 11133
First edition
2014-05-15
Corrected version
2014-11-01
Microbiology of food, animal feed and
water — Preparation, production,
storage and performance testing of
culture media
Microbiologie des aliments, des aliments pour animaux et de l’eau —
Préparation, production, stockage et essais de performance des
milieux de culture
Reference number
ISO 11133:2014(E)
ISO 2014
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 11133:2014(E)
COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
© ISO 2014

All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized otherwise in any form

or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on the internet or an intranet, without prior

written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below or ISO’s member body in the country of

the requester.
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Fax + 41 22 749 09 47
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Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2014 – All rights reserved
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 11133:2014(E)
Contents Page

Foreword ..........................................................................................................................................................................................................................................v

Introduction ..............................................................................................................................................................................................................................vii

1 Scope ................................................................................................................................................................................................................................. 1

2 Normative references ...................................................................................................................................................................................... 1

3 Terms and definitions ..................................................................................................................................................................................... 2

3.1 General terms and definitions ................................................................................................................................................... 2

3.2 Terminology of performance testing ................................................................................................................................... 2

3.3 Terminology of culture media .................................................................................................................................................... 3

3.4 Terminology for test microorganisms ................................................................................................................................ 6

4 Quality assurance management ........................................................................................................................................................... 7

4.1 Documentation ....................................................................................................................................................................................... 7

4.2 Storage ........................................................................................................................................................................................................... 8

4.3 Laboratory preparation of media ........................................................................................................................................... 8

4.4 Storage and shelf-life of prepared media ......................................................................................................................11

4.5 Preparation for use ...........................................................................................................................................................................12

4.6 Incubation of solid media in Petri dishes ......................................................................................................................14

4.7 Disposal of media ...............................................................................................................................................................................14

5 Test organisms for performance testing...................................................................................................................................14

5.1 General ........................................................................................................................................................................................................14

5.2 Selection of test organisms ........................................................................................................................................................14

5.3 Preservation and maintenance of test organisms .................................................................................................15

5.4 Microorganisms for performance testing .....................................................................................................................16

6 Quality control and performance testing of culture media ..................................................................................19

6.1 General requirements ....................................................................................................................................................................19

6.2 Physical and chemical quality control .............................................................................................................................19

6.3 Microbiological quality control ..............................................................................................................................................19

6.4 General requirements for microbiological performance testing ..............................................................20

6.5 Performance evaluation and interpretation of results ......................................................................................21

6.6 Confirmation media and reagents .......................................................................................................................................22

7 Methods for performance testing of solid culture media .......................................................................................22

7.1 General ........................................................................................................................................................................................................22

7.2 Methods for quantitative tests................................................................................................................................................22

7.3 Testing of culture media used for membrane filtration ....................................................................................24

7.4 Methods for qualitative tests ...................................................................................................................................................24

8 Methods for performance testing of liquid culture media.....................................................................................25

8.1 General ........................................................................................................................................................................................................25

8.2 Quantitative tube method for performance testing of liquid enrichment media (dilution to

extinction method) ...........................................................................................................................................................................25

8.3 Qualitative tube method for performance testing of selective liquid media ..................................26

8.4 Qualitative single tube method (turbidity) for performance testing of liquid media .............27

9 Methods for performance testing of diluents and transport media ............................................................28

9.1 General ........................................................................................................................................................................................................28

9.2 Method for testing diluents .......................................................................................................................................................28

9.3 Method for testing transport media ..................................................................................................................................29

10 Documentation of test results .............................................................................................................................................................30

10.1 Information provided by the manufacturer ................................................................................................................30

10.2 Traceability .............................................................................................................................................................................................30

Annex A (informative) Designation of the components of culture media in International Standards

on microbiological analysis of food, animal feed and water ................................................................................31

© ISO 2014 – All rights reserved iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 11133:2014(E)

Annex B (normative) Preparation of reference stock and working culture .............................................................33

Annex C (normative) Flow charts of methods for performance testing .......................................................................38

Annex D (informative) Example of card for recording test results of culture media ......................................42

Annex E (normative) Test microorganisms and performance criteria for culture media commonly

used in food microbiology .......................................................................................................................................................................44

Annex F (normative) Test microorganisms and performance criteria for culture media commonly

used in water microbiology....................................................................................................................................................................66

Annex G (normative) Use of control charts to monitor quantitative testing of solid

culture media ........................................................................................................................................................................................................78

Annex H (informative) Quality assurance of culture media — Troubleshooting ................................................85

Annex I (informative) Quantitative testing of liquid media .......................................................................................................87

Annex J (normative) Definition of microbiological performance tests for standardized

culture media ........................................................................................................................................................................................................91

Bibliography .............................................................................................................................................................................................................................95

iv © ISO 2014 – All rights reserved
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 11133:2014(E)
Foreword

ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards

bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out

through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical

committee has been established has the right to be represented on that committee. International

organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.

ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of

electrotechnical standardization.

The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are

described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the

different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the

editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2. www.iso.org/directives

Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of

patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of

any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or

on the ISO list of patent declarations received. www.iso.org/patents

Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not

constitute an endorsement.

For an explanation on the meaning of ISO specific terms and expressions related to conformity

assessment, as well as information about ISO’s adherence to the WTO principles in the Technical Barriers

to Trade (TBT) see the following URL: Foreword - Supplementary information

The committee responsible for this document is ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9,

Microbiology, in collaboration with Technical Committee ISO/TC 147 Water quality, Subcommittee SC 4,

Microbiological methods.

This first edition of ISO 11133 replaces the second edition of ISO/TS 11133-1 (ISO/TS 11133-1:2009)

and the first edition of ISO/TS 11133-2:2003, which have been technically revised. It also incorporates

the Amendment ISO/TS 11133-2:2003/Amd.1:2011. In particular, it also includes requirements for

microbiology media for water testing. It supersedes ISO 9998:1991.
This corrected version of ISO 11133:2014 incorporates the following corrections:
— In Annex E
Selective media for enumeration of microorganisms
— DG18 column Incubation: d was replaced with days;
— EC column control strain: £ was deleted after Pseudomonas;
d b

— mCCDA: was deleted after both species of Campylobacter; was added after 000156;

— mCCDA: the criteria “Total or partial inhibition (0-1)” was added to the control stain E. coli

and “Total inhibition (0)” was added to S. aureus;

— TSC: the row with Pseudomonas aeruginosa and the WDCM number 00025 was deleted.

Selective enrichment media

— Bolton productivity: the cocktails of control strains were split into 2 separate cells;

d i
— EE: was added before , after both stains of Salmonella;
— ITC: a new cocktail of strains was introduced for Productivity;
— PBS selectivity: was added after 00025;
© ISO 2014 – All rights reserved v
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ISO 11133:2014(E)
— RVS Productivity: added to E. coli.
Non-selective liquid media
d b

— mCCDA: was deleted after both species of Campylobacter; was added after 000156;

— mCCDA column Characteristic reactions: “colonies” was added after “moist”;
— PEMBA lane productivity: was deleted after “good growth (2)”;
— Media TCBS was added after TBX;

— VRBG: one Salmonella Typhimurium was replaced by Salmonella Enteritidis WDCM 00030

d,i
and was added to both Salmonella;
Non-selective isolation media
— Nutrient agar: the WDCM numbers were inverted between S. Typhimurium and S.
Enteritidis;
— TSYEA: name and WDCM were corrected to Listeria monocytogenes 4b WDCM 00021 ;
Multipurpose media

— Pre-enrichment for Enterobacteriaceae: added to both Salmonella and deleted “or”

between the 2 WDCM numbers.
Reference media for enumeration of microorganisms
— TSA: deleted “Escherichia coli O157:H7 WDCM 00014 (non-toxigenic)”;
— SDA: added WDCM number 00053 to Aspergillus;
— In Annex F

Selective media for enumeration of microorganisms by comparing with a non-selective reference

medium

— Colilert was replaced by Colilert-18 and the WDCM number 00207 was replaced by 00024.

Selective media for enumeration of microorganisms by comparing with a previously accepted

batch (for use in special cases)

— Colilert was replaced by Colilert-18 and the WDCM number 00207 was replaced by 00024;

— Lactose TTC: a line was added between Enterococcus faecalis and Pseudomonas aeruginosa

and the WDCM number corresponding.
Selective enrichment media

— Bolton/Preston Productivity: cocktails of control strains were split in 2 separate cells;

Non-selective liquid media
— “Saline salt” was replaced by “Saline solution”, and a was added after 00034;
d b

— mCCDA: was deleted after both species of Campylobacter; was added after 000156.

vi © ISO 2014 – All rights reserved
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 11133:2014(E)
Introduction

In laboratories carrying out microbiological examinations, the main objectives are to maintain,

resuscitate, grow, detect and/or enumerate a wide variety of microorganisms. Culture media are used

in all traditional microbiological culture techniques and also for many alternative techniques. Many

formulae of culture media are commercially available and many more, designed for specific growth

purposes, are described in the literature.

Many tests and procedures depend upon culture media being capable of providing consistent and

reproducible results. The requirements for media may be specific to both the sample and the organisms

to be detected. Culture media meeting established performance criteria are therefore a pre-requisite for

any reliable microbiological work. Sufficient testing should be carried out to demonstrate

a) the acceptability of each batch of medium,
b) that the medium is “fit for purpose”, and
c) that the medium can produce consistent results.

These three criteria are an essential part of internal quality control procedures and, with appropriate

documentation, will permit effective monitoring of culture media and contribute to the production of

both accurate and reliable data. For reliable microbiological analysis it is essential to use culture media

of proven quality. For all media described in standard methods it is essential to define the minimum

acceptance criteria required to ensure their reliability. It is recommended that in the determination

of the performance characteristics of a culture medium tests are carried out that conform with this

International Standard.

The establishment of widely accepted minimum performance criteria for media should lead to products

with more consistent quality and thus reduce the extent of testing necessary in the user’s laboratory.

In addition the acceptance criteria measured by the methods defined in this International Standard

can be used by all microbiological laboratories to evaluate the productive, selective and/or elective

properties of a culture medium.

In the microbiological analysis of food, animal feed and water, the requirements of this International

Standard have precedence in the assessment of culture media quality.
© ISO 2014 – All rights reserved vii
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 11133:2014(E)
Microbiology of food, animal feed and water —
Preparation, production, storage and performance testing
of culture media
1 Scope

This International Standard defines terms related to quality assurance of culture media and specifies

the requirements for the preparation of culture media intended for the microbiological analysis of food,

animal feed, and samples from the food or feed production environment as well as all kinds of water

intended for consumption or used in food production.

These requirements are applicable to all categories of culture media prepared for use in laboratories

performing microbiological analyses.

This International Standard also sets criteria and describes methods for the performance testing of

culture media. This International Standard applies to producers such as:

— commercial bodies producing and/or distributing ready-to-use or semi-finished reconstituted or

dehydrated media;
— non-commercial bodies supplying media to third parties;
— microbiological laboratories preparing culture media for their own use.
2 Normative references

The following documents, in whole or in part, are normatively referenced in this document and are

indispensable for its application. For dated references, only the edition cited applies. For undated

references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.

ISO 6887-1, Microbiology of food and animal feed — Preparation of test samples, initial suspension and

decimal dilutions for microbiological examination — Part 1: General rules for the preparation of the initial

suspension and decimal dilutions

ISO 6887-2, Microbiology of food and animal feed — Preparation of test samples, initial suspension and

decimal dilutions for microbiological examination — Part 2: Specific rules for the preparation of meat and

meat products

ISO 6887-3, Microbiology of food and animal feed — Preparation of test samples, initial suspension and

decimal dilutions for microbiological examination — Part 3: Specific rules for the preparation of fish and

fishery products

ISO 6887-4, Microbiology of food and animal feed — Preparation of test samples, initial suspension

and decimal dilutions for microbiological examination — Part 4: Specific rules for the preparation of

miscellaneous products

ISO 6887-5, Microbiology of food and animal feeding stuffs — Preparation of test samples, initial suspension

and decimal dilutions for microbiological examination — Part 5: Specific rules for the preparation of milk

and milk products

ISO 6887-6, Microbiology of food and animal feed — Preparation of test samples, initial suspension and

decimal dilutions for microbiological examination — Part 6: Specific rules for the preparation of samples

taken at the primary production stage

ISO 7704, Water quality — Evaluation of membrane filters used for microbiological analyses

© ISO 2014 – All rights reserved 1
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ISO 11133:2014(E)

ISO 7218, Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements and guidance for

microbiological examinations

ISO 8199, Water quality — General guidance on the enumeration of micro-organisms by culture

3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.

NOTE 1 This clause gives the general definitions relating to quality assurance of culture media and provides

terminology relating to performance testing, culture media and test microorganisms.

NOTE 2 Tables E.2 and F.2 give explanations of media name abbreviated terms.
3.1 General terms and definitions
3.1.1
quality control
part of quality management focused on fulfilling quality requirements
Note 1 to entry: See Reference [1].
3.1.2
batch of culture medium
lot of culture medium

homogeneous and fully traceable unit of a medium referring to a defined amount of bulk, semi-finished

product or end product, which is consistent in type and quality and which has been produced within one

defined production period, having been assigned the same batch (or lot) number
3.1.3
chromogenic substrate
fluorogenic substrate

substrate containing a chromophore/fluorophore group and a substrate utilizable by bacteria or fungi

Note 1 to entry: After splitting the chromogenic/fluorogenic substrate, the chromophore/fluorophore is released

and a coloured/fluorescent end product becomes visible/can be detected using an ultraviolet (UV) lamp.

3.2 Terminology of performance testing
3.2.1
performance of culture medium

response of a culture medium to challenge by test organisms under defined conditions

3.2.2
target microorganism
microorganism or group of microorganisms to be detected or enumerated
3.2.3
non-target microorganism

microorganism that is suppressed by the medium and/or conditions of incubation or does not show

expected characteristics of the target microorganism
3.2.4
productivity of culture medium

level of recovery of a target microorganism from the culture medium under defined conditions

3.2.5
selectivity of culture medium

degree of inhibition of a non-target microorganism on or in a selective culture medium under defined

conditions
2 © ISO 2014 – All rights reserved
---------------------- Page: 9 ----------------------
ISO 11133:2014(E)
3.2.6
electivity of culture medium
specificity of culture medium

demonstration, under defined conditions, that non-target microorganisms do not show the same visual

characteristics as target microorganisms
3.3 Terminology of culture media
3.3.1
culture medium

formulation of substances, in liquid, semi-solid or solid form, which contain natural and/or

synthetic constituents intended to support the multiplication, (with or without inhibition of certain

microorganisms), identification or preservation of viability of microorganisms

Note 1 to entry: When used in connection with compound words, this term is often shortened to read “medium”

(e.g. enrichment medium).
3.3.2 Culture media classified by composition
3.3.2.1
chemically defined medium

culture medium consisting only of chemically defined constituents of known molecular structure and

degree of purity
3.3.2.2
chemically undefined or partially undefined medium

culture medium consisting entirely or partly of natural materials, processed or otherwise, the chemical

composition of which is not completely defined

Note 1 to entry: Harmonized designations for various chemically undefined components used in culture media

are specified in Annex A.
3.3.2.3
chromogenic culture medium
fluorogenic culture medium
culture medium containing one or more chromogenic/fluorogenic substrates

Note 1 to entry: Chromogenic culture media facilitate the identification of bacteria or fungi by means of

defined colour and morphological characteristics (culture medium typical growth). Fluorogenic media require

visualization using a UV lamp. The biochemical reaction products, which are necessary for the efficiency of

chromogenic/fluorogenic culture media, are normally the result of the enzymatic activity of certain organisms,

which in turn depends greatly on the precise maintenance of specific conditions (e.g. temperature, pH value,

concentrations of substrate).
3.3.3 Culture media classified by physical consistency
3.3.3.1
liquid medium

culture medium consisting of an aqueous solution of one or more constituents, such as peptone water

and nutrient broth

Note 1 to entry: In some cases, solid particles are added to the liquid culture medium, such as cooked meat medium.

Note 2 to entry: Liquid media in tubes, flasks or bottles are commonly called “broths”.

3.3.3.2
solid medium
semi-solid medium

liquid medium containing solidifying substances (e.g. agar-agar, gelatin) in different concentrations

Note 1 to entry: Due to the worldwide use of media solidified with agar-agar, the shortened term “agar” is often

used synonymously for solid media and therefore in connection with nouns, e.g. “Plate Count agar”.

© ISO 2014 – All rights reserved 3
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ISO 11133:2014(E)

Note 2 to entry: Solid media poured into Petri dishes are commonly called “plates”. Solid media poured into tubes

or small bottles that are kept in slanted positions while the media are solidifying are often called “slants” or

“slopes”. If the medium is dispensed to fill the bottom of the container, this forms a “butt”.

3.3.4 Culture media classified according to their use
3.3.4.1
transport medium

medium designed to preserve and maintain the viability of microorganisms whilst minimising numerical

change in the time period between sample collection and laboratory processing of the sample

EXAMPLE Stuart or Amies transport medium
3.3.4.2
preservation medium

medium designed to preserve and maintain the viability of microorganisms over an extended period,

to protect them against the adverse influences which may occur during long-term storage and to allow

recovery after this period
EXAMPLE Dorset egg medium, nutrient agar slopes
3.3.4.3
diluent medium
suspension medium

medium designed to separate microorganisms from a solid test product into a liquid phase and/or to

reduce their concentration by dilution without multiplication or inhibition during the time of contact

EXAMPLE Peptone salt solution
3.3.4.4
resuscitation medium

medium enabling stressed and damaged microorganisms to repair and recover their capacity for normal

growth without necessarily promoting their multiplication
EXAMPLE Buffered peptone water

Note 1 to entry: A resuscitation medium may also be used as a pre-enrichment medium, e.g. buffered peptone

water.
3.3.4.5
pre-enrichment medium
enrichment medium

generally liquid medium which, due to its composition, provides particularly favourable conditions for

multiplication of microorganisms
EXAMPLE Tryptone soya broth
3.3.4.5.1
selective enrichment medium

enrichment medium that allows the multiplication of specific microorganisms whilst partially or totally

inhibiting the growth of other microorganisms
EXAMPLE Rappaport-Vassiliadis soya pepton
...

DRAFT INTERNATIONAL STANDARD ISO/DIS 11133
ISO/TC 34/SC 9 Secretariat: AFNOR
Voting begins on Voting terminates on
2012-08-02 2013-01-02

INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION  МЕЖДУНАРОДНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ  ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION

Microbiology of food, animal feed and water — Preparation,
production, storage and performance testing of culture media

Microbiologie des aliments et de l'eau — Préparation, production, stockage et essais de performance des

milieux de culture

[Revision of second edition (ISO 11133-1:2009), first edition of ISO 11133-2-2003 and

ISO 11133-2:2003/Amd.1:2011]
ICS 07.100.30
ISO/CEN PARALLEL PROCESSING

This draft has been developed within the International Organization for Standardization (ISO), and

processed under the ISO-lead mode of collaboration as defined in the Vienna Agreement.

This draft is hereby submitted to the ISO member bodies and to the CEN member bodies for a parallel

five-month enquiry.

Should this draft be accepted, a final draft, established on the basis of comments received, will be

submitted to a parallel two-month approval vote in ISO and formal vote in CEN.

To expedite distribution, this document is circulated as received from the committee

secretariat. ISO Central Secretariat work of editing and text composition will be undertaken at

publication stage.

Pour accélérer la distribution, le présent document est distribué tel qu'il est parvenu du

secrétariat du comité. Le travail de rédaction et de composition de texte sera effectué au

Secrétariat central de l'ISO au stade de publication.

THIS DOCUMENT IS A DRAFT CIRCULATED FOR COMMENT AND APPROVAL. IT IS THEREFORE SUBJECT TO CHANGE AND MAY NOT BE

REFERRED TO AS AN INTERNATIONAL STANDARD UNTIL PUBLISHED AS SUCH.

IN ADDITION TO THEIR EVALUATION AS BEING ACCEPTABLE FOR INDUSTRIAL, TECHNOLOGICAL, COMMERCIAL AND USER PURPOSES,

DRAFT INTERNATIONAL STANDARDS MAY ON OCCASION HAVE TO BE CONSIDERED IN THE LIGHT OF THEIR POTENTIAL TO BECOME

STANDARDS TO WHICH REFERENCE MAY BE MADE IN NATIONAL REGULATIONS.

RECIPIENTS OF THIS DRAFT ARE INVITED TO SUBMIT, WITH THEIR COMMENTS, NOTIFICATION OF ANY RELEVANT PATENT RIGHTS OF WHICH

THEY ARE AWARE AND TO PROVIDE SUPPORTING DOCUMENTATION.
© International Organization for Standardization, 2012
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ISO/DIS 11133
Copyright notice

This ISO document is a Draft International Standard and is copyright-protected by ISO. Except as permitted

under the applicable laws of the user’s country, neither this ISO draft nor any extract from it may be

reproduced, stored in a retrieval system or transmitted in any form or by any means, electronic,

photocopying, recording or otherwise, without prior written permission being secured.

Requests for permission to reproduce should be addressed to either ISO at the address below or ISO’s

member body in the country of the requester.
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ii © ISO 2012 – All rights reserved
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ISO/DIS 11133
Contents Page

Foreword ............................................................................................................................................................ vi

Introduction ....................................................................................................................................................... vii

1 Scope ...................................................................................................................................................... 1

2 Normative references ............................................................................................................................ 1

3 General terms and definitions .............................................................................................................. 4

3.1 Introduction ............................................................................................................................................ 4

3.2 General terminology .............................................................................................................................. 4

3.3 Terminology of performance testing ................................................................................................... 5

3.4 Terminology of culture media .............................................................................................................. 5

3.5 Terminology for test microorganisms ................................................................................................. 9

4 Quality assurance management ........................................................................................................ 10

4.1 Documentation .................................................................................................................................... 10

4.1.1 Documentation from manufacturer or producer .............................................................................. 10

4.1.2 Delivery acceptance of products ....................................................................................................... 10

4.2 Storage ................................................................................................................................................. 11

4.2.1 General ................................................................................................................................................. 11

4.2.2 Quality management and product control of dehydrated media and supplements ..................... 11

4.3 Laboratory preparation of media ....................................................................................................... 11

4.3.1 General ................................................................................................................................................. 11

4.3.2 Quality of basic medium components .............................................................................................. 11

4.3.3 Water ..................................................................................................................................................... 12

4.3.4 Weighing and rehydration .................................................................................................................. 12

4.3.5 Dissolution and dispersion ................................................................................................................ 12

4.3.6 Measurement and adjustment of pH ................................................................................................. 13

4.3.7 Dispensing ........................................................................................................................................... 13

4.3.8 Sterilization .......................................................................................................................................... 13

4.4 Storage and shelf life of prepared media .......................................................................................... 14

4.4.1 Commercially supplied ready-to-use media ..................................................................................... 14

4.4.2 Laboratory prepared media ................................................................................................................ 14

4.4.3 Storage of media in Petri dishes ........................................................................................................ 15

4.5 Preparation for use .............................................................................................................................. 15

4.5.1 Melting of agar culture media ............................................................................................................ 15

4.5.2 De-aeration of culture media .............................................................................................................. 15

4.5.3 Addition of supplements .................................................................................................................... 15

4.5.4 Preparation of solid media in Petri dishes ........................................................................................ 15

4.5.5 Incubation of solid media in Petri dishes ......................................................................................... 16

4.6 Disposal of media ................................................................................................................................ 16

5 Test organisms for performance testing .......................................................................................... 16

5.1 Selection of test organisms ............................................................................................................... 16

5.2 Preservation and maintenance of test organisms ........................................................................... 17

5.2.1 General ................................................................................................................................................. 17

5.2.2 Test organisms from commercial sources ....................................................................................... 17

5.2.3 Laboratory prepared reference stocks .............................................................................................. 17

5.2.4 Stock cultures ...................................................................................................................................... 17

5.2.5 Working cultures ................................................................................................................................. 17

5.3 Test microorganisms for routine performance testing ................................................................... 18

5.3.1 General ................................................................................................................................................. 18

5.3.2 Preparation ........................................................................................................................................... 18

6 Performance testing of finished culture media ................................................................................ 20

© ISO 2012 – All rights reserved iii
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ISO/DIS 11133

6.1 General requirements ..........................................................................................................................20

6.1.1 General quality criteria ........................................................................................................................20

6.2 Physical and chemical quality control ..............................................................................................21

6.3 Microbiological quality control ...........................................................................................................21

6.3.1 General ..................................................................................................................................................21

6.3.2 Reference medium ...............................................................................................................................21

6.3.3 Microbial contamination .....................................................................................................................22

6.4 General requirements for microbiological performance testing ....................................................22

6.4.1 General ..................................................................................................................................................22

6.4.2 Ready-to-use media .............................................................................................................................22

6.4.3 Media prepared from commercially available dehydrated formulations .......................................23

6.4.4 Media prepared from basic individual components .........................................................................23

6.5 Performance evaluation and interpretation of results .....................................................................23

6.6 Confirmation media and reagents ......................................................................................................23

6.6.1 Confirmation media .............................................................................................................................23

6.6.2 Confirmation reagents ........................................................................................................................23

7 Methods for performance testing of solid culture media ................................................................23

7.1 General ..................................................................................................................................................23

7.2 Methods for quantitative tests ............................................................................................................24

7.2.1 Definitions ............................................................................................................................................24

7.2.2 Quantitative method for solid culture media ....................................................................................24

7.3 Testing of culture media used for membrane filtration ...................................................................26

7.4 Methods for qualitative tests ..............................................................................................................26

7.4.1 Qualitative streaking method .............................................................................................................26

7.4.2 Determination of specificity ................................................................................................................27

7.4.3 Other qualitative methods for solid media ........................................................................................27

8 Methods for performance testing of liquid culture media ...............................................................27

8.1 General ..................................................................................................................................................27

8.2 Quantitative tube method for performance testing of liquid enrichment media (dilution to

extinction method) ...............................................................................................................................27

8.2.1 General ..................................................................................................................................................27

8.2.2 Preparation of the dilution series .......................................................................................................27

8.2.3 Procedure for the target organism .....................................................................................................28

8.2.4 Calculation and interpretation of results ..........................................................................................28

8.3 Qualitative tube method for performance testing of selective liquid media .................................28

8.3.1 General ..................................................................................................................................................28

8.3.2 Procedure .............................................................................................................................................28

8.3.3 Calculation and interpretation of results ..........................................................................................29

8.4 Qualitative single tube method (turbidity) for performance testing of liquid media ....................29

8.4.1 General ..................................................................................................................................................29

8.4.2 Procedure .............................................................................................................................................29

8.4.3 Interpretation of results ......................................................................................................................30

9 Methods for performance testing of diluents and transport media ...............................................30

9.1 General ..................................................................................................................................................30

9.2 Method for testing diluents .................................................................................................................30

9.2.1 Method for quantitative testing of diluents .......................................................................................30

9.3 Method for testing transport media ...................................................................................................31

9.3.1 General ..................................................................................................................................................31

9.3.2 Method for quantitative testing of liquid transport media ...............................................................31

9.3.3 Method for qualitative testing of solid transport media ..................................................................31

10 Documentation of test results ............................................................................................................32

10.1 Information provided by the manufacturer .......................................................................................32

10.2 Traceability ...........................................................................................................................................32

Annex A (informative) Designation of the components of the culture media in standards on

microbiological analysis of food, animal feed and water ................................................................33

A.1 General ..................................................................................................................................................33

iv © ISO 2012 – All rights reserved
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO/DIS 11133

A.2 Peptones .............................................................................................................................................. 33

A.3 Extracts ................................................................................................................................................ 33

A.4 Agar ....................................................................................................................................................... 33

A.5 Other ..................................................................................................................................................... 34

Annex B (normative) Preparation of reference stock and working culture ................................................ 35

B.1 Preparation of reference stock from a reference strain .................................................................. 35

B.1 Preparation of working culture from reference stock ..................................................................... 36

Annex C (normative) Flow charts of methods for performance testing (7) ................................................ 37

C.1 Quantitative method for solid culture media: Productivity and Selectivity (7.2.2) ....................... 37

C.2 Quantitative tube method for performance testing of liquid enrichment media - dilution to

extinction method (8.2) ....................................................................................................................... 38

C.3 Qualitative single tube method for selective enrichment media (with target, non-target, or

a mixture of target and non-target microorganisms in the same tube) (8.3) ................................ 39

C.4 Qualitative single tube method for non-selective and selective liquid media: turbidity (8.4) ..... 40

Annex D (informative) Example of card for recording test results of culture media prepared by the

user laboratory .................................................................................................................................... 41

Annex E (normative) Test microorganisms for culture media commonly used in food
microbiology (giving information on the culture medium, culture conditions, test
microorganisms, culture collection number of test organisms and the expected

reactions) ............................................................................................................................................. 42

Annex F (normative) Test microorganisms for culture media commonly used in water

microbiology ........................................................................................................................................ 64

Annex G (normative) Use of control charts to monitor quantitative testing of solid culture media ........ 78

G.1 Using control charts ............................................................................................................................ 78

G.1.1 General validation procedure ............................................................................................................. 78

G.1.2 Production of a control chart ............................................................................................................. 78

G.1.3 Performance evaluation and interpretation of results ..................................................................... 81

Annex H (informative) Quality assurance of culture media – Troubleshooting ......................................... 82

Annex I (informative) Quantitative testing of liquid media ........................................................................... 83

I.1 General ................................................................................................................................................. 83

I.2 Method for quantitative testing of non-selective liquid culture media using target

microorganisms ................................................................................................................................... 83

I.2.1 Procedure ............................................................................................................................................. 83

I.2.2 Counting and interpretation of results .............................................................................................. 83

I.2.3 Flow chart for quantitative method for non-selective liquid culture media using target

microorganisms ................................................................................................................................... 84

I.3 Method for quantitative testing of selective liquid culture media using target and non

target microorganisms ........................................................................................................................ 84

I.3.1 Procedure ............................................................................................................................................. 84

I.3.2 Reading, calculation and interpretation of results .......................................................................... 85

I.3.3 Flow chart for quantitative method for selective liquid culture media using target and

non-target microorganisms ................................................................................................................ 86

Annex J (normative) Definition of microbiological performance tests for standardized culture

media .................................................................................................................................................... 87

J.1 General ................................................................................................................................................. 87

J.2 Performance criteria, methods and targets ...................................................................................... 87

J.3 Choice of performance control strains ............................................................................................. 89

J.3.1 General ................................................................................................................................................. 89

J.3.2 Assessment of suitability of new control strains ............................................................................ 89

J.3.3 New media ............................................................................................................................................ 89

J.3.4 Number of strains per criterion .......................................................................................................... 90

Bibliography ...................................................................................................................................................... 91

© ISO 2012 – All rights reserved v
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO/DIS 11133
Foreword

ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies

(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO

technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been

established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and

non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the

International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.

International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.

The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards

adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an

International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.

Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent

rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.

ISO 11133 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9, Food

products, in collaboration with Technical Committee ISO/TC 147 Water quality, Subcommittee SC 4,

Microbiological methods, and by Technical Committee CEN/TC 275, Food analysis - Horizontal methods.

Annexes A, D, H and I are informative. Annexes B, C E, F, G and J are normative.

This document combines the previously published two parts of ISO/TS 11133 and also includes requirements

for microbiology media for water testing.
This document includes a Bibliography.
vi © ISO 2012 – All rights reserved
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ISO/DIS 11133
Introduction

In laboratories carrying out microbiological examinations, the main objectives are to maintain, resuscitate,

grow, detect and/or enumerate a wide variety of microorganisms. Culture media are used in all traditional

microbiological culture techniques and also for many alternative techniques. Many formulae of culture media

are commercially available and many more, designed for specific growth purposes, are described in the

literature.

Many tests and procedures depend upon culture media being capable of providing consistent and

reproducible results. The requirements for media may be specific to both the sample and the organisms to be

detected. Culture media meeting established performance criteria are therefore a pre-requisite for any reliable

microbiological work. Sufficient testing should be carried out to demonstrate
I) the acceptability of each batch of medium ;
II) that the medium is ‘fit for purpose’ and
III) that the medium can produce consistent results.

These three criteria are an essential part of internal quality control procedures and, with appropriate

documentation, will permit effective monitoring of culture media and contribute to the production of both

accurate and reliable data. For reliable microbiological analysis it is essential to use culture media of proven

quality. For all media described in standard methods it is essential to define the minimum acceptance criteria

required to assure their reliability. It is recommended that in the determination of the performance

characteristics of a culture medium tests are carried out that conform with this International Standard.

The establishment of widely accepted minimum performance criteria for media should lead to products with

more consistent quality and thus reduce the extent of testing necessary in the user’s laboratory.

In addition the acceptance criteria measured by the methods defined in this International Standard can be

used by all microbiological laboratories to evaluate the productive, selective and/or elective properties of a

culture medium.
In the microbiological analysis of
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 11133
Première édition
2014-05-15
Version corrigée
2014-11-01
Microbiologie des aliments, des
aliments pour animaux et de l’eau —
Préparation, production, stockage et
essais de performance des milieux de
culture
Microbiology of food, animal feed and water — Preparation,
production, storage and performance testing of culture media
Numéro de référence
ISO 11133:2014(F)
ISO 2014
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ISO 11133:2014(F)
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2014

Droits de reproduction réservés. Sauf indication contraire, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée

sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie, l’affichage sur

l’internet ou sur un Intranet, sans autorisation écrite préalable. Les demandes d’autorisation peuvent être adressées à l’ISO à

l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
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Publié en Suisse
ii © ISO 2014 – Tous droits réservés
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ISO 11133:2014(F)
Sommaire Page

Avant-propos ................................................................................................................................................................................................................................v

Introduction ............................................................................................................................................................................................................................viii

1 Domaine d’application ................................................................................................................................................................................... 1

2 Références normatives ................................................................................................................................................................................... 1

3 Termes et définitions ....................................................................................................................................................................................... 2

3.1 Termes généraux et définitions ................................................................................................................................................ 2

3.2 Terminologie relative aux essais de performance .................................................................................................... 2

3.3 Terminologie relative aux milieux de culture ............................................................................................................... 3

3.4 Terminologie relative aux micro-organismes test .................................................................................................... 7

4 Gestion de l’assurance qualité ................................................................................................................................................................ 8

4.1 Documentation ....................................................................................................................................................................................... 8

4.2 Stockage ........................................................................................................................................................................................................ 9

4.3 Préparation des milieux en laboratoire ............................................................................................................................. 9

4.4 Stockage et durée de conservation des milieux préparés ...............................................................................12

4.5 Préparation avant utilisation ...................................................................................................................................................13

4.6 Incubation des milieux solides en boîtes de Petri .................................................................................................15

4.7 Mise au rebut des milieux ...........................................................................................................................................................15

5 Souches test pour essais de performance ...............................................................................................................................15

5.1 Généralités ...............................................................................................................................................................................................15

5.2 Sélection des souches test ..........................................................................................................................................................15

5.3 Conservation et entretien des souches test ................................................................................................................16

5.4 Micro-organismes pour essais de performance ......................................................................................................17

6 Contrôle qualité et essais de performance des milieux de culture ...............................................................20

6.1 Exigences générales .........................................................................................................................................................................20

6.2 Contrôle de la qualité physique et chimique ..............................................................................................................20

6.3 Contrôle de la qualité microbiologique ..........................................................................................................................20

6.4 Exigences générales relatives aux essais de performance microbiologique ..................................21

6.5 Évaluation de performance et interprétation des résultats ..........................................................................23

6.6 Milieux et réactifs de confirmation.....................................................................................................................................23

7 Méthodes pour les essais de performance des milieux de culture solides...........................................23

7.1 Généralités ...............................................................................................................................................................................................23

7.2 Méthodes pour les essais quantitatifs ..............................................................................................................................23

7.3 Essais des milieux de culture utilisés pour la filtration sur membrane .............................................26

7.4 Méthodes pour essais qualitatifs ..........................................................................................................................................26

8 Méthodes pour les essais de performance des milieux de culture liquides ........................................27

8.1 Généralités ...............................................................................................................................................................................................27

8.2 Méthode quantitative en tubes pour les essais de performance des milieux

d’enrichissement liquides (méthode de dilution jusqu’à extinction) ...................................................27

8.3 Méthode qualitative en tubes pour les essais de performance des milieux

liquides sélectifs..................................................................................................................................................................................28

8.4 Méthode qualitative dans un seul tube (turbidité) pour les essais de performance des

milieux liquides ...................................................................................................................................................................................29

9 Méthodes pour les essais de performance des diluants et des milieux de transport ...............30

9.1 Généralités ...............................................................................................................................................................................................30

9.2 Méthode d’évaluation des diluants .....................................................................................................................................30

9.3 Méthode d’évaluation des milieux de transport .....................................................................................................31

10 Documentation des résultats d’essai ...........................................................................................................................................32

10.1 Informations fournies par le fabricant ............................................................................................................................32

10.2 Traçabilité ................................................................................................................................................................................................32

Annexe A (informative) Dénomination des composants des milieux de culture dans les Normes

© ISO 2014 – Tous droits réservés iii
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ISO 11133:2014(F)

internationales d’analyse microbiologique des aliments, des aliments pour animaux et

des eaux ......................................................................................................................................................................................................................33

Annexe B (normative) Préparation du stock de référence et de la culture de travail....................................35

Annexe C (normative) Logigrammes des méthodes pour les essais de performance ....................................40

Annexe D (informative) Exemple de fiche de contrôle pour l’enregistrement des résultats des

essais des milieux de culture ................................................................................................................................................................45

Annexe E (normative) Micro-organismes test et critères de performance pour les milieux de

culture couramment utilisés en microbiologie alimentaire ................................................................................47

Annexe F (normative) Micro-organismes test et critères de performance pour les milieux de

culture couramment utilisés en microbiologie des eaux ........................................................................................70

Annexe G (normative) Utilisation de cartes de contrôle pour le suivi des essais quantitatifs des

milieux de culture solides ........................................................................................................................................................................82

Annexe H (informative) Assurance qualité des milieux de culture — Diagnostic d’anomalie ..............89

Annexe I (informative) Essais quantitatifs des milieux liquides ..........................................................................................91

Annexe J (normative) Détermination des essais de performance microbiologique pour les milieux

de culture normalisés ..................................................................................................................................................................................95

Bibliographie ...........................................................................................................................................................................................................................99

iv © ISO 2014 – Tous droits réservés
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ISO 11133:2014(F)
Avant-propos

L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes

nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est

en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude

a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,

gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.

L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne

la normalisation électrotechnique.

Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont

décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents

critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été

rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www.

iso.org/directives).

L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de

droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable

de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant les

références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de l’élaboration

du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de brevets reçues par

l’ISO (voir www.iso.org/brevets).

Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données

pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un

engagement.

Pour une explication de la signification des termes et expressions spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation

de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion de l’ISO aux principes de l’OMC

concernant les obstacles techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant:
Avant-propos — Informations supplémentaires.

Le comité chargé de l’élaboration du présent document est l’ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-

comité SC 9, Microbiologie, en collaboration avec le comité technique ISO/TC 147 Qualité de l’eau, sous-

comité SC 4, Méthodes microbiologiques.

Cette première édition de l’ISO 11133 remplace la deuxième édition de l’ISO/TS 11133-1 (ISO/TS 11133-

1:2009) et la première édition de l’ISO/TS 11133-2:2003, qui ont fait l’objet d’une révision technique.

Elle intègre l’Amendement ISO/TS 11133-2:2003/Amd.1:2011. En particulier, elle inclut également

des exigences applicables aux milieux de culture de microbiologie destinés à l’analyse des eaux. Elle

remplace l’ISO 9998:1991.

La présente version corrigée de l’ISO 11133:2014 comprend les corrections suivantes.

— Au paragraphe 8.3.2, 6ème tiret, mise à jour de la référence 5.4.2.6.
— Dans l’Annexe E
Milieux sélectifs pour le dénombrement des microorganismes
— IS Productivité : correction du critère;

— mCCDA Productivité : remplacement du milieu de référence “TSA” par “Gélose au sang”,

corrections des renvois aux notes de bas de tableau, correction du critère;
— mCCDA Sélectivité : ajout des critères;
, corrections des notes de bas de tableau;
— TBX Productivité : ajout du numéro WDCM 00012
© ISO 2014 – Tous droits réservés v
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ISO 11133:2014(F)
Milieux d’enrichissement sélectifs

— Bolton Productivité : cocktails de souches répartis dans 2 cellules du tableau distinctes;

— EE Productivité : corrections des renvois aux notes de bas de tableau;
— l’en-tête entre les milieux EE et Fraser a été supprimé;

— ITC Productivité : cocktails de souches répartis dans 2 cellules du tableau distinctes;

— Brucella : corrections des renvois aux notes de bas de tableau;
Milieux liquides non sélectifs

— EPT et Ringer : pour la souche E. coli, corrections des renvois aux notes de bas de tableau;

Milieux d’isolement sélectifs

— Gélose Listeria : réalignement de la Fonction Spécificité avec la souche Listeria innocua;

— VRBG Productivité : ajout de Salmonella Enteritidis WDCM 00030, corrections des renvois

aux notes de bas de tableau;
Milieux d’isolement non sélectifs
— Gélose nutritive : correction des numéros WDCM;
Milieux à usages multiples
— Ajout du milieu Gélose au sang et de ses caractéristiques;
— EPT : norme ISO 21528-1, correction des souches et de leurs numéros WDCM;

— TSA : retrait de E.coli O157 :H7 et de son numéro WDCM 00014 (non-toxigénique);

— Dans l’Annexe F

Milieux sélectifs pour le dénombrement des micro-organismes par comparaison avec un milieu

de référence non sélectif

— Colilert : remplacement par Colilert-18 et changement du numéro WDCM 00207 de la souche

Pseudomonas aeruginosa par 00024;
— Slanetz : ajout d’un renvoi aux notes de bas de tableau;

— Sulfite de fer/TS et TSC : milieu de référence modifié par “TSA ou autre milieu non sélectif

pour les anaérobies ou gélose au sang”;

Milieux sélectifs pour le dénombrement des micro-organismes par comparaison avec un lot

précédemment accepté

— Colilert : remplacement par Colilert-18 et changement du numéro WDCM 00207 de la souche

Pseudomonas aeruginosa par 00024;
Milieux liquides non sélectifs
— Sel : remplacement de “sel” par “solution saline”;
Milieux d’isolement sélectifs
— XLD : ajout d’un renvoi aux notes de bas de tableau
— EPT : ajout d’un renvoi aux notes de bas de tableau;
vi © ISO 2014 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 11133:2014(F)

— TSA : ajout d’un renvoi aux notes de bas de tableau et de nouvelles souches de E. coli de

numéros WDCM 00012, 00013, et 00179.
© ISO 2014 – Tous droits réservés vii
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ISO 11133:2014(F)
Introduction

Dans les laboratoires pratiquant des examens microbiologiques, les principaux objectifs sont la

conservation, la revivification, la croissance, la recherche et/ou le dénombrement d’une grande

variété de micro-organismes. Les milieux de culture sont utilisés dans toutes les méthodes de culture

microbiologique traditionnelles comme dans de nombreuses autres méthodes alternatives. Il existe de

nombreuses formules de milieux de culture disponibles dans le commerce et un plus grand nombre

encore, destinées à des utilisations spécifiques, sont décrites dans la littérature.

De nombreux essais et modes opératoires dépendent de l’aptitude des milieux de culture à donner des

résultats homogènes et reproductibles. Les exigences relatives aux milieux peuvent être spécifiques à

la fois à l’échantillon et aux souches à rechercher. Des milieux de culture satisfaisant à des critères de

performance établis constituent donc un préalable à toute analyse microbiologique fiable. Il convient

d’effectuer un nombre suffisant d’essais afin de démontrer
a) que chaque lot de milieu est acceptable,
b) que le milieu répond aux besoins et
c) que le milieu peut donner des résultats homogènes.

Ces trois critères constituent une part essentielle des procédures internes de contrôle qualité et, avec

la documentation appropriée, permettent une surveillance efficace des milieux de culture, contribuant

ainsi à l’obtention de données exactes et fiables. Pour une analyse microbiologique fiable, il est essentiel

d’utiliser des milieux de culture de qualité reconnue. Pour tous les milieux décrits dans les méthodes

normalisées, il est indispensable de définir les critères d’acceptation minimaux nécessaires pour garantir

leur fiabilité. Il est recommandé, pour la détermination des caractéristiques de performance d’un milieu

de culture, de procéder à des essais conformes à la présente Norme internationale.

Il convient que l’établissement de critères de performance minimaux largement acceptés pour les milieux

conduise à des produits de qualité plus homogène, et réduise le nombre d’analyses supplémentaires

dans les laboratoires où ils sont utilisés.

En outre, les critères d’acceptation mesurés selon des méthodes définies dans la présente Norme

internationale peuvent être utilisés par tous les laboratoires de microbiologie pour évaluer le caractère

productif, sélectif et/ou électif d’un milieu de culture.

Les exigences relatives à l’analyse microbiologique des aliments, des aliments pour animaux et de l’eau

contenues dans la présente Norme internationale prévalent dans l’évaluation de la qualité des milieux

de culture.
viii © ISO 2014 – Tous droits réservés
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NORME INTERNATIONALE ISO 11133:2014(F)
Microbiologie des aliments, des aliments pour animaux et
de l’eau — Préparation, production, stockage et essais de
performance des milieux de culture
1 Domaine d’application

La présente Norme internationale définit les termes relatifs à l’assurance qualité des milieux de culture

et spécifie les exigences relatives à la préparation des milieux de culture destinés à être appliqués pour

l’analyse microbiologique des aliments, des aliments pour animaux et des d’échantillons de la production

d’aliments et d’aliments pour animaux ainsi que de tous les types d’eau destinés à la consommation ou

utilisés dans la production alimentaire.

Ces exigences sont applicables à toutes catégories de milieux de culture préparés pour être utilisés dans

les laboratoires qui réalisent des analyses microbiologiques.

La présente Norme internationale définit également des critères et décrit des méthodes pour les essais

de performance des milieux de culture. La présente Norme internationale s’applique aux producteurs

tels que:

— les entités commerciales qui produisent et/ou distribuent des milieux prêts à l’emploi, semi-finis

reconstitués ou déshydratés,
— les entités non commerciales qui fournissent des milieux à des tiers,

— les laboratoires de microbiologie qui préparent des milieux de culture pour leur propre usage.

2 Références normatives

Les documents ci-après, dans leur intégralité ou non, sont des références normatives indispensables à

l’application du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour les

références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les éventuels

amendements).

ISO 6887-1, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des

dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique — Partie 1: Règles générales pour la préparation de

la suspension mère et des dilutions décimales.

ISO 6887-2, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des

dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique — Partie 2: Règles spécifiques pour la préparation

des viandes et produits à base de viande.

ISO 6887-3, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des

dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique — Partie 3: Règles spécifiques pour la préparation

des produits de la pêche.

ISO 6887-4, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des

dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique — Partie 4: Règles spécifiques pour la préparation

des produits autres que les produits laitiers, les produits carnés et les produits de la pêche.

ISO 6887-5, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des

dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique — Partie 5: Règles spécifiques pour la préparation

du lait et des produits laitiers.
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ISO 11133:2014(F)

ISO 6887-6, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des

dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique — Partie 6: Règles spécifiques pour la préparation

des échantillons prélevés au stade de production primaire.

ISO 7704, Qualité de l’eau — Évaluation des membranes filtrantes utilisées pour des analyses microbiologiques.

ISO 7218, Microbiologie des aliments — Exigences générales et recommandations.

ISO 8199, Qualité de l’eau — Lignes directrices générales pour le dénombrement des micro-organismes sur

milieu de culture.
3 Termes et définitions

Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.

NOTE 1 Le présent article donne les définitions générales relatives à l’assurance qualité des milieux de culture

et fournit la terminologie relative aux essais de performance, aux milieux de culture et aux micro-organismes

test.

NOTE 2 Les Tableaux E.2 et F.2 donnent des explications sur les noms abrégés des milieux.

3.1 Termes généraux et définitions
3.1.1
maîtrise de la qualité

partie du management de la qualité axée sur la satisfaction des exigences pour la qualité

Note 1 à l’article: Voir Référence [1].
3.1.2
lot de milieu de culture

unité de milieu homogène et conforme aux exigences de traçabilité, correspondant à une quantité définie

de produits en vrac, de produits semi-finis ou finis, de type et de qualité homogènes, qui a été produite

au cours d’une période définie et identifiés sous un même numéro de lot
3.1.3
substrat chromogène
substrat fluorogène

substrat contenant un groupement chromophore/fuorophore et un substrat utilisable par des bactéries

ou des champignons

Note 1 à l’article: après avoir divisé le substrat chromogène/fluorogène, le chromophore/fluorogène est libéré et

un produit final coloré ou fluorescent devient visible/peut être détecté, en utilisant une lampe à rayons ultraviolets

(UV) si nécessaire.
3.2 Terminologie relative aux essais de performance
3.2.1
performance d’un milieu de culture

réponse d’un milieu de culture soumis à une souche test dans des conditions définies

3.2.2
micro-organisme cible
micro-organisme ou groupe de micro-organismes à rechercher ou à dénombrer
3.2.3
micro-organisme non cible

micro-organisme qui est supprimé par le milieu et/ou les conditions d’incubation ou qui ne présente pas

les caractéristiques attendues du micro-organisme cible
2 © ISO 2014 – Tous droits réservés
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ISO 11133:2014(F)
3.2.4
productivité d’un milieu de culture

taux de récupération d’un micro-organisme cible à partir d’un milieu de culture dans des conditions

définies
3.2.5
sélectivité d’un milieu de culture

degré d’inhibition d’un micro-organisme non cible sur ou dans un milieu de culture sélectif dans des

conditions définies
3.2.6
électivité d’un milieu de culture
spécificité d’un milieu de culture

démonstration de caractéristiques visuelles spécifiées, dans des conditions définies, par les micro-

organismes cibles mais non par les micro-organismes non cibles
3.3 Terminologie relative aux milieux de culture
3.3.1
milieu de culture

mélange de substances, sous forme liquide, semi-solide ou solide, qui contient des constituants naturels

et/ou synthétiques permettant la croissance des micro-organismes (avec ou sans inhibition de certains

d’entre eux), leur identification ou leur conservation

Note 1 à l’article: lorsque cette expression est utilisée en combinaison avec d’autres mots, on l’abrège souvent pour

n’utiliser que le terme «milieu» (par exemple, milieu d’enrichissement).
3.3.2 Milieux de culture classés par composition
3.3.2.1
milieu chimiquement défini

milieu de culture exclusivement composé de constituants chimiquement définis dont la structure

moléculaire et le degré de pureté sont connus
3.3.2.2
milieu chimiquement indéfini ou partiellement indéfini

milieu de culture entièrement ou partiellement composé de matières premières naturelles ayant subi

une transformation ou tout autre traitement, dont la composition chimique n’est pas complètement

définie

Note 1 à l’article: une liste harmonisée des désignations des différents composants chimiquement indéfinis

utilisés dans les milieux de culture est spécifiée à l’Annexe A.
3.3.2.3
milieu de culture chromogène
milieu de culture fluorogène
milieu de culture contenant un ou plusieurs substrats chromogènes/fluorogènes

Note 1 à l’article: les milieux de culture chromogènes facilitent l’identification des bactéries ou des champignons

au moyen d’une couleur définie et de caractéristiques morphologiques (croissance typique du milieu de culture).

Les milieux fluorogènes nécessitent d’être interprétés à l’aide d’une lampe UV. Les produits issus de réaction

biochimiques nécessaires à l’efficacité des milieux de culture chromogènes/fluorogènes sont normalement le

résultat de l’activité enzymatique de certains organismes, laquelle dépend grandement du maintien précis de

conditions spécifiques (par exemple, température, valeur de pH, concentrations du substrat).

3.3.3 Milieux de culture classés par consistance
© ISO 2014 – Tous droits réservés 3
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ISO 11133:2014(F)
3.3.3.1
milieu liquide

milieu de culture consistant en une solution aqueuse d’un ou de plusieurs constituants, tel que l’eau

peptonée et le bouillon nutritif

Note 1 à l’article: dans certains cas, des particules solides sont ajoutées au milieu de culture liquide, tel que le

milieu de viande cuite.

Note 2 à l’article: les milieux liquides répartis dans des tubes, des fioles ou flacons sont couramment appelés

«bouillons».
3.3.3.2
milieu solide
milieu semi-solide

milieu liquide contenant des produits gélifiants (par exemple, agar-agar, gélatine) à différentes

concentrations
Note 1 à l’article: étant donné que les milieux gélosés
...

PROJET DE NORME INTERNATIONALE ISO/DIS 11133
ISO/TC 34/SC 9 Secrétariat: AFNOR
Début de vote Vote clos le
2012-08-02 2013-01-02

INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION • МЕЖДУНАРОДНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ • ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION

Microbiologie des aliments et de l'eau — Préparation,
production, stockage et essais de performance des milieux de
culture

Microbiology of food, animal feed and water — Preparation, production, storage and performance testing of

culture media

[Révision de la deuxième édition (ISO 11133-1:2009), première édition de l’ISO 11133-2:2003 et de

l’ISO 11133-3:2003/Amd.1:2011]
ICS 07.100.30
TRAITEMENT PARALLÈLE ISO/CEN

Le présent projet a été élaboré dans le cadre de l'Organisation internationale de normalisation (ISO)

et soumis selon le mode de collaboration sous la direction de l'ISO, tel que défini dans l'Accord de

Vienne.

Le projet est par conséquent soumis en parallèle aux comités membres de l'ISO et aux comités

membres du CEN pour enquête de cinq mois.

En cas d'acceptation de ce projet, un projet final, établi sur la base des observations reçues, sera

soumis en parallèle à un vote d'approbation de deux mois au sein de l'ISO et à un vote formel au sein

du CEN.

Pour accélérer la distribution, le présent document est distribué tel qu'il est parvenu du

secrétariat du comité. Le travail de rédaction et de composition de texte sera effectué au

Secrétariat central de l'ISO au stade de publication.

To expedite distribution, this document is circulated as received from the committee

secretariat. ISO Central Secretariat work of editing and text composition will be undertaken at

publication stage.

CE DOCUMENT EST UN PROJET DIFFUSÉ POUR OBSERVATIONS ET APPROBATION. IL EST DONC SUSCEPTIBLE DE MODIFICATION ET NE PEUT

ÊTRE CITÉ COMME NORME INTERNATIONALE AVANT SA PUBLICATION EN TANT QUE TELLE.

OUTRE LE FAIT D'ÊTRE EXAMINÉS POUR ÉTABLIR S'ILS SONT ACCEPTABLES À DES FINS INDUSTRIELLES, TECHNOLOGIQUES ET

COMMERCIALES, AINSI QUE DU POINT DE VUE DES UTILISATEURS, LES PROJETS DE NORMES INTERNATIONALES DOIVENT PARFOIS ÊTRE

CONSIDÉRÉS DU POINT DE VUE DE LEUR POSSIBILITÉ DE DEVENIR DES NORMES POUVANT SERVIR DE RÉFÉRENCE DANS LA

RÉGLEMENTATION NATIONALE.

LES DESTINATAIRES DU PRÉSENT PROJET SONT INVITÉS À PRÉSENTER, AVEC LEURS OBSERVATIONS, NOTIFICATION DES DROITS DE PRO-

PRIÉTÉ DONT ILS AURAIENT ÉVENTUELLEMENT CONNAISSANCE ET À FOURNIR UNE DOCUMENTATION EXPLICATIVE.

© Organisation Internationale de Normalisation, 2012
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ISO/DIS 11133
Notice de droit d'auteur

Ce document de l'ISO est un projet de Norme internationale qui est protégé par les droits d'auteur de l'ISO.

Sauf autorisé par les lois en matière de droits d'auteur du pays utilisateur, aucune partie de ce projet ISO ne

peut être reproduite, enregistrée dans un système d'extraction ou transmise sous quelque forme que ce soit

et par aucun procédé électronique ou mécanique, y compris la photocopie, les enregistrements ou autres,

sans autorisation écrite préalable.

Les demandes d'autorisation de reproduction doivent être envoyées à l'ISO à l'adresse ci-après ou au

comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.
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Les contrevenants pourront être poursuivis.
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ISO/DIS 11133
Sommaire Page

Avant-propos ....................................................................................................................................................vii

Introduction......................................................................................................................................................viii

1 Domaine d'application ..........................................................................................................................1

2 Références normatives.........................................................................................................................1

3 Termes généraux et définitions ...........................................................................................................5

3.1 Introduction............................................................................................................................................5

3.2 Terminologie générale ..........................................................................................................................5

3.3 Terminologie relative aux essais de performance.............................................................................5

3.4 Terminologie relative aux milieux de culture .....................................................................................5

3.5 Terminologie relative aux micro-organismes d’essai .......................................................................9

4 Gestion de l’assurance qualité ..........................................................................................................10

4.1 Documentation ....................................................................................................................................10

4.1.1 Documentation fournie par le fabricant ou par le producteur........................................................10

4.1.2 Acceptation des produits à la livraison ............................................................................................10

4.2 Stockage...............................................................................................................................................11

4.2.1 Généralités ...........................................................................................................................................11

4.2.2 Maîtrise de la qualité et contrôle des milieux déshydratés et des suppléments..........................11

4.3 Préparation des milieux en laboratoire.............................................................................................11

4.3.1 Généralités ...........................................................................................................................................11

4.3.2 Qualité des composants de base de milieux....................................................................................12

4.3.3 Eau........................................................................................................................................................12

4.3.4 Pesée et réhydratation........................................................................................................................13

4.3.5 Dissolution et dispersion ...................................................................................................................13

4.3.6 Mesurage et ajustement du pH ..........................................................................................................13

4.3.7 Répartition............................................................................................................................................13

4.3.8 Stérilisation..........................................................................................................................................13

4.4 Stockage et durée de conservation des milieux préparés..............................................................14

4.4.1 Milieux commerciaux prêts à l’emploi...............................................................................................14

4.4.2 Milieux préparés en laboratoire .........................................................................................................14

4.4.3 Stockage des milieux en boîte de Pétri.............................................................................................15

4.5 Préparation avant utilisation ..............................................................................................................15

4.5.1 Fusion des milieux de culture gélosés .............................................................................................15

4.5.2 Désaération des milieux de culture...................................................................................................16

4.5.3 Addition de suppléments ...................................................................................................................16

4.5.4 Préparation des milieux solides en boîtes de Pétri .........................................................................16

4.5.5 Incubation des milieux solides en boîtes de Pétri...........................................................................16

4.6 Mise au rebut des milieux...................................................................................................................17

5 Souches d’essai pour essais de performance .................................................................................17

5.1 Sélection des souches d’essai ..........................................................................................................17

5.2 Conservation et entretien des souches d’essai...............................................................................17

5.2.1 Généralités ...........................................................................................................................................17

5.2.2 Souches d’essai provenant de sources commerciales...................................................................18

5.2.3 Stocks de référence préparés au laboratoire ...................................................................................18

5.2.4 Cultures mères ....................................................................................................................................18

5.2.5 Cultures de travail ...............................................................................................................................18

5.3 Micro-organismes d’essai pour essais de performance de routine ..............................................18

5.3.1 Généralités ...........................................................................................................................................18

5.3.2 Préparation...........................................................................................................................................19

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ISO/DIS 11133

6 Essais de performance des milieux de culture finis....................................................................... 22

6.1 Exigences générales .......................................................................................................................... 22

6.1.1 Critères de qualité généraux ............................................................................................................. 22

6.2 Contrôle qualité physique et chimique ............................................................................................ 22

6.3 Contrôle qualité microbiologique ..................................................................................................... 22

6.3.1 Généralités .......................................................................................................................................... 22

6.3.2 Milieu de référence ............................................................................................................................. 23

6.3.3 Contamination microbienne .............................................................................................................. 23

6.4 Exigences générales relatives aux essais de performance microbiologique.............................. 23

6.4.1 Généralités .......................................................................................................................................... 23

6.4.2 Milieux prêts à l’emploi ...................................................................................................................... 24

6.4.3 Milieux préparés à partir de formules déshydratées commerciales ............................................. 25

6.4.4 Milieux préparés à partir de composants individuels de base ...................................................... 25

6.5 Évaluation de performance et interprétation des résultats............................................................ 25

6.6 Milieux et réactifs de confirmation.................................................................................................... 25

6.6.1 Milieux de confirmation...................................................................................................................... 25

6.6.2 Réactifs de confirmation.................................................................................................................... 25

7 Méthodes pour les essais de performance des milieux de culture solides ................................. 25

7.1 Généralités .......................................................................................................................................... 25

7.2 Méthodes pour les essais quantitatifs ............................................................................................. 26

7.2.1 Définitions ........................................................................................................................................... 26

7.2.2 Méthode quantitative pour les milieux de culture solides ............................................................. 27

7.3 Essais des milieux de culture utilisés pour la filtration sur membrane........................................ 28

7.4 Méthodes pour essais qualitatifs...................................................................................................... 28

7.4.1 Méthode qualitative d’ensemencement en stries............................................................................ 28

7.4.2 Détermination de la spécificité.......................................................................................................... 29

7.4.3 Autres méthodes qualitatives pour les milieux solides.................................................................. 29

8 Méthodes pour les essais de performance des milieux de culture liquides ................................ 29

8.1 Généralités .......................................................................................................................................... 29

8.2 Méthode quantitative en tubes pour les essais de performance des milieux

d’enrichissement liquides (méthode de dilution jusqu’à extinction)............................................ 29

8.2.1 Généralités .......................................................................................................................................... 29

8.2.2 Préparation de la série de dilutions.................................................................................................. 30

8.2.3 Mode opératoire pour l’organisme cible .......................................................................................... 30

8.2.4 Calcul et interprétation des résultats ............................................................................................... 30

8.3 Méthode qualitative en tubes pour les essais de performance des milieux liquides

sélectifs................................................................................................................................................ 31

8.3.1 Généralités .......................................................................................................................................... 31

8.3.2 Mode opératoire.................................................................................................................................. 31

8.3.3 Calcul et interprétation des résultats ............................................................................................... 31

8.4 Méthode qualitative dans un seul tube (turbidité) pour les essais de performance des

milieux liquides................................................................................................................................... 32

8.4.1 Généralités .......................................................................................................................................... 32

8.4.2 Mode opératoire.................................................................................................................................. 32

8.4.3 Interprétation des résultats ............................................................................................................... 32

9 Méthodes pour les essais de performance des diluants et des milieux de transport................. 33

9.1 Généralités .......................................................................................................................................... 33

9.2 Méthode d’évaluation des diluants................................................................................................... 33

9.2.1 Méthode pour les essais quantitatifs des diluants .........................................................................33

9.3 Méthode d’évaluation des milieux de transport .............................................................................. 33

9.3.1 Généralités .......................................................................................................................................... 33

9.3.2 Méthode pour les essais quantitatifs des milieux de transport liquides...................................... 34

9.3.3 Méthode pour les essais qualitatifs des milieux de transport solides.......................................... 34

10 Documentation des résultats d’essai ............................................................................................... 35

10.1 Informations fournies par le fabricant.............................................................................................. 35

10.2 Traçabilité............................................................................................................................................ 35

iv © ISO 2012 – Tous droits réservés
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ISO/DIS 11133

Annex A (informative) Dénomination des composants des milieux de culture dans les normes

d’analyse microbiologique des aliments, des aliments pour animaux et des eaux.....................36

A.1 Généralités ...........................................................................................................................................36

A.2 Peptones..............................................................................................................................................36

A.3 Extraits.................................................................................................................................................36

A.4 Gélose...................................................................................................................................................37

A.5 Autres...................................................................................................................................................37

Annex B (normative) Préparation du stock de référence et de la culture de travail..................................38

B.1 Constitution du stock de référence à partir d’une souche de référence.......................................38

B.2 Constitution de la culture de travail à partir du stock de référence ..............................................39

Annex C (normative) Logigrammes des méthodes pour les essais de performance (7)..........................40

C.1 Méthode quantitative pour les milieux de culture solides : productivité et sélectivité

(7.2.2) ....................................................................................................................................................40

C.2 Méthode quantitative en tubes pour les essais de performance des milieux

d’enrichissement liquides — méthode de dilution jusqu’à extinction (8.2)..................................41

C.3 Méthode qualitative dans un seul tube pour les milieux d’enrichissement sélectifs (avec

les micro-organismes cibles, les micro-organismes non cibles ou un mélange de micro-

organismes cibles et non cibles dans le même tube) (8.3).............................................................42

C.4 Méthode qualitative dans un seul tube pour les milieux liquides non sélectifs et sélectifs :

turbidité (8.4)........................................................................................................................................43

Annex D (informative) Exemple de fiche de contrôle pour l’enregistrement des résultats des

essais des milieux de culture préparés par le laboratoire utilisateur............................................44

Annex E (normative) Micro-organismes d’essai pour les milieux de culture couramment utilisés

en microbiologie alimentaire (informations sur le milieu de culture, les conditions de

culture, les micro-organismes d’essai, le numéro de collection des souches d’essai et les

réactions attendues) ...........................................................................................................................45

Annex F (normative) Micro-organismes d’essai pour les milieux de culture couramment utilisés

en microbiologie des eaux .................................................................................................................66

Annex G (normative) Utilisation de graphiques de contrôle pour le suivi des essais quantitatifs

des milieux de culture solides ...........................................................................................................81

G.1 Utilisation de graphiques de contrôle...............................................................................................82

G.1.1 Méthode de validation générale.........................................................................................................82

G.1.2 Production d’un deuxième graphique de contrôle ..........................................................................82

G.1.3 Évaluation de performance et interprétation des résultats ............................................................84

Annex H (informative) Assurance qualité des milieux de culture – Diagnostic d’anomalie .....................85

Annex I (informative) Essais quantitatifs des milieux liquides ....................................................................86

I.1 Généralités ...........................................................................................................................................86

I.2 Méthode pour les essais quantitatifs des milieux de culture liquides non sélectifs utilisant

des micro-organismes cibles.............................................................................................................86

I.2.1 Mode opératoire...................................................................................................................................86

I.2.2 Dénombrement et interprétation des résultats ................................................................................86

I.2.3 Logigramme relatif à la méthode quantitative pour les milieux de culture liquides non

sélectifs utilisant des micro-organismes cibles ..............................................................................87

I.3 Méthode pour les essais quantitatifs de milieux de culture liquides sélectifs utilisant des

micro-organismes cibles et non cibles.............................................................................................87

I.3.1 Mode opératoire...................................................................................................................................87

I.3.2 Lectures, calcul et interprétation des données................................................................................88

I.3.3 Logigramme relatif à la méthode quantitative pour les milieux de culture liquides sélectifs

utilisant des micro-organismes cibles et non cibles.......................................................................89

Annex J (normative) Définition des essais de performance microbiologique pour les milieux de

culture normalisés...............................................................................................................................90

J.1 Généralités ...........................................................................................................................................90

J.2 Critères de performance, méthodes et objectifs..............................................................................90

J.3 Choix des souches de contrôle en fonction de leur performance.................................................92

© ISO 2012 – Tous droits réservés v
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ISO/DIS 11133

J.3.1 Généralités .......................................................................................................................................... 92

J.3.2 Évaluation de l’adéquation de nouvelles souches de contrôle ..................................................... 92

J.3.3 Nouveaux milieux ............................................................................................................................... 93

J.3.4 Nombre de souches par critère......................................................................................................... 93

Bibliographie .................................................................................................................................................... 95

vi © ISO 2012 – Tous droits réservés
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ISO/DIS 11133
Avant-propos

L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de

normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée

aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du

comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non

gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec

la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.

Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,

Partie 2.

La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes

internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur

publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres

votants.

L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de

droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne

pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.

L'ISO 11133 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 9,

Microbiologie, en collaboration avec le comité technique ISO/TC°147, Qualité de l’eau, sous-comité SC 4,

Méthodes microbiologiques, et le comité technique CEN/TC 275, Analyse des produits alimentaires -

Méthodes horizontales.

Les Annexes A, D, H et I sont informatives. Les Annexes B, C, E, F, G et J sont normatives.

Le présent document combine les deux parties précédemment publiées de l’ISO/TS 11133 et inclut

également des exigences applicables aux milieux de culture de microbiologie destinés à l’analyse des eaux.

Le présent document comprend une bibliographie.
© ISO 2012 – Tous droits réservés vii
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ISO/DIS 11133
Introduction

Dans les laboratoires pratiquant des examens microbiologiques, les principaux objectifs sont la conservation,

la revivification, la croissance, la recherche et/ou le dénombrement d’une grande variété de micro-

organismes. Les milieux de culture sont utilisés dans toutes les méthodes traditionnelles de culture

microbiologique comme dans de nombreuses autres méthodes. Il existe de nombreuses formules de milieux

de culture disponibles dans le commerce et un plus grand nombre encore, destinées à des utilisations

spécifiques, sont décrites dans la littérature.

De nombreux essais et modes opératoires dépendent de l’aptitude des milieux de culture à donner des

résultats homogènes et reproductibles. Les exigences relatives aux milieux peuvent être propres à la fois à

l'échantillon et aux organismes à rechercher. Des milieux de culture satisfaisant à des critères de

performance établis constituent donc un préalable à toute analyse microbiologique fiable. Il convient

d’effectuer un nombre suffisant d’essais afin de démontrer
I) que chaque lot de milieu est acceptable,
II) que le milieu en question répond aux besoins et
III) que ledit milieu peut donner des résultats homogènes.

Ces trois critères constituent une part essentielle des procédures internes de contrôle qualité et, avec la

documentation appropriée, permettent une surveillance efficace des milieux de culture, contribuant ainsi à

l'obtention de données fidèles et fiables. Pour une analyse microbiologique fiabl

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