ISO 11133:2014
(Main)Microbiology of food, animal feed and water — Preparation, production, storage and performance testing of culture media
Microbiology of food, animal feed and water — Preparation, production, storage and performance testing of culture media
ISO 11133:2014 defines terms related to quality assurance of culture media and specifies the requirements for the preparation of culture media intended for the microbiological analysis of food, animal feed, and samples from the food or feed production environment as well as all kinds of water intended for consumption or used in food production. These requirements are applicable to all categories of culture media prepared for use in laboratories performing microbiological analyses. ISO 11133:2014 also sets criteria and describes methods for the performance testing of culture media. It applies to producers such as: commercial bodies producing and/or distributing ready-to-use or semi-finished reconstituted or dehydrated media; non-commercial bodies supplying media to third parties; microbiological laboratories preparing culture media for their own use.
Microbiologie des aliments, des aliments pour animaux et de l'eau — Préparation, production, stockage et essais de performance des milieux de culture
L'ISO 11133:2014 définit les termes relatifs à l'assurance qualité des milieux de culture et spécifie les exigences relatives à la préparation des milieux de culture destinés à être appliqués pour l'analyse microbiologique des aliments, des aliments pour animaux et des d'échantillons de la production d'aliments et d'aliments pour animaux ainsi que de tous les types d'eau destinés à la consommation ou utilisés dans la production alimentaire. Ces exigences sont applicables à toutes catégories de milieux de culture préparés pour être utilisés dans les laboratoires qui réalisent des analyses microbiologiques. L'ISO 11133:2014 définit également des critères et décrit des méthodes pour les essais de performance des milieux de culture. Elle s'applique aux producteurs tels que: les entités commerciales qui produisent et/ou distribuent des milieux prêts à l'emploi, semi-finis reconstitués ou déshydratés; les entités non commerciales qui fournissent des milieux à des tiers; les laboratoires de microbiologie qui préparent des milieux de culture pour leur propre usage.
General Information
Relations
Buy Standard
Standards Content (Sample)
МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 11133
Первое издание
2014-05-15
Микробиология пищевых продуктов,
кормов для животных и воды.
Приготовление, производство,
хранение и определение рабочих
характеристик питательных сред
Microbiology of food, animal feed and water — Preparation, production,
storage and performance testing of culture media
Ответственность за подготовку русской версии несет GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьей 18.1 Устава ISO
Ссылочный номер
ISO 11133:2014(R)
©
ISO 2014
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 11133:2014(R)
ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ
© ISO 2014
Все права сохраняются. Если не указано иное, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия ISO по адресу ниже или представительства ISO в соответствующей стране.
Бюро авторского права ISO
Почтовый ящик 56 • CH-1211 Женева 20
Тел. + 41 22 749 01 11
Факс + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO 2014 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 11133:2014(R)
Содержание Страница
Предисловие. v
Введение . vi
1 Область применения . 1
2 Нормативные ссылки . 1
3 Термины и определения . 2
3.1 Общие термины и определения . 2
3.2 Терминология для испытаний для определения рабочих характеристик . 2
3.3 Терминология для питательных сред . 3
3.4 Терминология для испытательных микроорганизмов . 8
4 Обеспечение качества . 9
4.1 Документация . 9
4.2 Хранение . 10
4.3 Приготовление питательных сред в лаборатории . 10
4.4 Хранение и срок годности приготовленных сред . 13
4.5 Подготовка к использованию . 15
4.6 Инкубация плотных сред в чашках Петри . 16
4.7 Удаление питательных сред . 16
5 Тест-организмы для испытаний для определения рабочих характеристик . 16
5.1 Общие положения . 16
5.2 Выбор тест-организмов. 17
5.3 Сохранение и содержание тест-организмов . 17
5.4 Микроорганизмы для испытаний для определения рабочих характеристик . 19
6 Контроль качества и испытание для определения рабочих характеристик
питательных сред . 22
6.1 Общие требования . 22
6.2 Контроль физического и химического качества . 22
6.3 Микробиологический контроль качества . 22
6.4 Общие требования к микробиологическим испытаниям для определения рабочих
характеристик . 23
6.5 Оценка рабочих характеристик и интерпретация результатов . 25
6.6 Среды и реагенты для испытаний на соответствие. 25
7 Методы испытаний для определения рабочих характеристик плотных питательных
сред . 26
7.1 Общие положения . 26
7.2 Методы количественных испытаний . 26
7.3 Испытания питательных сред, используемых для мембранной фильтрации . 28
7.4 Методы качественных исследований . 29
8 Методы испытаний для определения рабочих характеристик жидких питательных
сред . 29
8.1 Общие положения . 29
8.2 Количественный метод испытания в пробирке для определения рабочих
характеристик жидких обогащенных сред (метод разведений до истощения) . 30
8.3 Качественный метод испытания в пробирке для определения рабочих
характеристик селективных жидких сред . 31
8.4 Количественный метод испытания в одной пробирке (мутность) для определения
рабочих характеристик селективных жидких сред . 32
© ISO 2014 – Все права сохраняются iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 11133:2014(R)
9 Методы испытаний для определения рабочих характеристик сред для разведения и
транспортировки .33
9.1 Общие положения .33
9.2 Методы испытания жидкостей для разведения .33
9.3 Метод испытания среды для транспортировки .34
10 Документация по результатам испытаний .35
10.1 Информация, предоставляемая производителем .35
10.2 Прослеживаемость .35
Приложение A (информативное) Обозначение компонентов питательных сред в
международных стандартах по микробиологическим исследованиям пищевых
продуктов, кормов для животных и воды .36
Приложение B (нормативное) Приготовление референтного образца и рабочей культуры .38
Приложение C (нормативное) Блок-схемы методов проведения испытаний для определения
рабочих характеристик .43
Приложение D (информативное) Пример карты для записи результатов испытания
питательной среды .47
Приложение E (нормативное) Испытательные микроорганизмы и рабочие характеристики
для питательных сред, обычно используемых в микробиологии пищевых
продуктов .49
Приложение F (нормативное) Испытательные микроорганизмы и рабочие характеристики
для питательных сред, обычно используемых в микробиологии воды .71
Приложение G (нормативное) Использование контрольных графиков для контроля
количественных испытаний плотных питательных сред .83
Приложение H (информативное) Обеспечение качества питательных сред. Выявление
недостатков.90
Приложение I (информативное) Количественные испытания жидких сред .91
Приложение J (нормативное) Определение микробиологических испытаний для
определения рабочих характеристик для стандартизированных питательных сред .95
Библиография .99
iv © ISO 2014 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 11133:2014(R)
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией национальных
организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных стандартов
обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член, заинтересованный в
деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть представленным в этом
комитете. Международные правительственные и неправительственные организации, имеющие связи с
ISO, также принимают участие в работах. Что касается стандартизации в области электротехники, то
ISO работает в тесном сотрудничестве с Международной электротехнической комиссией (IEC).
Процедуры, используемые для разработки данного документа и предназначенные для его
дальнейшего обслуживания описаны в Части 1 Директив ISO/IEC. В частности, следует отметить
различные критерии приемки, необходимые для разных типов ISO документов. Данный документ был
разработан в соответствии с правилами Части 2 Директив ISO/IEC. www.iso.org/directives
Следует иметь в виду, что некоторые элементы настоящего международного стандарта могут быть
объектом патентных прав. ISO не может нести ответственность за идентификацию какого-либо одного
или всех патентных прав. Детали любых патентных прав, определенных во время разработки
документа, будут включены во Введение и/или ISO список полученных заявок на патент.
www.iso.org/patents
Любые торговые наименования, используемые в данном документе, даны для информации для
удобства пользователей и не являются рекомендуемыми.
Для объяснения значений специальных терминов и выражений ISO, связанных с оценкой соответствия,
а также для получения информации о соблюдении ISO принципов WTO по Техническим Барьерам в
Торговле (Technical Barriers to Trade, TBT) см. следующую ссылку: Предисловие – Дополнительная
информация
За данный документ ответственен комитет ISO/TC 34, Пищевые продукты, Подкомитет SC 9,
Пищевые продукты в сотрудничестве с техническим комитетом ISO/TC 147, Качество воды,
Подкомитетом SC 4, Микробиологические методы.
Данное первое издание ISO 11133 заменяет второе издание ISO/TS 11133-1 (ISO/TS 11133-1:2009) и
первое издание ISO/TS 11133-2:2003, которые были технически пересмотрены. Оно также включает
дополнение ISO/TS 11133-2:2003/Amd.1:2011. В частности, оно также включает требования к
микробиологическим средам для испытаний воды. Оно заменяет ISO 9998:1991.
© ISO 2014 – Все права сохраняются v
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 11133:2014(R)
Введение
В лабораториях, проводящих микробиологические исследования, основной целью является
поддержание, восстановление, выращивание, качественное и/или количественное определение
широкого диапазона микроорганизмов. Питательная среда используется во всех традиционных
микробиологических методах культивирования, а также во многих альтернативных методах. Многие
формулы питательных сред коммерчески доступны, и многие другие, разработанные для
выращивания для специальных целей, описаны в литературе.
Многие испытания и процедуры зависят от способности питательной среды обеспечивать постоянные
и воспроизводимые результаты. Требования к средам могут быть специфичными как к пробе, так и к
искомым микроорганизмам. Поэтому питательные среды, удовлетворяющие установленным
критериям к рабочим характеристикам, являются необходимым условием для любого надежного
микробиологического исследования. Должны проводиться испытания, достаточные для демонстрации
a) приемлемости каждой партии питательной среды,
b) пригодности среды для выполнения предполагаемой задачи, и
c) возможности получения на данной среде постоянных результатов.
Данные три критерия являются важной частью процедур внутреннего контроля качества и, с
соответствующей документацией, позволят осуществлять эффективный мониторинг питательных сред
и вносить соответствующий вклад в получение точных и надежных данных. Для надежного
микробиологического анализа важно использовать питательную среду подтвержденного качества. Для
всех сред, описанных в стандартизованных методах, важно определить минимальные критерии
приемки, необходимые для обеспечения их надежности. Рекомендуется, чтобы при определении
рабочих характеристик питательных сред проводились испытания, соответствующие данному
международному стандарту.
Создание широко принятых минимальных критериев эффективности для питательных сред должно
привести к более надежному качеству продуктов и, таким образом, сократить объем испытаний,
которые требуется проводить в лаборатории пользователя.
Кроме того, критерии приемки, при измерении методами, описанными в данном международном
стандарте, могут использоваться всеми микробиологическими лабораториями для оценки ростовых,
селективных и/или элективных свойств питательной среды.
В микробиологическом анализе пищевых продуктов, кормов для животных и воды требования данного
международного стандарта имеют приоритет в оценке качества питательных сред.
vi © ISO 2014 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 6 ----------------------
МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ ISO 11133:2014(R)
Микробиология пищевых продуктов, кормов для животных
и воды. Приготовление, производство, хранение и
определение рабочих характеристик питательных сред
1 Область применения
В данном международном стандарте определены термины, связанные с обеспечением качества
питательных сред, и установлены требования к приготовлению питательных сред, используемых в
микробиологическом анализе пищевых продуктов, кормов для животных и образцов с областей
производства пищевых продуктов или кормов, а также всех типов воды, предназначенной для
потребления или используемой в приготовлении еды.
Эти требования применимы ко всем категориям питательных сред, приготовляемых для
использования в лабораториях, проводящих микробиологический анализ.
В данном международном стандарте также установлены критерии и описаны методы испытания
эффективности питательных сред. Данный международный стандарт применяется к производителям
таким, как:
― коммерческие организации, производящие и/или распространяющие готовые к использованию или
частично готовые восстановленные или дегидратированные среды;
― некоммерческие организации, поставляющие среды третьим лицам;
― микробиологические лаборатории, приготавливающие питательные среды для их собственного
использования.
2 Нормативные ссылки
Ссылка на следующие документы обязательна при использовании данного документа. Для жестких
ссылок применяются только указанное по тексту издание. Для плавающих ссылок необходимо
использовать самое последнее издание нормативного ссылочного документа (включая любые
изменения).
ISO 6887-1, Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Приготовление проб для
испытаний, исходных суспензий и десятичных разведений для микробиологических исследований.
Часть 1. Общие правила приготовления исходной суспензии и десятичных разведений
ISO 6887-2, Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Приготовление проб для
испытаний, исходных суспензий и десятичных разведений для микробиологических исследований.
Часть 2. Специальные правила для приготовления мяса и мясных продуктов
ISO 6887-3, Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Приготовление проб для
испытаний, исходных суспензий и десятичных разведений для микробиологических исследований.
Часть 3. Специальные правила для приготовления рыбы и рыбных продуктов
ISO 6887-4, Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Приготовление проб для
испытаний, исходных суспензий и десятичных разведений для микробиологических исследований.
Часть 4. Специальные правила для приготовления разнообразных продуктов
ISO 6887-5, Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Приготовление проб для
испытаний, исходных суспензий и десятичных разведений для микробиологических исследований.
Часть 5. Специальные правила для приготовления молока и молочных продуктов
© ISO 2014 – Все права сохраняются 1
---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 11133:2014(R)
ISO 6887-6, Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Приготовление проб для
испытаний, исходных суспензий и десятичных разведений для микробиологических исследований.
Часть 6. Специальные правила для приготовления образцов, взятых на первичной стадии
производства
ISO 7704, Качество воды. Оценка мембранных фильтров, используемых для микробиологического
анализа
ISO 7218, Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие требования и
рекомендации по микробиологическим исследованиям
ISO 8199, Качество воды. Общие рекомендации по подсчету микроорганизмов выращенных
методом посева на питательной среде
3 Термины и определения
В рамках данного документа применяются следующие термины и определения.
ПРИМЕЧАНИЕ 1 В данном разделе приведены общие определения, касающиеся обеспечения качества
питательных сред, а также приведена терминология, касающаяся испытаний для определения рабочих
характеристик, питательных сред и испытательных микроорганизмов.
ПРИМЕЧАНИЕ 2 В Таблицах Е.2 и F.2 приведены расшифровки аббревиатур в названиях сред.
3.1 Общие термины и определения
3.1.1
контроль качества
quality control
часть менеджмента качества, направленная на выполнение требований к качеству
ПРИМЕЧАНИЕ 1 ко всему: См. Ссылку [1].
3.1.2
партия питательных сред
batch of culture media
однородная и полностью прослеживаемая единица среды, представляющая собой определенное
количество сыпучего продукта, полуфабриката или конечного продукта, которая однородна по типу и
качеству и была произведена в течение одного определенного периода производства, которой был
присвоен один и тот же номер партии (или лота)
3.1.3
хромогенный субстрат
chromogenic substrate
флюорогенный субстрат
fluorogenic substrate
субстрат, содержащий хромофорную/флюорофорную группу и субстрат, пригодный для роста бактерий
или грибов
ПРИМЕЧАНИЕ 1 ко всему: После расщепления хромогенного/флюорогенного субстрата высвобождается
хромофор/флюорофор и окрашенные/флюоресцирующие конечные продукты становится возможным
увидеть/обнаружить, используя ультрафиолетовую (УФ) лампу.
3.2 Терминология для испытаний для определения рабочих характеристик
3.2.1
рабочие характеристики питательных сред
performance of culture media
реакция питательной среды на заражение испытательными организмами в определенных условиях
2 © ISO 2014 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 8 ----------------------
ISO 11133:2014(R)
3.2.2
целевые микроорганизмы
target microorganism
микроорганизмы или группа микроорганизмов, которые необходимо обнаруживать или подсчитывать
3.2.3
нецелевые микроорганизмы
non-target microorganism
микроорганизмы, которые подавляются средой и/или условиями инкубации или не обладают
ожидаемыми характеристиками целевых микроорганизмов
3.2.4
продуктивность питательной среды
productivity of culture medium
уровень роста целевых микроорганизмов на питательной среде при определенных условиях
3.2.5
селективность питательной среды
selectivity of culture medium
степень ингибирования нецелевых микроорганизмов на или в селективной питательной среде при
определенных условиях
3.2.6
элективность питательной среды
electivity of culture medium
специфичность питательной среды
specificity of culture medium
демонстрация при определенных условиях того, что нецелевые микроорганизмы не обладают теми же
визуальными характеристиками, что и целевые микроорганизмы
3.3 Терминология для питательных сред
3.3.1
питательная среда
culture medium
смесь веществ, в жидком, полуплотном или плотном состоянии, которая содержит природные и/или
синтетические компоненты, предназначенные для поддержания размножения (с подавлением роста
некоторых микроорганизмов или без него), идентификации или сохранения жизнеспособности
микроорганизмов
ПРИМЕЧАНИЕ 1 ко всему: При использовании в составных словах этот термин часто сокращают до слова
“среда” (например, обогащенная среда).
3.3.2 Классификация питательных сред по составу
3.3.2.1
питательная среда определенного химического состава
chemically defined medium
питательная среда, состоящая только из химических компонентов известной молекулярной структуры
и степени чистоты
3.3.2.2
питательная среда неопределенного или частично неопределенного химического состава
chemically undefined or partially undefined medium
питательная среда, полностью или частично состоящая из природных материалов, обработанных или
преобразованных иным образом, химический состав которых определен не полностью
ПРИМЕЧАНИЕ 1 ко всему: Для различных компонентов неопределенного химического состава, используемых в
питательных средах, в Приложении А установлены гармонизированные обозначения.
© ISO 2014 – Все права сохраняются 3
---------------------- Page: 9 ----------------------
ISO 11133:2014(R)
3.3.2.3
хромогенная питательная среда
chromogenic culture medium
флюорогенная питательная среда
fluorogenic culture medium
питательная среда, содержащая один или несколько хромофорных/флюорофорных субстратов
ПРИМЕЧАНИЕ 1 ко всему: Хромогенные питательные среды облегчают идентификацию бактерий или грибов
посредством определенного окрашивания и морфологических характеристик (типичный рост на питательной
среде). Флюорогенные среды требуют визуализации посредством УФ ламп. Продукты биохимической реакции,
необходимые для эффективности хромогенных/флюорогенных питательных сред, обычно являются результатом
ферментативной активности некоторых организмов, которая в свою очередь сильно зависит от точности
поддержания определенных условий (например, температуры, значения рН, концентрации субстрата).
3.3.3 Классификация питательных сред по консистенции
3.3.3.1
жидкая среда
liquid medium
питательная среда, состоящая из водного раствора одного или нескольких компонентов, такая как
пептонный бульон или питательный бульон
ПРИМЕЧАНИЕ 1 ко всему: В некоторых случаях в жидкую питательную среду добавляют плотные частицы, такие
как мясные гранулы.
ПРИМЕЧАНИЕ 2 Жидкие питательные среды в пробирках, колбах или флаконах обычно называют “бульон”.
3.3.3.2
плотная среда
полужидкая среда
solid medium
semi-solid medium
жидкая среда, содержащая отверждающие вещества (например, агар-агар, желатин) в различных
концентрациях
ПРИМЕЧАНИЕ 1 ко всему: Благодаря широкому использованию по всему миру сред, застывающих с помощью
агар-агара, в качестве синонима плотной питательной среды часто используют сокращенный термин “агар” и,
соответственно, в сочетании с существительными, например, “агар для подсчета количества микроорганизмов на
чашках Петри”.
ПРИМЕЧАНИЕ 2 ко всему: Плотную питательную среду, разлитую по чашкам Петри, обычно называют “чашки”.
Плотную питательную среду, разлитую по пробиркам или небольшим флаконам, которые держат в наклонном
положении при застывании среды, часто называют скошенной плотной средой или скошенным агаром. Если среда
распределяется так, чтобы покрыть дно контейнера, она образует “столбик”.
3.3.4 Классификация питательных сред по назначению
3.3.4.1
среда для транспортировки
transport medium
среда, предназначенная для сохранения и поддержания жизнеспособности микроорганизмов,
минимизируя количественные изменения, в течение времени с момента отбора проб до момента
обработки пробы в лаборатории
ПРИМЕР Транспортная среда Стюарта (Stuart) или Эми (Amies)
3.3.4.2
среда для сохранения
preservation medium
среда, предназначенная для сохранения и поддержания жизнеспособности микроорганизмов в
течение более продолжительного времени, для защиты их от неблагоприятных воздействий, которые
4 © ISO 2014 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 10 ----------------------
ISO 11133:2014(R)
могут возникнуть при длительном хранении, и для обеспечения возможности восстановления после
этого периода
ПРИМЕР Яичная питательная среда Дорсета (Dorset), питательный скошенный агар
3.3.4.3
среда для разведения
diluent medium
среда для получения суспензий
suspension medium
среда, предназначенная для отделения микроорганизмов из плотного испытуемого продукта в жидкую
фазу и/или для снижения их концентрации растворением без их размножения или подавления роста в
течение времени контакта
ПРИМЕР Пептонно-солевой раствор
3.3.4.4
восстанавливающая среда
resuscitation medium
среда, дающая возможность подверженным стрессу и ослабленным микроорганизмам восстанавливаться
самим и восстанавливать их способность к нормальному росту, но не обязательно содействуя их
размножению
ПРИМЕР Буферная пептонная вода
ПРИМЕЧАНИЕ 1 ко всему: Восстанавливающая среда может также использоваться как предварительно
обогащенная питательная среда, например, буферная пептонная среда.
3.3.4.5
предварительно обогащенная среда
pre-enrichment medium
обогащенная среда
enrichment medium
обычно жидкая среда, которая, благодаря ее составу, обеспечивает особенно благоприятные условия
для размножения микроорганизмов
ПРИМЕР Триптон-соевый бульон
3.3.4.5.1
селективная обогащенная среда
selective enrichment medium
обогащенная среда, которая поддерживает размножение специфических микроорганизмов, частично
или полностью подавляя рост других микроорганизмов
ПРИМЕР Соевая пептонная среда Раппапорта-Василиадиса (Rappaport-Vassiliadis)
3.3.4.5.2
неселективная обогащенная среда
non-selective enrichment medium
обогащенная среда, которая поддерживает рост широкого набора микроорганизмов
ПРИМЕР Бульон с сердечно-мозговым экстрактом
3.3.4.6
среда для выделения
isolation medium
плотная или полужидкая среда, которая поддерживает рост микроорганизмов
© ISO 2014 – Все права сохраняются 5
---------------------- Page: 11 ----------------------
ISO 11133:2014(R)
3.3.4.6.1
селективная среда для выделения
selective isolation medium
среда для выделения, которая поддерживает рост специфических заданных микроорганизмов,
подавляя, полностью или частично, рост других микроорганизмов
ПРИМЕР Модифицированный агар с углем, цефоперазоном и дезоксихолатом (modified charcoal
cefoperazone deoxycholate agar, mCCD agar)
3.3.4.6.2
неселективная среда для выделения
non-selective isolation medium
среда для выделения, которая не предназначена для избирательного подавления роста
микроорганизмов
ПРИМЕР Питательный агар
3.3.4.6.3
хромогенная селективная питательная среда
chromogenic selective culture medium
флюорогенная селективная питательная среда
fluorogenic selective culture medium
хромогенная/флюорогенная питательная среда, которая также содержит селективные составляющие,
которые подавляют, полностью или частично, сопутствующую флору, присутствующую в
испытательных материалах, тем самым поддерживая точное выявление целевых микроорганизмов
ПРИМЕР TBX агар, MUG/EC среда
3.3.4.7
дифференциальная среда
differential medium
определяющая характеристики среда
characterization medium
среда, которая позволяет исследовать одну или несколько физиологических/биохимических
характеристик микроорганизмов для их идентификации
ПРИМЕР TBX агар, лактозный агар с тергитолом-7 и TTC
ПРИМЕЧАНИЕ 1 ко всему: Дифференциальную среду, которая может использоваться как среда для выделения,
называют средой для выделения/дифференциальной средой, например, ксилозо-лизиновый дезоксихолатный
(xylose lysine deoxycholate, XLD) агар, лактозный TTC агар.
3.3.4.8
идентификационная среда
identification medium
среда, предназначенная для получения специфической опознавательной реакции, которая, как
правило, не требует какого-либо последующего испытания для подтверждения
ПРИМЕР Желчно-эскулиновый агар с азидом
3.3.4.9
среда для подсчета
enumeration medium
селективная или неселективная питательная среда, которая дает возможность о
...
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 11133
First edition
2014-05-15
Corrected version
2014-11-01
Microbiology of food, animal feed and
water — Preparation, production,
storage and performance testing of
culture media
Microbiologie des aliments, des aliments pour animaux et de l’eau —
Préparation, production, stockage et essais de performance des
milieux de culture
Reference number
ISO 11133:2014(E)
©
ISO 2014
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 11133:2014(E)
COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
© ISO 2014
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized otherwise in any form
or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on the internet or an intranet, without prior
written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below or ISO’s member body in the country of
the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2014 – All rights reserved
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 11133:2014(E)
Contents Page
Foreword .v
Introduction .vii
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 2
3.1 General terms and definitions . 2
3.2 Terminology of performance testing . 2
3.3 Terminology of culture media . 3
3.4 Terminology for test microorganisms . 6
4 Quality assurance management . 7
4.1 Documentation . 7
4.2 Storage . 8
4.3 Laboratory preparation of media . 8
4.4 Storage and shelf-life of prepared media .11
4.5 Preparation for use .12
4.6 Incubation of solid media in Petri dishes .14
4.7 Disposal of media .14
5 Test organisms for performance testing.14
5.1 General .14
5.2 Selection of test organisms .14
5.3 Preservation and maintenance of test organisms .15
5.4 Microorganisms for performance testing .16
6 Quality control and performance testing of culture media .19
6.1 General requirements .19
6.2 Physical and chemical quality control .19
6.3 Microbiological quality control .19
6.4 General requirements for microbiological performance testing .20
6.5 Performance evaluation and interpretation of results .21
6.6 Confirmation media and reagents .22
7 Methods for performance testing of solid culture media .22
7.1 General .22
7.2 Methods for quantitative tests.22
7.3 Testing of culture media used for membrane filtration .24
7.4 Methods for qualitative tests .24
8 Methods for performance testing of liquid culture media.25
8.1 General .25
8.2 Quantitative tube method for performance testing of liquid enrichment media (dilution to
extinction method) .25
8.3 Qualitative tube method for performance testing of selective liquid media .26
8.4 Qualitative single tube method (turbidity) for performance testing of liquid media .27
9 Methods for performance testing of diluents and transport media .28
9.1 General .28
9.2 Method for testing diluents .28
9.3 Method for testing transport media .29
10 Documentation of test results .30
10.1 Information provided by the manufacturer .30
10.2 Traceability .30
Annex A (informative) Designation of the components of culture media in International Standards
on microbiological analysis of food, animal feed and water .31
© ISO 2014 – All rights reserved iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 11133:2014(E)
Annex B (normative) Preparation of reference stock and working culture .33
Annex C (normative) Flow charts of methods for performance testing .38
Annex D (informative) Example of card for recording test results of culture media .42
Annex E (normative) Test microorganisms and performance criteria for culture media commonly
used in food microbiology .44
Annex F (normative) Test microorganisms and performance criteria for culture media commonly
used in water microbiology.66
Annex G (normative) Use of control charts to monitor quantitative testing of solid
culture media .78
Annex H (informative) Quality assurance of culture media — Troubleshooting .85
Annex I (informative) Quantitative testing of liquid media .87
Annex J (normative) Definition of microbiological performance tests for standardized
culture media .91
Bibliography .95
iv © ISO 2014 – All rights reserved
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 11133:2014(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2. www.iso.org/directives
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received. www.iso.org/patents
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the meaning of ISO specific terms and expressions related to conformity
assessment, as well as information about ISO’s adherence to the WTO principles in the Technical Barriers
to Trade (TBT) see the following URL: Foreword - Supplementary information
The committee responsible for this document is ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9,
Microbiology, in collaboration with Technical Committee ISO/TC 147 Water quality, Subcommittee SC 4,
Microbiological methods.
This first edition of ISO 11133 replaces the second edition of ISO/TS 11133-1 (ISO/TS 11133-1:2009)
and the first edition of ISO/TS 11133-2:2003, which have been technically revised. It also incorporates
the Amendment ISO/TS 11133-2:2003/Amd.1:2011. In particular, it also includes requirements for
microbiology media for water testing. It supersedes ISO 9998:1991.
This corrected version of ISO 11133:2014 incorporates the following corrections:
— In Annex E
Selective media for enumeration of microorganisms
— DG18 column Incubation: d was replaced with days;
— EC column control strain: £ was deleted after Pseudomonas;
d b
— mCCDA: was deleted after both species of Campylobacter; was added after 000156;
— mCCDA: the criteria “Total or partial inhibition (0-1)” was added to the control stain E. coli
and “Total inhibition (0)” was added to S. aureus;
— TSC: the row with Pseudomonas aeruginosa and the WDCM number 00025 was deleted.
Selective enrichment media
— Bolton productivity: the cocktails of control strains were split into 2 separate cells;
d i
— EE: was added before , after both stains of Salmonella;
— ITC: a new cocktail of strains was introduced for Productivity;
b
— PBS selectivity: was added after 00025;
© ISO 2014 – All rights reserved v
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 11133:2014(E)
d
— RVS Productivity: added to E. coli.
Non-selective liquid media
d b
— mCCDA: was deleted after both species of Campylobacter; was added after 000156;
— mCCDA column Characteristic reactions: “colonies” was added after “moist”;
i
— PEMBA lane productivity: was deleted after “good growth (2)”;
— Media TCBS was added after TBX;
— VRBG: one Salmonella Typhimurium was replaced by Salmonella Enteritidis WDCM 00030
d,i
and was added to both Salmonella;
Non-selective isolation media
— Nutrient agar: the WDCM numbers were inverted between S. Typhimurium and S.
Enteritidis;
b
— TSYEA: name and WDCM were corrected to Listeria monocytogenes 4b WDCM 00021 ;
Multipurpose media
d
— Pre-enrichment for Enterobacteriaceae: added to both Salmonella and deleted “or”
between the 2 WDCM numbers.
Reference media for enumeration of microorganisms
— TSA: deleted “Escherichia coli O157:H7 WDCM 00014 (non-toxigenic)”;
b
— SDA: added WDCM number 00053 to Aspergillus;
— In Annex F
Selective media for enumeration of microorganisms by comparing with a non-selective reference
medium
— Colilert was replaced by Colilert-18 and the WDCM number 00207 was replaced by 00024.
Selective media for enumeration of microorganisms by comparing with a previously accepted
batch (for use in special cases)
— Colilert was replaced by Colilert-18 and the WDCM number 00207 was replaced by 00024;
— Lactose TTC: a line was added between Enterococcus faecalis and Pseudomonas aeruginosa
and the WDCM number corresponding.
Selective enrichment media
— Bolton/Preston Productivity: cocktails of control strains were split in 2 separate cells;
Non-selective liquid media
b
— “Saline salt” was replaced by “Saline solution”, and a was added after 00034;
d b
— mCCDA: was deleted after both species of Campylobacter; was added after 000156.
vi © ISO 2014 – All rights reserved
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 11133:2014(E)
Introduction
In laboratories carrying out microbiological examinations, the main objectives are to maintain,
resuscitate, grow, detect and/or enumerate a wide variety of microorganisms. Culture media are used
in all traditional microbiological culture techniques and also for many alternative techniques. Many
formulae of culture media are commercially available and many more, designed for specific growth
purposes, are described in the literature.
Many tests and procedures depend upon culture media being capable of providing consistent and
reproducible results. The requirements for media may be specific to both the sample and the organisms
to be detected. Culture media meeting established performance criteria are therefore a pre-requisite for
any reliable microbiological work. Sufficient testing should be carried out to demonstrate
a) the acceptability of each batch of medium,
b) that the medium is “fit for purpose”, and
c) that the medium can produce consistent results.
These three criteria are an essential part of internal quality control procedures and, with appropriate
documentation, will permit effective monitoring of culture media and contribute to the production of
both accurate and reliable data. For reliable microbiological analysis it is essential to use culture media
of proven quality. For all media described in standard methods it is essential to define the minimum
acceptance criteria required to ensure their reliability. It is recommended that in the determination
of the performance characteristics of a culture medium tests are carried out that conform with this
International Standard.
The establishment of widely accepted minimum performance criteria for media should lead to products
with more consistent quality and thus reduce the extent of testing necessary in the user’s laboratory.
In addition the acceptance criteria measured by the methods defined in this International Standard
can be used by all microbiological laboratories to evaluate the productive, selective and/or elective
properties of a culture medium.
In the microbiological analysis of food, animal feed and water, the requirements of this International
Standard have precedence in the assessment of culture media quality.
© ISO 2014 – All rights reserved vii
---------------------- Page: 7 ----------------------
INTERNATIONAL STANDARD ISO 11133:2014(E)
Microbiology of food, animal feed and water —
Preparation, production, storage and performance testing
of culture media
1 Scope
This International Standard defines terms related to quality assurance of culture media and specifies
the requirements for the preparation of culture media intended for the microbiological analysis of food,
animal feed, and samples from the food or feed production environment as well as all kinds of water
intended for consumption or used in food production.
These requirements are applicable to all categories of culture media prepared for use in laboratories
performing microbiological analyses.
This International Standard also sets criteria and describes methods for the performance testing of
culture media. This International Standard applies to producers such as:
— commercial bodies producing and/or distributing ready-to-use or semi-finished reconstituted or
dehydrated media;
— non-commercial bodies supplying media to third parties;
— microbiological laboratories preparing culture media for their own use.
2 Normative references
The following documents, in whole or in part, are normatively referenced in this document and are
indispensable for its application. For dated references, only the edition cited applies. For undated
references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 6887-1, Microbiology of food and animal feed — Preparation of test samples, initial suspension and
decimal dilutions for microbiological examination — Part 1: General rules for the preparation of the initial
suspension and decimal dilutions
ISO 6887-2, Microbiology of food and animal feed — Preparation of test samples, initial suspension and
decimal dilutions for microbiological examination — Part 2: Specific rules for the preparation of meat and
meat products
ISO 6887-3, Microbiology of food and animal feed — Preparation of test samples, initial suspension and
decimal dilutions for microbiological examination — Part 3: Specific rules for the preparation of fish and
fishery products
ISO 6887-4, Microbiology of food and animal feed — Preparation of test samples, initial suspension
and decimal dilutions for microbiological examination — Part 4: Specific rules for the preparation of
miscellaneous products
ISO 6887-5, Microbiology of food and animal feeding stuffs — Preparation of test samples, initial suspension
and decimal dilutions for microbiological examination — Part 5: Specific rules for the preparation of milk
and milk products
ISO 6887-6, Microbiology of food and animal feed — Preparation of test samples, initial suspension and
decimal dilutions for microbiological examination — Part 6: Specific rules for the preparation of samples
taken at the primary production stage
ISO 7704, Water quality — Evaluation of membrane filters used for microbiological analyses
© ISO 2014 – All rights reserved 1
---------------------- Page: 8 ----------------------
ISO 11133:2014(E)
ISO 7218, Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements and guidance for
microbiological examinations
ISO 8199, Water quality — General guidance on the enumeration of micro-organisms by culture
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
NOTE 1 This clause gives the general definitions relating to quality assurance of culture media and provides
terminology relating to performance testing, culture media and test microorganisms.
NOTE 2 Tables E.2 and F.2 give explanations of media name abbreviated terms.
3.1 General terms and definitions
3.1.1
quality control
part of quality management focused on fulfilling quality requirements
Note 1 to entry: See Reference [1].
3.1.2
batch of culture medium
lot of culture medium
homogeneous and fully traceable unit of a medium referring to a defined amount of bulk, semi-finished
product or end product, which is consistent in type and quality and which has been produced within one
defined production period, having been assigned the same batch (or lot) number
3.1.3
chromogenic substrate
fluorogenic substrate
substrate containing a chromophore/fluorophore group and a substrate utilizable by bacteria or fungi
Note 1 to entry: After splitting the chromogenic/fluorogenic substrate, the chromophore/fluorophore is released
and a coloured/fluorescent end product becomes visible/can be detected using an ultraviolet (UV) lamp.
3.2 Terminology of performance testing
3.2.1
performance of culture medium
response of a culture medium to challenge by test organisms under defined conditions
3.2.2
target microorganism
microorganism or group of microorganisms to be detected or enumerated
3.2.3
non-target microorganism
microorganism that is suppressed by the medium and/or conditions of incubation or does not show
expected characteristics of the target microorganism
3.2.4
productivity of culture medium
level of recovery of a target microorganism from the culture medium under defined conditions
3.2.5
selectivity of culture medium
degree of inhibition of a non-target microorganism on or in a selective culture medium under defined
conditions
2 © ISO 2014 – All rights reserved
---------------------- Page: 9 ----------------------
ISO 11133:2014(E)
3.2.6
electivity of culture medium
specificity of culture medium
demonstration, under defined conditions, that non-target microorganisms do not show the same visual
characteristics as target microorganisms
3.3 Terminology of culture media
3.3.1
culture medium
formulation of substances, in liquid, semi-solid or solid form, which contain natural and/or
synthetic constituents intended to support the multiplication, (with or without inhibition of certain
microorganisms), identification or preservation of viability of microorganisms
Note 1 to entry: When used in connection with compound words, this term is often shortened to read “medium”
(e.g. enrichment medium).
3.3.2 Culture media classified by composition
3.3.2.1
chemically defined medium
culture medium consisting only of chemically defined constituents of known molecular structure and
degree of purity
3.3.2.2
chemically undefined or partially undefined medium
culture medium consisting entirely or partly of natural materials, processed or otherwise, the chemical
composition of which is not completely defined
Note 1 to entry: Harmonized designations for various chemically undefined components used in culture media
are specified in Annex A.
3.3.2.3
chromogenic culture medium
fluorogenic culture medium
culture medium containing one or more chromogenic/fluorogenic substrates
Note 1 to entry: Chromogenic culture media facilitate the identification of bacteria or fungi by means of
defined colour and morphological characteristics (culture medium typical growth). Fluorogenic media require
visualization using a UV lamp. The biochemical reaction products, which are necessary for the efficiency of
chromogenic/fluorogenic culture media, are normally the result of the enzymatic activity of certain organisms,
which in turn depends greatly on the precise maintenance of specific conditions (e.g. temperature, pH value,
concentrations of substrate).
3.3.3 Culture media classified by physical consistency
3.3.3.1
liquid medium
culture medium consisting of an aqueous solution of one or more constituents, such as peptone water
and nutrient broth
Note 1 to entry: In some cases, solid particles are added to the liquid culture medium, such as cooked meat medium.
Note 2 to entry: Liquid media in tubes, flasks or bottles are commonly called “broths”.
3.3.3.2
solid medium
semi-solid medium
liquid medium containing solidifying substances (e.g. agar-agar, gelatin) in different concentrations
Note 1 to entry: Due to the worldwide use of media solidified with agar-agar, the shortened term “agar” is often
used synonymously for solid media and therefore in connection with nouns, e.g. “Plate Count agar”.
© ISO 2014 – All rights reserved 3
---------------------- Page: 10 ----------------------
ISO 11133:2014(E)
Note 2 to entry: Solid media poured into Petri dishes are commonly called “plates”. Solid media poured into tubes
or small bottles that are kept in slanted positions while the media are solidifying are often called “slants” or
“slopes”. If the medium is dispensed to fill the bottom of the container, this forms a “butt”.
3.3.4 Culture media classified according to their use
3.3.4.1
transport medium
medium designed to preserve and maintain the viability of microorganisms whilst minimising numerical
change in the time period between sample collection and laboratory processing of the sample
EXAMPLE Stuart or Amies transport medium
3.3.4.2
preservation medium
medium designed to preserve and maintain the viability of microorganisms over an extended period,
to protect them against the adverse influences which may occur during long-term storage and to allow
recovery after this period
EXAMPLE Dorset egg medium, nutrient agar slopes
3.3.4.3
diluent medium
suspension medium
medium designed to separate microorganisms from a solid test product into a liquid phase and/or to
reduce their concentration by dilution without multiplication or inhibition during the time of contact
EXAMPLE Peptone salt solution
3.3.4.4
resuscitation medium
medium enabling stressed and damaged microorganisms to repair and recover their capacity for normal
growth without necessarily promoting their multiplication
EXAMPLE Buffered peptone water
Note 1 to entry: A resuscitation medium may also be used as a pre-enrichment medium, e.g. buffered peptone
water.
3.3.4.5
pre-enrichment medium
enrichment medium
generally liquid medium which, due to its composition, provides particularly favourable conditions for
multiplication of microorganisms
EXAMPLE Tryptone soya broth
3.3.4.5.1
selective enrichment medium
enrichment medium that allows the multiplication of specific microorganisms whilst partially or totally
inhibiting the growth of other microorganisms
EXAMPLE Rappaport-Vassiliadis soya pepton
...
DRAFT INTERNATIONAL STANDARD ISO/DIS 11133
ISO/TC 34/SC 9 Secretariat: AFNOR
Voting begins on Voting terminates on
2012-08-02 2013-01-02
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION МЕЖДУНАРОДНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Microbiology of food, animal feed and water — Preparation,
production, storage and performance testing of culture media
Microbiologie des aliments et de l'eau — Préparation, production, stockage et essais de performance des
milieux de culture
[Revision of second edition (ISO 11133-1:2009), first edition of ISO 11133-2-2003 and
ISO 11133-2:2003/Amd.1:2011]
ICS 07.100.30
ISO/CEN PARALLEL PROCESSING
This draft has been developed within the International Organization for Standardization (ISO), and
processed under the ISO-lead mode of collaboration as defined in the Vienna Agreement.
This draft is hereby submitted to the ISO member bodies and to the CEN member bodies for a parallel
five-month enquiry.
Should this draft be accepted, a final draft, established on the basis of comments received, will be
submitted to a parallel two-month approval vote in ISO and formal vote in CEN.
To expedite distribution, this document is circulated as received from the committee
secretariat. ISO Central Secretariat work of editing and text composition will be undertaken at
publication stage.
Pour accélérer la distribution, le présent document est distribué tel qu'il est parvenu du
secrétariat du comité. Le travail de rédaction et de composition de texte sera effectué au
Secrétariat central de l'ISO au stade de publication.
THIS DOCUMENT IS A DRAFT CIRCULATED FOR COMMENT AND APPROVAL. IT IS THEREFORE SUBJECT TO CHANGE AND MAY NOT BE
REFERRED TO AS AN INTERNATIONAL STANDARD UNTIL PUBLISHED AS SUCH.
IN ADDITION TO THEIR EVALUATION AS BEING ACCEPTABLE FOR INDUSTRIAL, TECHNOLOGICAL, COMMERCIAL AND USER PURPOSES,
DRAFT INTERNATIONAL STANDARDS MAY ON OCCASION HAVE TO BE CONSIDERED IN THE LIGHT OF THEIR POTENTIAL TO BECOME
STANDARDS TO WHICH REFERENCE MAY BE MADE IN NATIONAL REGULATIONS.
RECIPIENTS OF THIS DRAFT ARE INVITED TO SUBMIT, WITH THEIR COMMENTS, NOTIFICATION OF ANY RELEVANT PATENT RIGHTS OF WHICH
THEY ARE AWARE AND TO PROVIDE SUPPORTING DOCUMENTATION.
© International Organization for Standardization, 2012
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO/DIS 11133
Copyright notice
This ISO document is a Draft International Standard and is copyright-protected by ISO. Except as permitted
under the applicable laws of the user’s country, neither this ISO draft nor any extract from it may be
reproduced, stored in a retrieval system or transmitted in any form or by any means, electronic,
photocopying, recording or otherwise, without prior written permission being secured.
Requests for permission to reproduce should be addressed to either ISO at the address below or ISO’s
member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Reproduction may be subject to royalty payments or a licensing agreement.
Violators may be prosecuted.
ii © ISO 2012 – All rights reserved
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO/DIS 11133
Contents Page
Foreword . vi
Introduction . vii
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 General terms and definitions . 4
3.1 Introduction . 4
3.2 General terminology . 4
3.3 Terminology of performance testing . 5
3.4 Terminology of culture media . 5
3.5 Terminology for test microorganisms . 9
4 Quality assurance management . 10
4.1 Documentation . 10
4.1.1 Documentation from manufacturer or producer . 10
4.1.2 Delivery acceptance of products . 10
4.2 Storage . 11
4.2.1 General . 11
4.2.2 Quality management and product control of dehydrated media and supplements . 11
4.3 Laboratory preparation of media . 11
4.3.1 General . 11
4.3.2 Quality of basic medium components . 11
4.3.3 Water . 12
4.3.4 Weighing and rehydration . 12
4.3.5 Dissolution and dispersion . 12
4.3.6 Measurement and adjustment of pH . 13
4.3.7 Dispensing . 13
4.3.8 Sterilization . 13
4.4 Storage and shelf life of prepared media . 14
4.4.1 Commercially supplied ready-to-use media . 14
4.4.2 Laboratory prepared media . 14
4.4.3 Storage of media in Petri dishes . 15
4.5 Preparation for use . 15
4.5.1 Melting of agar culture media . 15
4.5.2 De-aeration of culture media . 15
4.5.3 Addition of supplements . 15
4.5.4 Preparation of solid media in Petri dishes . 15
4.5.5 Incubation of solid media in Petri dishes . 16
4.6 Disposal of media . 16
5 Test organisms for performance testing . 16
5.1 Selection of test organisms . 16
5.2 Preservation and maintenance of test organisms . 17
5.2.1 General . 17
5.2.2 Test organisms from commercial sources . 17
5.2.3 Laboratory prepared reference stocks . 17
5.2.4 Stock cultures . 17
5.2.5 Working cultures . 17
5.3 Test microorganisms for routine performance testing . 18
5.3.1 General . 18
5.3.2 Preparation . 18
6 Performance testing of finished culture media . 20
© ISO 2012 – All rights reserved iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO/DIS 11133
6.1 General requirements .20
6.1.1 General quality criteria .20
6.2 Physical and chemical quality control .21
6.3 Microbiological quality control .21
6.3.1 General .21
6.3.2 Reference medium .21
6.3.3 Microbial contamination .22
6.4 General requirements for microbiological performance testing .22
6.4.1 General .22
6.4.2 Ready-to-use media .22
6.4.3 Media prepared from commercially available dehydrated formulations .23
6.4.4 Media prepared from basic individual components .23
6.5 Performance evaluation and interpretation of results .23
6.6 Confirmation media and reagents .23
6.6.1 Confirmation media .23
6.6.2 Confirmation reagents .23
7 Methods for performance testing of solid culture media .23
7.1 General .23
7.2 Methods for quantitative tests .24
7.2.1 Definitions .24
7.2.2 Quantitative method for solid culture media .24
7.3 Testing of culture media used for membrane filtration .26
7.4 Methods for qualitative tests .26
7.4.1 Qualitative streaking method .26
7.4.2 Determination of specificity .27
7.4.3 Other qualitative methods for solid media .27
8 Methods for performance testing of liquid culture media .27
8.1 General .27
8.2 Quantitative tube method for performance testing of liquid enrichment media (dilution to
extinction method) .27
8.2.1 General .27
8.2.2 Preparation of the dilution series .27
8.2.3 Procedure for the target organism .28
8.2.4 Calculation and interpretation of results .28
8.3 Qualitative tube method for performance testing of selective liquid media .28
8.3.1 General .28
8.3.2 Procedure .28
8.3.3 Calculation and interpretation of results .29
8.4 Qualitative single tube method (turbidity) for performance testing of liquid media .29
8.4.1 General .29
8.4.2 Procedure .29
8.4.3 Interpretation of results .30
9 Methods for performance testing of diluents and transport media .30
9.1 General .30
9.2 Method for testing diluents .30
9.2.1 Method for quantitative testing of diluents .30
9.3 Method for testing transport media .31
9.3.1 General .31
9.3.2 Method for quantitative testing of liquid transport media .31
9.3.3 Method for qualitative testing of solid transport media .31
10 Documentation of test results .32
10.1 Information provided by the manufacturer .32
10.2 Traceability .32
Annex A (informative) Designation of the components of the culture media in standards on
microbiological analysis of food, animal feed and water .33
A.1 General .33
iv © ISO 2012 – All rights reserved
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO/DIS 11133
A.2 Peptones . 33
A.3 Extracts . 33
A.4 Agar . 33
A.5 Other . 34
Annex B (normative) Preparation of reference stock and working culture . 35
B.1 Preparation of reference stock from a reference strain . 35
B.1 Preparation of working culture from reference stock . 36
Annex C (normative) Flow charts of methods for performance testing (7) . 37
C.1 Quantitative method for solid culture media: Productivity and Selectivity (7.2.2) . 37
C.2 Quantitative tube method for performance testing of liquid enrichment media - dilution to
extinction method (8.2) . 38
C.3 Qualitative single tube method for selective enrichment media (with target, non-target, or
a mixture of target and non-target microorganisms in the same tube) (8.3) . 39
C.4 Qualitative single tube method for non-selective and selective liquid media: turbidity (8.4) . 40
Annex D (informative) Example of card for recording test results of culture media prepared by the
user laboratory . 41
Annex E (normative) Test microorganisms for culture media commonly used in food
microbiology (giving information on the culture medium, culture conditions, test
microorganisms, culture collection number of test organisms and the expected
reactions) . 42
Annex F (normative) Test microorganisms for culture media commonly used in water
microbiology . 64
Annex G (normative) Use of control charts to monitor quantitative testing of solid culture media . 78
G.1 Using control charts . 78
G.1.1 General validation procedure . 78
G.1.2 Production of a control chart . 78
G.1.3 Performance evaluation and interpretation of results . 81
Annex H (informative) Quality assurance of culture media – Troubleshooting . 82
Annex I (informative) Quantitative testing of liquid media . 83
I.1 General . 83
I.2 Method for quantitative testing of non-selective liquid culture media using target
microorganisms . 83
I.2.1 Procedure . 83
I.2.2 Counting and interpretation of results . 83
I.2.3 Flow chart for quantitative method for non-selective liquid culture media using target
microorganisms . 84
I.3 Method for quantitative testing of selective liquid culture media using target and non
target microorganisms . 84
I.3.1 Procedure . 84
I.3.2 Reading, calculation and interpretation of results . 85
I.3.3 Flow chart for quantitative method for selective liquid culture media using target and
non-target microorganisms . 86
Annex J (normative) Definition of microbiological performance tests for standardized culture
media . 87
J.1 General . 87
J.2 Performance criteria, methods and targets . 87
J.3 Choice of performance control strains . 89
J.3.1 General . 89
J.3.2 Assessment of suitability of new control strains . 89
J.3.3 New media . 89
J.3.4 Number of strains per criterion . 90
Bibliography . 91
© ISO 2012 – All rights reserved v
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO/DIS 11133
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 11133 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9, Food
products, in collaboration with Technical Committee ISO/TC 147 Water quality, Subcommittee SC 4,
Microbiological methods, and by Technical Committee CEN/TC 275, Food analysis - Horizontal methods.
Annexes A, D, H and I are informative. Annexes B, C E, F, G and J are normative.
This document combines the previously published two parts of ISO/TS 11133 and also includes requirements
for microbiology media for water testing.
This document includes a Bibliography.
vi © ISO 2012 – All rights reserved
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO/DIS 11133
Introduction
In laboratories carrying out microbiological examinations, the main objectives are to maintain, resuscitate,
grow, detect and/or enumerate a wide variety of microorganisms. Culture media are used in all traditional
microbiological culture techniques and also for many alternative techniques. Many formulae of culture media
are commercially available and many more, designed for specific growth purposes, are described in the
literature.
Many tests and procedures depend upon culture media being capable of providing consistent and
reproducible results. The requirements for media may be specific to both the sample and the organisms to be
detected. Culture media meeting established performance criteria are therefore a pre-requisite for any reliable
microbiological work. Sufficient testing should be carried out to demonstrate
I) the acceptability of each batch of medium ;
II) that the medium is ‘fit for purpose’ and
III) that the medium can produce consistent results.
These three criteria are an essential part of internal quality control procedures and, with appropriate
documentation, will permit effective monitoring of culture media and contribute to the production of both
accurate and reliable data. For reliable microbiological analysis it is essential to use culture media of proven
quality. For all media described in standard methods it is essential to define the minimum acceptance criteria
required to assure their reliability. It is recommended that in the determination of the performance
characteristics of a culture medium tests are carried out that conform with this International Standard.
The establishment of widely accepted minimum performance criteria for media should lead to products with
more consistent quality and thus reduce the extent of testing necessary in the user’s laboratory.
In addition the acceptance criteria measured by the methods defined in this International Standard can be
used by all microbiological laboratories to evaluate the productive, selective and/or elective properties of a
culture medium.
In the microbiological analysis of
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 11133
Première édition
2014-05-15
Version corrigée
2014-11-01
Microbiologie des aliments, des
aliments pour animaux et de l’eau —
Préparation, production, stockage et
essais de performance des milieux de
culture
Microbiology of food, animal feed and water — Preparation,
production, storage and performance testing of culture media
Numéro de référence
ISO 11133:2014(F)
©
ISO 2014
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 11133:2014(F)
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2014
Droits de reproduction réservés. Sauf indication contraire, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée
sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie, l’affichage sur
l’internet ou sur un Intranet, sans autorisation écrite préalable. Les demandes d’autorisation peuvent être adressées à l’ISO à
l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2014 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 11133:2014(F)
Sommaire Page
Avant-propos .v
Introduction .viii
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 2
3.1 Termes généraux et définitions . 2
3.2 Terminologie relative aux essais de performance . 2
3.3 Terminologie relative aux milieux de culture . 3
3.4 Terminologie relative aux micro-organismes test . 7
4 Gestion de l’assurance qualité . 8
4.1 Documentation . 8
4.2 Stockage . 9
4.3 Préparation des milieux en laboratoire . 9
4.4 Stockage et durée de conservation des milieux préparés .12
4.5 Préparation avant utilisation .13
4.6 Incubation des milieux solides en boîtes de Petri .15
4.7 Mise au rebut des milieux .15
5 Souches test pour essais de performance .15
5.1 Généralités .15
5.2 Sélection des souches test .15
5.3 Conservation et entretien des souches test .16
5.4 Micro-organismes pour essais de performance .17
6 Contrôle qualité et essais de performance des milieux de culture .20
6.1 Exigences générales .20
6.2 Contrôle de la qualité physique et chimique .20
6.3 Contrôle de la qualité microbiologique .20
6.4 Exigences générales relatives aux essais de performance microbiologique .21
6.5 Évaluation de performance et interprétation des résultats .23
6.6 Milieux et réactifs de confirmation.23
7 Méthodes pour les essais de performance des milieux de culture solides.23
7.1 Généralités .23
7.2 Méthodes pour les essais quantitatifs .23
7.3 Essais des milieux de culture utilisés pour la filtration sur membrane .26
7.4 Méthodes pour essais qualitatifs .26
8 Méthodes pour les essais de performance des milieux de culture liquides .27
8.1 Généralités .27
8.2 Méthode quantitative en tubes pour les essais de performance des milieux
d’enrichissement liquides (méthode de dilution jusqu’à extinction) .27
8.3 Méthode qualitative en tubes pour les essais de performance des milieux
liquides sélectifs.28
8.4 Méthode qualitative dans un seul tube (turbidité) pour les essais de performance des
milieux liquides .29
9 Méthodes pour les essais de performance des diluants et des milieux de transport .30
9.1 Généralités .30
9.2 Méthode d’évaluation des diluants .30
9.3 Méthode d’évaluation des milieux de transport .31
10 Documentation des résultats d’essai .32
10.1 Informations fournies par le fabricant .32
10.2 Traçabilité .32
Annexe A (informative) Dénomination des composants des milieux de culture dans les Normes
© ISO 2014 – Tous droits réservés iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 11133:2014(F)
internationales d’analyse microbiologique des aliments, des aliments pour animaux et
des eaux .33
Annexe B (normative) Préparation du stock de référence et de la culture de travail.35
Annexe C (normative) Logigrammes des méthodes pour les essais de performance .40
Annexe D (informative) Exemple de fiche de contrôle pour l’enregistrement des résultats des
essais des milieux de culture .45
Annexe E (normative) Micro-organismes test et critères de performance pour les milieux de
culture couramment utilisés en microbiologie alimentaire .47
Annexe F (normative) Micro-organismes test et critères de performance pour les milieux de
culture couramment utilisés en microbiologie des eaux .70
Annexe G (normative) Utilisation de cartes de contrôle pour le suivi des essais quantitatifs des
milieux de culture solides .82
Annexe H (informative) Assurance qualité des milieux de culture — Diagnostic d’anomalie .89
Annexe I (informative) Essais quantitatifs des milieux liquides .91
Annexe J (normative) Détermination des essais de performance microbiologique pour les milieux
de culture normalisés .95
Bibliographie .99
iv © ISO 2014 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 11133:2014(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne
la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www.
iso.org/directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant les
références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de l’élaboration
du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de brevets reçues par
l’ISO (voir www.iso.org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la signification des termes et expressions spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation
de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion de l’ISO aux principes de l’OMC
concernant les obstacles techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant:
Avant-propos — Informations supplémentaires.
Le comité chargé de l’élaboration du présent document est l’ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-
comité SC 9, Microbiologie, en collaboration avec le comité technique ISO/TC 147 Qualité de l’eau, sous-
comité SC 4, Méthodes microbiologiques.
Cette première édition de l’ISO 11133 remplace la deuxième édition de l’ISO/TS 11133-1 (ISO/TS 11133-
1:2009) et la première édition de l’ISO/TS 11133-2:2003, qui ont fait l’objet d’une révision technique.
Elle intègre l’Amendement ISO/TS 11133-2:2003/Amd.1:2011. En particulier, elle inclut également
des exigences applicables aux milieux de culture de microbiologie destinés à l’analyse des eaux. Elle
remplace l’ISO 9998:1991.
La présente version corrigée de l’ISO 11133:2014 comprend les corrections suivantes.
— Au paragraphe 8.3.2, 6ème tiret, mise à jour de la référence 5.4.2.6.
— Dans l’Annexe E
Milieux sélectifs pour le dénombrement des microorganismes
— IS Productivité : correction du critère;
— mCCDA Productivité : remplacement du milieu de référence “TSA” par “Gélose au sang”,
corrections des renvois aux notes de bas de tableau, correction du critère;
— mCCDA Sélectivité : ajout des critères;
d
, corrections des notes de bas de tableau;
— TBX Productivité : ajout du numéro WDCM 00012
© ISO 2014 – Tous droits réservés v
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 11133:2014(F)
Milieux d’enrichissement sélectifs
— Bolton Productivité : cocktails de souches répartis dans 2 cellules du tableau distinctes;
— EE Productivité : corrections des renvois aux notes de bas de tableau;
— l’en-tête entre les milieux EE et Fraser a été supprimé;
— ITC Productivité : cocktails de souches répartis dans 2 cellules du tableau distinctes;
— Brucella : corrections des renvois aux notes de bas de tableau;
Milieux liquides non sélectifs
— EPT et Ringer : pour la souche E. coli, corrections des renvois aux notes de bas de tableau;
Milieux d’isolement sélectifs
— Gélose Listeria : réalignement de la Fonction Spécificité avec la souche Listeria innocua;
— VRBG Productivité : ajout de Salmonella Enteritidis WDCM 00030, corrections des renvois
aux notes de bas de tableau;
Milieux d’isolement non sélectifs
— Gélose nutritive : correction des numéros WDCM;
Milieux à usages multiples
— Ajout du milieu Gélose au sang et de ses caractéristiques;
— EPT : norme ISO 21528-1, correction des souches et de leurs numéros WDCM;
— TSA : retrait de E.coli O157 :H7 et de son numéro WDCM 00014 (non-toxigénique);
— Dans l’Annexe F
Milieux sélectifs pour le dénombrement des micro-organismes par comparaison avec un milieu
de référence non sélectif
— Colilert : remplacement par Colilert-18 et changement du numéro WDCM 00207 de la souche
Pseudomonas aeruginosa par 00024;
— Slanetz : ajout d’un renvoi aux notes de bas de tableau;
— Sulfite de fer/TS et TSC : milieu de référence modifié par “TSA ou autre milieu non sélectif
pour les anaérobies ou gélose au sang”;
Milieux sélectifs pour le dénombrement des micro-organismes par comparaison avec un lot
précédemment accepté
— Colilert : remplacement par Colilert-18 et changement du numéro WDCM 00207 de la souche
Pseudomonas aeruginosa par 00024;
Milieux liquides non sélectifs
— Sel : remplacement de “sel” par “solution saline”;
Milieux d’isolement sélectifs
— XLD : ajout d’un renvoi aux notes de bas de tableau
— EPT : ajout d’un renvoi aux notes de bas de tableau;
vi © ISO 2014 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 11133:2014(F)
— TSA : ajout d’un renvoi aux notes de bas de tableau et de nouvelles souches de E. coli de
numéros WDCM 00012, 00013, et 00179.
© ISO 2014 – Tous droits réservés vii
---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO 11133:2014(F)
Introduction
Dans les laboratoires pratiquant des examens microbiologiques, les principaux objectifs sont la
conservation, la revivification, la croissance, la recherche et/ou le dénombrement d’une grande
variété de micro-organismes. Les milieux de culture sont utilisés dans toutes les méthodes de culture
microbiologique traditionnelles comme dans de nombreuses autres méthodes alternatives. Il existe de
nombreuses formules de milieux de culture disponibles dans le commerce et un plus grand nombre
encore, destinées à des utilisations spécifiques, sont décrites dans la littérature.
De nombreux essais et modes opératoires dépendent de l’aptitude des milieux de culture à donner des
résultats homogènes et reproductibles. Les exigences relatives aux milieux peuvent être spécifiques à
la fois à l’échantillon et aux souches à rechercher. Des milieux de culture satisfaisant à des critères de
performance établis constituent donc un préalable à toute analyse microbiologique fiable. Il convient
d’effectuer un nombre suffisant d’essais afin de démontrer
a) que chaque lot de milieu est acceptable,
b) que le milieu répond aux besoins et
c) que le milieu peut donner des résultats homogènes.
Ces trois critères constituent une part essentielle des procédures internes de contrôle qualité et, avec
la documentation appropriée, permettent une surveillance efficace des milieux de culture, contribuant
ainsi à l’obtention de données exactes et fiables. Pour une analyse microbiologique fiable, il est essentiel
d’utiliser des milieux de culture de qualité reconnue. Pour tous les milieux décrits dans les méthodes
normalisées, il est indispensable de définir les critères d’acceptation minimaux nécessaires pour garantir
leur fiabilité. Il est recommandé, pour la détermination des caractéristiques de performance d’un milieu
de culture, de procéder à des essais conformes à la présente Norme internationale.
Il convient que l’établissement de critères de performance minimaux largement acceptés pour les milieux
conduise à des produits de qualité plus homogène, et réduise le nombre d’analyses supplémentaires
dans les laboratoires où ils sont utilisés.
En outre, les critères d’acceptation mesurés selon des méthodes définies dans la présente Norme
internationale peuvent être utilisés par tous les laboratoires de microbiologie pour évaluer le caractère
productif, sélectif et/ou électif d’un milieu de culture.
Les exigences relatives à l’analyse microbiologique des aliments, des aliments pour animaux et de l’eau
contenues dans la présente Norme internationale prévalent dans l’évaluation de la qualité des milieux
de culture.
viii © ISO 2014 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 8 ----------------------
NORME INTERNATIONALE ISO 11133:2014(F)
Microbiologie des aliments, des aliments pour animaux et
de l’eau — Préparation, production, stockage et essais de
performance des milieux de culture
1 Domaine d’application
La présente Norme internationale définit les termes relatifs à l’assurance qualité des milieux de culture
et spécifie les exigences relatives à la préparation des milieux de culture destinés à être appliqués pour
l’analyse microbiologique des aliments, des aliments pour animaux et des d’échantillons de la production
d’aliments et d’aliments pour animaux ainsi que de tous les types d’eau destinés à la consommation ou
utilisés dans la production alimentaire.
Ces exigences sont applicables à toutes catégories de milieux de culture préparés pour être utilisés dans
les laboratoires qui réalisent des analyses microbiologiques.
La présente Norme internationale définit également des critères et décrit des méthodes pour les essais
de performance des milieux de culture. La présente Norme internationale s’applique aux producteurs
tels que:
— les entités commerciales qui produisent et/ou distribuent des milieux prêts à l’emploi, semi-finis
reconstitués ou déshydratés,
— les entités non commerciales qui fournissent des milieux à des tiers,
— les laboratoires de microbiologie qui préparent des milieux de culture pour leur propre usage.
2 Références normatives
Les documents ci-après, dans leur intégralité ou non, sont des références normatives indispensables à
l’application du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour les
références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les éventuels
amendements).
ISO 6887-1, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des
dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique — Partie 1: Règles générales pour la préparation de
la suspension mère et des dilutions décimales.
ISO 6887-2, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des
dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique — Partie 2: Règles spécifiques pour la préparation
des viandes et produits à base de viande.
ISO 6887-3, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des
dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique — Partie 3: Règles spécifiques pour la préparation
des produits de la pêche.
ISO 6887-4, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des
dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique — Partie 4: Règles spécifiques pour la préparation
des produits autres que les produits laitiers, les produits carnés et les produits de la pêche.
ISO 6887-5, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des
dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique — Partie 5: Règles spécifiques pour la préparation
du lait et des produits laitiers.
© ISO 2014 – Tous droits réservés 1
---------------------- Page: 9 ----------------------
ISO 11133:2014(F)
ISO 6887-6, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des
dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique — Partie 6: Règles spécifiques pour la préparation
des échantillons prélevés au stade de production primaire.
ISO 7704, Qualité de l’eau — Évaluation des membranes filtrantes utilisées pour des analyses microbiologiques.
ISO 7218, Microbiologie des aliments — Exigences générales et recommandations.
ISO 8199, Qualité de l’eau — Lignes directrices générales pour le dénombrement des micro-organismes sur
milieu de culture.
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
NOTE 1 Le présent article donne les définitions générales relatives à l’assurance qualité des milieux de culture
et fournit la terminologie relative aux essais de performance, aux milieux de culture et aux micro-organismes
test.
NOTE 2 Les Tableaux E.2 et F.2 donnent des explications sur les noms abrégés des milieux.
3.1 Termes généraux et définitions
3.1.1
maîtrise de la qualité
partie du management de la qualité axée sur la satisfaction des exigences pour la qualité
Note 1 à l’article: Voir Référence [1].
3.1.2
lot de milieu de culture
unité de milieu homogène et conforme aux exigences de traçabilité, correspondant à une quantité définie
de produits en vrac, de produits semi-finis ou finis, de type et de qualité homogènes, qui a été produite
au cours d’une période définie et identifiés sous un même numéro de lot
3.1.3
substrat chromogène
substrat fluorogène
substrat contenant un groupement chromophore/fuorophore et un substrat utilisable par des bactéries
ou des champignons
Note 1 à l’article: après avoir divisé le substrat chromogène/fluorogène, le chromophore/fluorogène est libéré et
un produit final coloré ou fluorescent devient visible/peut être détecté, en utilisant une lampe à rayons ultraviolets
(UV) si nécessaire.
3.2 Terminologie relative aux essais de performance
3.2.1
performance d’un milieu de culture
réponse d’un milieu de culture soumis à une souche test dans des conditions définies
3.2.2
micro-organisme cible
micro-organisme ou groupe de micro-organismes à rechercher ou à dénombrer
3.2.3
micro-organisme non cible
micro-organisme qui est supprimé par le milieu et/ou les conditions d’incubation ou qui ne présente pas
les caractéristiques attendues du micro-organisme cible
2 © ISO 2014 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 10 ----------------------
ISO 11133:2014(F)
3.2.4
productivité d’un milieu de culture
taux de récupération d’un micro-organisme cible à partir d’un milieu de culture dans des conditions
définies
3.2.5
sélectivité d’un milieu de culture
degré d’inhibition d’un micro-organisme non cible sur ou dans un milieu de culture sélectif dans des
conditions définies
3.2.6
électivité d’un milieu de culture
spécificité d’un milieu de culture
démonstration de caractéristiques visuelles spécifiées, dans des conditions définies, par les micro-
organismes cibles mais non par les micro-organismes non cibles
3.3 Terminologie relative aux milieux de culture
3.3.1
milieu de culture
mélange de substances, sous forme liquide, semi-solide ou solide, qui contient des constituants naturels
et/ou synthétiques permettant la croissance des micro-organismes (avec ou sans inhibition de certains
d’entre eux), leur identification ou leur conservation
Note 1 à l’article: lorsque cette expression est utilisée en combinaison avec d’autres mots, on l’abrège souvent pour
n’utiliser que le terme «milieu» (par exemple, milieu d’enrichissement).
3.3.2 Milieux de culture classés par composition
3.3.2.1
milieu chimiquement défini
milieu de culture exclusivement composé de constituants chimiquement définis dont la structure
moléculaire et le degré de pureté sont connus
3.3.2.2
milieu chimiquement indéfini ou partiellement indéfini
milieu de culture entièrement ou partiellement composé de matières premières naturelles ayant subi
une transformation ou tout autre traitement, dont la composition chimique n’est pas complètement
définie
Note 1 à l’article: une liste harmonisée des désignations des différents composants chimiquement indéfinis
utilisés dans les milieux de culture est spécifiée à l’Annexe A.
3.3.2.3
milieu de culture chromogène
milieu de culture fluorogène
milieu de culture contenant un ou plusieurs substrats chromogènes/fluorogènes
Note 1 à l’article: les milieux de culture chromogènes facilitent l’identification des bactéries ou des champignons
au moyen d’une couleur définie et de caractéristiques morphologiques (croissance typique du milieu de culture).
Les milieux fluorogènes nécessitent d’être interprétés à l’aide d’une lampe UV. Les produits issus de réaction
biochimiques nécessaires à l’efficacité des milieux de culture chromogènes/fluorogènes sont normalement le
résultat de l’activité enzymatique de certains organismes, laquelle dépend grandement du maintien précis de
conditions spécifiques (par exemple, température, valeur de pH, concentrations du substrat).
3.3.3 Milieux de culture classés par consistance
© ISO 2014 – Tous droits réservés 3
---------------------- Page: 11 ----------------------
ISO 11133:2014(F)
3.3.3.1
milieu liquide
milieu de culture consistant en une solution aqueuse d’un ou de plusieurs constituants, tel que l’eau
peptonée et le bouillon nutritif
Note 1 à l’article: dans certains cas, des particules solides sont ajoutées au milieu de culture liquide, tel que le
milieu de viande cuite.
Note 2 à l’article: les milieux liquides répartis dans des tubes, des fioles ou flacons sont couramment appelés
«bouillons».
3.3.3.2
milieu solide
milieu semi-solide
milieu liquide contenant des produits gélifiants (par exemple, agar-agar, gélatine) à différentes
concentrations
Note 1 à l’article: étant donné que les milieux gélosés
...
PROJET DE NORME INTERNATIONALE ISO/DIS 11133
ISO/TC 34/SC 9 Secrétariat: AFNOR
Début de vote Vote clos le
2012-08-02 2013-01-02
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION • МЕЖДУНАРОДНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ • ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Microbiologie des aliments et de l'eau — Préparation,
production, stockage et essais de performance des milieux de
culture
Microbiology of food, animal feed and water — Preparation, production, storage and performance testing of
culture media
[Révision de la deuxième édition (ISO 11133-1:2009), première édition de l’ISO 11133-2:2003 et de
l’ISO 11133-3:2003/Amd.1:2011]
ICS 07.100.30
TRAITEMENT PARALLÈLE ISO/CEN
Le présent projet a été élaboré dans le cadre de l'Organisation internationale de normalisation (ISO)
et soumis selon le mode de collaboration sous la direction de l'ISO, tel que défini dans l'Accord de
Vienne.
Le projet est par conséquent soumis en parallèle aux comités membres de l'ISO et aux comités
membres du CEN pour enquête de cinq mois.
En cas d'acceptation de ce projet, un projet final, établi sur la base des observations reçues, sera
soumis en parallèle à un vote d'approbation de deux mois au sein de l'ISO et à un vote formel au sein
du CEN.
Pour accélérer la distribution, le présent document est distribué tel qu'il est parvenu du
secrétariat du comité. Le travail de rédaction et de composition de texte sera effectué au
Secrétariat central de l'ISO au stade de publication.
To expedite distribution, this document is circulated as received from the committee
secretariat. ISO Central Secretariat work of editing and text composition will be undertaken at
publication stage.
CE DOCUMENT EST UN PROJET DIFFUSÉ POUR OBSERVATIONS ET APPROBATION. IL EST DONC SUSCEPTIBLE DE MODIFICATION ET NE PEUT
ÊTRE CITÉ COMME NORME INTERNATIONALE AVANT SA PUBLICATION EN TANT QUE TELLE.
OUTRE LE FAIT D'ÊTRE EXAMINÉS POUR ÉTABLIR S'ILS SONT ACCEPTABLES À DES FINS INDUSTRIELLES, TECHNOLOGIQUES ET
COMMERCIALES, AINSI QUE DU POINT DE VUE DES UTILISATEURS, LES PROJETS DE NORMES INTERNATIONALES DOIVENT PARFOIS ÊTRE
CONSIDÉRÉS DU POINT DE VUE DE LEUR POSSIBILITÉ DE DEVENIR DES NORMES POUVANT SERVIR DE RÉFÉRENCE DANS LA
RÉGLEMENTATION NATIONALE.
LES DESTINATAIRES DU PRÉSENT PROJET SONT INVITÉS À PRÉSENTER, AVEC LEURS OBSERVATIONS, NOTIFICATION DES DROITS DE PRO-
PRIÉTÉ DONT ILS AURAIENT ÉVENTUELLEMENT CONNAISSANCE ET À FOURNIR UNE DOCUMENTATION EXPLICATIVE.
© Organisation Internationale de Normalisation, 2012
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO/DIS 11133
Notice de droit d'auteur
Ce document de l'ISO est un projet de Norme internationale qui est protégé par les droits d'auteur de l'ISO.
Sauf autorisé par les lois en matière de droits d'auteur du pays utilisateur, aucune partie de ce projet ISO ne
peut être reproduite, enregistrée dans un système d'extraction ou transmise sous quelque forme que ce soit
et par aucun procédé électronique ou mécanique, y compris la photocopie, les enregistrements ou autres,
sans autorisation écrite préalable.
Les demandes d'autorisation de reproduction doivent être envoyées à l'ISO à l'adresse ci-après ou au
comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Toute reproduction est soumise au paiement de droits ou à un contrat de licence.
Les contrevenants pourront être poursuivis.
ii © ISO 2012 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO/DIS 11133
Sommaire Page
Avant-propos .vii
Introduction.viii
1 Domaine d'application .1
2 Références normatives.1
3 Termes généraux et définitions .5
3.1 Introduction.5
3.2 Terminologie générale .5
3.3 Terminologie relative aux essais de performance.5
3.4 Terminologie relative aux milieux de culture .5
3.5 Terminologie relative aux micro-organismes d’essai .9
4 Gestion de l’assurance qualité .10
4.1 Documentation .10
4.1.1 Documentation fournie par le fabricant ou par le producteur.10
4.1.2 Acceptation des produits à la livraison .10
4.2 Stockage.11
4.2.1 Généralités .11
4.2.2 Maîtrise de la qualité et contrôle des milieux déshydratés et des suppléments.11
4.3 Préparation des milieux en laboratoire.11
4.3.1 Généralités .11
4.3.2 Qualité des composants de base de milieux.12
4.3.3 Eau.12
4.3.4 Pesée et réhydratation.13
4.3.5 Dissolution et dispersion .13
4.3.6 Mesurage et ajustement du pH .13
4.3.7 Répartition.13
4.3.8 Stérilisation.13
4.4 Stockage et durée de conservation des milieux préparés.14
4.4.1 Milieux commerciaux prêts à l’emploi.14
4.4.2 Milieux préparés en laboratoire .14
4.4.3 Stockage des milieux en boîte de Pétri.15
4.5 Préparation avant utilisation .15
4.5.1 Fusion des milieux de culture gélosés .15
4.5.2 Désaération des milieux de culture.16
4.5.3 Addition de suppléments .16
4.5.4 Préparation des milieux solides en boîtes de Pétri .16
4.5.5 Incubation des milieux solides en boîtes de Pétri.16
4.6 Mise au rebut des milieux.17
5 Souches d’essai pour essais de performance .17
5.1 Sélection des souches d’essai .17
5.2 Conservation et entretien des souches d’essai.17
5.2.1 Généralités .17
5.2.2 Souches d’essai provenant de sources commerciales.18
5.2.3 Stocks de référence préparés au laboratoire .18
5.2.4 Cultures mères .18
5.2.5 Cultures de travail .18
5.3 Micro-organismes d’essai pour essais de performance de routine .18
5.3.1 Généralités .18
5.3.2 Préparation.19
© ISO 2012 – Tous droits réservés iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO/DIS 11133
6 Essais de performance des milieux de culture finis. 22
6.1 Exigences générales . 22
6.1.1 Critères de qualité généraux . 22
6.2 Contrôle qualité physique et chimique . 22
6.3 Contrôle qualité microbiologique . 22
6.3.1 Généralités . 22
6.3.2 Milieu de référence . 23
6.3.3 Contamination microbienne . 23
6.4 Exigences générales relatives aux essais de performance microbiologique. 23
6.4.1 Généralités . 23
6.4.2 Milieux prêts à l’emploi . 24
6.4.3 Milieux préparés à partir de formules déshydratées commerciales . 25
6.4.4 Milieux préparés à partir de composants individuels de base . 25
6.5 Évaluation de performance et interprétation des résultats. 25
6.6 Milieux et réactifs de confirmation. 25
6.6.1 Milieux de confirmation. 25
6.6.2 Réactifs de confirmation. 25
7 Méthodes pour les essais de performance des milieux de culture solides . 25
7.1 Généralités . 25
7.2 Méthodes pour les essais quantitatifs . 26
7.2.1 Définitions . 26
7.2.2 Méthode quantitative pour les milieux de culture solides . 27
7.3 Essais des milieux de culture utilisés pour la filtration sur membrane. 28
7.4 Méthodes pour essais qualitatifs. 28
7.4.1 Méthode qualitative d’ensemencement en stries. 28
7.4.2 Détermination de la spécificité. 29
7.4.3 Autres méthodes qualitatives pour les milieux solides. 29
8 Méthodes pour les essais de performance des milieux de culture liquides . 29
8.1 Généralités . 29
8.2 Méthode quantitative en tubes pour les essais de performance des milieux
d’enrichissement liquides (méthode de dilution jusqu’à extinction). 29
8.2.1 Généralités . 29
8.2.2 Préparation de la série de dilutions. 30
8.2.3 Mode opératoire pour l’organisme cible . 30
8.2.4 Calcul et interprétation des résultats . 30
8.3 Méthode qualitative en tubes pour les essais de performance des milieux liquides
sélectifs. 31
8.3.1 Généralités . 31
8.3.2 Mode opératoire. 31
8.3.3 Calcul et interprétation des résultats . 31
8.4 Méthode qualitative dans un seul tube (turbidité) pour les essais de performance des
milieux liquides. 32
8.4.1 Généralités . 32
8.4.2 Mode opératoire. 32
8.4.3 Interprétation des résultats . 32
9 Méthodes pour les essais de performance des diluants et des milieux de transport. 33
9.1 Généralités . 33
9.2 Méthode d’évaluation des diluants. 33
9.2.1 Méthode pour les essais quantitatifs des diluants .33
9.3 Méthode d’évaluation des milieux de transport . 33
9.3.1 Généralités . 33
9.3.2 Méthode pour les essais quantitatifs des milieux de transport liquides. 34
9.3.3 Méthode pour les essais qualitatifs des milieux de transport solides. 34
10 Documentation des résultats d’essai . 35
10.1 Informations fournies par le fabricant. 35
10.2 Traçabilité. 35
iv © ISO 2012 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO/DIS 11133
Annex A (informative) Dénomination des composants des milieux de culture dans les normes
d’analyse microbiologique des aliments, des aliments pour animaux et des eaux.36
A.1 Généralités .36
A.2 Peptones.36
A.3 Extraits.36
A.4 Gélose.37
A.5 Autres.37
Annex B (normative) Préparation du stock de référence et de la culture de travail.38
B.1 Constitution du stock de référence à partir d’une souche de référence.38
B.2 Constitution de la culture de travail à partir du stock de référence .39
Annex C (normative) Logigrammes des méthodes pour les essais de performance (7).40
C.1 Méthode quantitative pour les milieux de culture solides : productivité et sélectivité
(7.2.2) .40
C.2 Méthode quantitative en tubes pour les essais de performance des milieux
d’enrichissement liquides — méthode de dilution jusqu’à extinction (8.2).41
C.3 Méthode qualitative dans un seul tube pour les milieux d’enrichissement sélectifs (avec
les micro-organismes cibles, les micro-organismes non cibles ou un mélange de micro-
organismes cibles et non cibles dans le même tube) (8.3).42
C.4 Méthode qualitative dans un seul tube pour les milieux liquides non sélectifs et sélectifs :
turbidité (8.4).43
Annex D (informative) Exemple de fiche de contrôle pour l’enregistrement des résultats des
essais des milieux de culture préparés par le laboratoire utilisateur.44
Annex E (normative) Micro-organismes d’essai pour les milieux de culture couramment utilisés
en microbiologie alimentaire (informations sur le milieu de culture, les conditions de
culture, les micro-organismes d’essai, le numéro de collection des souches d’essai et les
réactions attendues) .45
Annex F (normative) Micro-organismes d’essai pour les milieux de culture couramment utilisés
en microbiologie des eaux .66
Annex G (normative) Utilisation de graphiques de contrôle pour le suivi des essais quantitatifs
des milieux de culture solides .81
G.1 Utilisation de graphiques de contrôle.82
G.1.1 Méthode de validation générale.82
G.1.2 Production d’un deuxième graphique de contrôle .82
G.1.3 Évaluation de performance et interprétation des résultats .84
Annex H (informative) Assurance qualité des milieux de culture – Diagnostic d’anomalie .85
Annex I (informative) Essais quantitatifs des milieux liquides .86
I.1 Généralités .86
I.2 Méthode pour les essais quantitatifs des milieux de culture liquides non sélectifs utilisant
des micro-organismes cibles.86
I.2.1 Mode opératoire.86
I.2.2 Dénombrement et interprétation des résultats .86
I.2.3 Logigramme relatif à la méthode quantitative pour les milieux de culture liquides non
sélectifs utilisant des micro-organismes cibles .87
I.3 Méthode pour les essais quantitatifs de milieux de culture liquides sélectifs utilisant des
micro-organismes cibles et non cibles.87
I.3.1 Mode opératoire.87
I.3.2 Lectures, calcul et interprétation des données.88
I.3.3 Logigramme relatif à la méthode quantitative pour les milieux de culture liquides sélectifs
utilisant des micro-organismes cibles et non cibles.89
Annex J (normative) Définition des essais de performance microbiologique pour les milieux de
culture normalisés.90
J.1 Généralités .90
J.2 Critères de performance, méthodes et objectifs.90
J.3 Choix des souches de contrôle en fonction de leur performance.92
© ISO 2012 – Tous droits réservés v
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO/DIS 11133
J.3.1 Généralités . 92
J.3.2 Évaluation de l’adéquation de nouvelles souches de contrôle . 92
J.3.3 Nouveaux milieux . 93
J.3.4 Nombre de souches par critère. 93
Bibliographie . 95
vi © ISO 2012 – Tous droits réservés
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO/DIS 11133
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 11133 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 9,
Microbiologie, en collaboration avec le comité technique ISO/TC°147, Qualité de l’eau, sous-comité SC 4,
Méthodes microbiologiques, et le comité technique CEN/TC 275, Analyse des produits alimentaires -
Méthodes horizontales.
Les Annexes A, D, H et I sont informatives. Les Annexes B, C, E, F, G et J sont normatives.
Le présent document combine les deux parties précédemment publiées de l’ISO/TS 11133 et inclut
également des exigences applicables aux milieux de culture de microbiologie destinés à l’analyse des eaux.
Le présent document comprend une bibliographie.
© ISO 2012 – Tous droits réservés vii
---------------------- Page: 7 ----------------------
ISO/DIS 11133
Introduction
Dans les laboratoires pratiquant des examens microbiologiques, les principaux objectifs sont la conservation,
la revivification, la croissance, la recherche et/ou le dénombrement d’une grande variété de micro-
organismes. Les milieux de culture sont utilisés dans toutes les méthodes traditionnelles de culture
microbiologique comme dans de nombreuses autres méthodes. Il existe de nombreuses formules de milieux
de culture disponibles dans le commerce et un plus grand nombre encore, destinées à des utilisations
spécifiques, sont décrites dans la littérature.
De nombreux essais et modes opératoires dépendent de l’aptitude des milieux de culture à donner des
résultats homogènes et reproductibles. Les exigences relatives aux milieux peuvent être propres à la fois à
l'échantillon et aux organismes à rechercher. Des milieux de culture satisfaisant à des critères de
performance établis constituent donc un préalable à toute analyse microbiologique fiable. Il convient
d’effectuer un nombre suffisant d’essais afin de démontrer
I) que chaque lot de milieu est acceptable,
II) que le milieu en question répond aux besoins et
III) que ledit milieu peut donner des résultats homogènes.
Ces trois critères constituent une part essentielle des procédures internes de contrôle qualité et, avec la
documentation appropriée, permettent une surveillance efficace des milieux de culture, contribuant ainsi à
l'obtention de données fidèles et fiables. Pour une analyse microbiologique fiabl
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.